86例输血前检查疑难标本的原因分析及解决对策
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【关键词】抗体筛查、鉴定；抗体、抗原减弱；ABO亚型；自身抗体；同种抗体
doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2014.04.682文章编号：1004-7484（2014）-04-2345-02输血前血型血清学检查包括：ABO、RhD血型、抗体筛查和交叉配血。本站调查2011――2012年输血患者5210例，其中有86例患者在输血前检查中出现疑难问题，遂对其进行原因分析，并用不同的方法加以解决，保证了患者临床输血及时、安全和有效。1资料与方法
1.1标本来源2011――2012年输血前检查疑难血样86例。
1.2试剂和仪器抗-A、抗-B、抗-A1、抗-AB、抗-H、A2c、抗体筛选细胞和谱细胞（美国Immucor）；人源抗-A、抗-B（中国医科院输血研究所）；反定细胞（上海血液生物医药有限责任公司）。
1.3ABO正反定型试管法。
1.4吸收放散试验、唾液型物质检测、DTT处理自凝红细胞、毛细管离心分离自身和输入红细胞、自身冷抗体的吸收按参考文献[1]操作。
1.5盐水替代法排除缗钱状凝集按参考文献[2]操作。
1.6ABO亚型的确认用血清学方法，按文献[3]标准判断亚型分类。
1.7抗体筛查和抗体鉴定
1.8病历调查卡试配血，按使用说明书操作。
1.9试管法LISS-IAT法交叉配血按参考文献[3]操作。
1.10试管法经典IAT法交叉配血按参考文献[3]操作。
1.11直接抗人球蛋白试验按使用说明书操作。2结果
2.1通过对2011――2012年86例输血前检查疑难标本进行进一步的血清血型学实验，发现主要分为ABO血型鉴定困难和抗筛阳性两类。
2.229例ABO血型定型困难的原因分别为：
2.2.1自身冷抗体3例，患者分别为：淋巴瘤；肺炎。
2.2.2抗体减弱8例，患者按由多至少分别为：老年人；白血病；肿瘤患者化疗后；外伤或消化道大量失血后。
2.2.3ABO亚型6例，分别为：A亚型3例：A32例，Am1例；B亚型2例：Bm1例，Bel1例；A亚B1例：A3B1例。
2.2.4血浆干扰7例，产生缗钱状凝集，患者分别为：多发性骨髓瘤；肺癌。
2.2.5抗原减弱3例，均为白血病患者。
2.2.6输血近期输入O型洗涤红细胞，造成正定混合外观2例。
2.357例抗体筛查阳性的原因分别为：
2.3.1同种抗体25例抗-E8例、抗-D3例、抗-cE5例、抗-e3例、抗-Ce2例、抗-JkA1例、抗-S1例、抗-M1例、抗-Lea1例。其中抗-M和抗-Lea为IgM性质的抗体，其余为IgG性质的抗体。除抗-M和抗-Lea两例外，其余患者均有输血史或妊娠史。
2.3.2自身抗体30例温自身抗体21例、混合型自身抗体6例、冷自身抗体3例。均为自免溶贫患者。
2.3.3血浆干扰2例均为MDS患者。3讨论
我站29例正反定型不符的标本原因分别为：自身冷抗体3例、抗体减弱8例、亚型6例、血浆异常7例、抗原减弱3例、近期输入O型洗涤红细胞2例。对影响ABO血型定型的原因，我们的解决办法是：
3.1自身冷抗体对于反定型时出现的Ac、Bc、Oc和自身对照均凝集的标本，可将血清和红细胞分别在37℃预温后再将其混合后离心判读结果；也可用自身红细胞吸收自身冷抗体后，再用吸收后血清做反定型试验。对于冷凝集素效价较高，红细胞已经凝集的标本，可用37℃盐水反复洗涤至细胞不凝集，还可采用DTT处理红细胞后再正定型。
3.2抗体减弱对于反定型时出现的抗体缺失，可采用延长反应时间法，将反定结果在室温或4℃放置5-15分钟后离心判读结果。
3.3ABO亚型正定型加做：抗-A1、抗-AB和抗-H；反定型：A1c、A2c；吸收放散、唾液型物质检测。
3.4血浆异常有些疾病如多发性骨髓瘤等会引起缗钱样凝集，可采用盐水添加试验来驱散缗钱样假凝集。
3.5抗原减弱白血病可能会引起抗原减弱，可将正定结果在室温或4℃放置一段时间后离心看结果；加做吸收放散试验、唾液型物质检测并询问患者以前的血型。
3.6近期输血对于正定出现的混合外观或其它异常现象，一定要询问患者的近期输血史。另外做毛细管离心，将患者自身红细胞和输入红细胞分离后，再用分离获得的患者自身红细胞定型。在交叉配血前做抗体筛查非常重要，笔者对我站57例抗体筛查阳性的标本进行了抗体鉴定（抗体性质和抗体特异性）、直接抗人球蛋白试验等试验，发现其中同种抗体25例、自身抗体30例、血浆干扰2例。对于抗体筛查阳性的患者，我们采用的交叉配血方法是：①同种抗体：IgM性质的同种抗体先用试管盐水介质直接离心法，选择阴性的供者再做LISS-Coombs卡配血。IgG性质的同种抗体采用LISS-Coombs卡配血。对交叉配血相合的献血员进行抗体对应抗原的检测，选择无相应抗原的血液输注。②自身抗体：选择试管法经典IAT法配血。③血浆干扰：选择试管法LISS-IAT法配血。对于抗体筛查阳性的患者我们都做抗体鉴定，并将抗体鉴定的结果长期保存，这是因为随着时间的推移，有些抗体会减弱甚至无法检出，配血相和，输血后会引起免疫记忆细胞在短时间产生大量抗体，引起溶血性输血反应。参考文献
[1]李勇，马学严，主编.实用血液免疫学[M].北京：科学出版社，2006：628，633，658，662，660.
[2]吕鹏，主编.最新输血技术学[M].北京：人民卫生出版社，1994：406，412.
[3][英]杰夫.丹尼尔，主编.人类血型[M].北京：科学出版社，2007：36-43.
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