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高效液相法测定腰息痛胶囊的含量

来源:用户上传      作者: 谢 斌 王梅娟 刘 璟

  [摘要] 目的:建立高效液相色谱法测定腰息痛胶囊中扑热息痛(对乙酰氨基酚)含量的方法。方法:采用Agilent C18柱(4.6 mm×150 mm,5 μm);流动相甲醇-水-冰醋酸(20∶80∶0.5);流量1.0 ml/min。检测波长249 nm。进样量为20 μl。结果:进样量在20~200 μg/ml浓度时与峰面积呈良好线性关系,r=0.999 96(n=5),平均回收率99.2%,RSD:0.52%。结论:该法简便、准确、结果满意。
  [关键词] 胺息痛胶囊;高效液相色谱法;含量测定
  [中图分类号] R927[文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2008)10(a)-024-02
  
  HPLC determination for Yaoxitong capsule
  XIE Bin, WANG Mei-juan, LIU Jing
  (Yancheng Institute for Drug Control,Yancheng224002,China)
  [Abstract] Objective:To develop a method for detemination for Yaoxitong Capsule by HPLC. Methods:The Agilent C18 (4.6 mm×150 mm,5 μm) was used, Methanol-Water- Acetic acid(20∶80∶0.5) as the mobile phase, the flow rate was 1.0 ml/min, the detection wavelength was 249 nm. The injected quantity of 20 μl Results:The linearity of peak area was good when the injected quantity of Granisetion was in the range of 20~200 μg/ml(r=0.999 96,n=5), The recovery of this method was 99.2%,RSD:0.52%. Conclusion:This method is convenient,accurate and the results of experiment satisfactory.
  [Key words] Yaoxitong Capsule;HPLC;Determination.
  
  腰息痛胶囊主要有效成分是扑热息痛(对乙酰氨基酚),作用是舒筋活络,活血驱风,祛瘀止痛,主要是用于治疗风湿性关节炎,肥大性腰椎胸椎炎,坐骨神经痛,腰肌劳损。因该主药含量测定方法是标准曲线的紫外法测定[1],而标准曲线的紫外法测定操作繁琐且费时,给检验带来了不便。查阅文献[2]并加以摸索,建立了高效液相色谱法,适合于腰息痛胶囊主要有效成分扑热息痛的含量测定,使之简便、准确、结果满意。
  1仪器与试药
  仪器:G1311A四元高效泵液相测定仪,G1314B紫外检测器,Agilent1200色谱工作站,G1322A真空脱气机,G1316A柱温箱,Gary100紫外分光光度计,Waters2695高效液相色谱仪,BP211D电子天平,BT224S电子天平,对乙酰氨基酚对照品(批号:100018~200408中国药品生物制品检定所),腰息痛胶囊(20070203;20070709;20070906;20071103;20071203;20070206河北万岁药业有限公司)。甲醇、乙腈均为色谱纯(Fisher);其他试剂均为分析纯。
  2实验方法与结果
  2.1色谱条件
  色谱柱Agilent色谱柱C18(4.6 mm×150 mm,5 μm)
  
  a.对照品色谱图;b.供试品色谱图
  图1 供试品、对照品色谱图
  流动相甲醇-水-冰醋酸(20∶80∶0.5);流量1.0 ml/min;检测波长249 nm;柱温:30℃;进样体积20 μl,在该色谱条件下对照品、供试品色谱图见图1,理论塔板以对乙酰氨基酚峰计在1 500以上。
  2.2线性关系
  取对乙酰氨基酚对照品约25 mg,精密称定,置25 ml量瓶中,加流动相适量溶解,并加至刻度,摇匀。精密量取0.2、0.5、1.0、1.5、2.0 ml分别置于10 ml量瓶中,加流动相至刻度,摇匀,即得对乙酰氨基酚对照品液,分别取20 μl注入液相色谱仪中,对乙酰氨基酚进样量(C)在20~200 μg时与峰面积(A)呈良好相关性,经统计得回归方程:A=26.541 26 C-486.945 72,r=0.999 96。
  结果表明对乙酰氨基酚在20~200 μg/ml浓度范围内,线性关系良好。
  2.3加样回收率试验
  取已知含量的腰息痛胶囊,批号20070203;20070709;20071103精密测定,加对乙酰氨基酚对照品液,照含量测定方法操作,计算回收率,结果见表1。
  
  2.4精密度试验
  取同一份对乙酰氨基酚对照品溶液,按上述色谱条件,20 μl进样,重复进样6次,其RSD=0.99%(n=6),表明进样精密度较好。
  2.5供试溶液稳定性试验
  取供试品溶液依法在放置0、2、4、8、24 h、各测定1次,放置0 h的与24 h的含量测定结果误差为0.2%,说明供试品溶液稳定性较好。
  2.6含量测定方法
  2.6.1供试品液的制备取腰息痛胶囊10粒,精密量取相当于对乙酰氨基酚10 mg(2份),置100 ml容量瓶中,加流动相80 ml,超声处理1 min使充溶解,加流动相至刻度,摇匀,滤过,即得。
  2.6.2对乙酰氨基酚对照品液的制备取对乙酰氨基酚对照品约10 mg,精密称定,置100 ml量瓶中,加流动相适量溶解,并加至刻度,摇匀,即得对乙酰氨基酚对照品液。
  2.6.3样品测定分别取上述供试品溶液及对照品溶液各20 μl,注入液相色谱仪记录色谱图,按外标法以峰面积计算,即得。
  2.7供试品UV和HPLC检测结果比较
  见表2。
  2.8重现性试验
  取批号为20070203的供试品6份,照“2.6”项下方法操作,用Waters2695高效液相色谱仪,不同的色谱柱,不同批号的试剂,测得对乙酰氨基酚的平均含量为0.16 mg/ml,RSD为0.32%,表明该测定方法有良好的重现性。
  表2 供试品UV和HPLC检测结果比较(n=6)
  
  3讨论
  6个批号的供试品用UV法和HPLC法检测结果比较,两者结果相差较小,由于HPLC法是封闭的色谱系统,故各种化合物的分离受外界的干扰较小,柱效高。而UV是需要显色做标准曲线,操作繁锁,其受反应温度、时间等外界因素影响较大。HPLC法进行含量测定高效、高速、高灵敏度,其结果比UV法操作简便、灵敏、结果准确重复性好,为腰息痛胶囊的质量控制提供了依据。该法专属性强、操作简便、结果准确,在很大程度上节省了工作时间,方便工作人员的日常检测,适应工作需求。
  [参考文献]
  [1]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部标准中药成方制剂第十一册[S].北京:化学工业出版社,1998.WS3-B-2256-96
  [2]中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典[S].二部.北京:化学工业出版社,2005,附录ⅤD.
  (收稿日期:2008-08-05)
  
  注:本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文


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