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重楼不同部位皂苷含量测定分析研究进展

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  摘 要:重楼作为重要的草本草药,其中皂苷含量对其发挥药效具有重要作用。其含多种甾体皂苷,在治疗毒蛇咬伤、抗肿瘤、止血、抗菌。消炎等方面具有良好的药效,因此备受医学、植物、化学等各个领域的科学关注,对此也做了多方面的研究和探索。通过对国内外相关的研究文献和资料,对近年来研究者们对重楼不同部位皂苷含量测定分析的研究进展进行整理归纳,以期为今后各领域研究学者们对重楼不同部位的研究提供一定的参考,同时也能方便查阅相关方法。
  关键词:重楼皂苷;不同部位;测定分析
   重楼是生长周期较长的草本药用植物,根状茎棕褐色,叶壮如伞,夏季开黄绿色花。为百合科重楼属植物华重楼ParispolyphyllaSmithvar.chinenisi(Franch)Hara、云南重樓ParispolyphyllaSmithvar.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz.或七叶一枝花ParispolyphyllaSmithvar,chinensis(Franch.)Hara的干燥根茎。[1]一年四季都可在山上采挖到野生的,但秋季是最佳采集时期,味道微苦,性寒,有一点点毒性,常见药用云南白药中就含有重楼的有效成分。在医治疔疮痈肿,咽喉肿痛,毒蛇咬伤,跌扑伤痛等方面具有良好的药效。重楼被医学、植物、化学等各领域的研究者不断深入研究,其药用价值得到不断潜力的挖掘,从原本直接使用到分离提取有效成分研制合成其他产品。随着市场的开拓,对野生重楼的采集量大大加大,加剧了野生资源的濒危。重楼的对生存环境的选择是非常苛刻的,生长周期比较长,种子还具有“二次休眠”的特性,[2]作为如此稀缺的植物,因对不同部位的有效成分皂苷含量的不了解,有的部位直接就被舍弃了,造成资源的浪费。虽然目前对重楼的研究报道还是比较多,但是对其不同部分皂苷含量的测定分析研究进展进行系统归纳总结的比较少,本文对重楼不同部位皂苷分析研究的国内外文献进行了归纳总结,以期为提高重楼药材以及他用提供一定的依据,为充分利用重楼不同部位药用价值提供理论与技术参考。
  1 重楼所含的活性化学成分
  国内外研究学者对重楼不同部位的活性化学成分进行了提取,主要为甾体皂苷、游离氨基酸、黄酮、微量元素等多种化合物,其中含有发挥药效的活性成分甾体皂苷就有几十种,主要为重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ等,约占总化合物的80%。不同品种、不同产地、不同年限的重楼不同部位其皂苷含量多少也不尽相同。
  2 地上部分皂苷含量的测定
  由于对重楼的传统药用就是对其根部进行取材,因此对重楼活性成分的分离提出以对其根茎部位最为研究。而野生重楼被采回后,地上部分基本都是被舍弃掉了,随着野生重楼量的减少,以及科学研究的深入,学者们对地上部分开始了研究。中国科学院昆明植物化学开放实验室的李恒、陈昌祥等研究者于20世纪 80 年代中就对滇重楼茎和叶进行了研究,并从中提取皂苷及其它活性成分。陈昌祥等[3-5] 从滇重楼Paris polyphylla Sm.var.yunnanensis(Fr.)H-M.地上部位分离鉴定了2 个皂苷元,8个甾体皂苷和两个山奈酚黄酮苷。Qin 等[6-8]对滇重楼地上部分的茎和叶进行了研究,分离得到了41个甾体皂苷。黄芸等[9]从北重楼的地上部位中分离得到15个甾体皂苷。尹伟等[10]从七叶一枝花地上部位共分离纯化得到4 个植物甾醇类,4个黄酮类。而且,还从滇重楼、七叶一枝花、北重楼的地上部位分离鉴定出了54个甾体皂苷。赵猛等从华重楼的地上部分体积分数75%乙醇提取物进行分离纯化鉴定了8个黄酮苷、2个植物甾醇和1个其他类成分。
  3 地下部分皂苷含量测定比较研究
  近年来国内外学者运用多种皂苷含量测定方法对从不同产地、不同品种、不同年限重楼的根茎、根、须根等多方面对其皂苷含量进行测定和比较,对各地重楼地下各部分的药用价值大小提供了理论参考。
  Yang 等[11]以乙酸酐-硫酸(20∶1)为显色剂,以310.5nm为检测波长,采用紫外分光光度法,检测结果发现华重楼根茎中总皂苷含量最高,其次为根。叶方等[12]利用高效液相色谱法(HPLC)测定了重楼根茎和须根中4种重楼皂苷含量,结果须根中四种重楼皂苷总量>根茎,而薯蓣皂苷类成分含量没什么差别,但 偏诺皂苷类成分含量在须根中要高点。叶霄等[13]采用高效液相色谱法对不同产地不同品种的重楼根茎和须根中重楼皂苷I、II、VI、VII的含量进行测定,发现须根均有重楼皂苷,以偏诺皂苷类成分为主,4种皂苷含量分布没有规律。王琳娜等[14]利用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS法)测定了6个品种、不同年限的重楼属植物根茎中9种皂苷的含量。发现皂苷含量会随重楼年限而改变,呈现出先上升后下降的变化趋势。重楼的皂苷含量峰值因品种也不同,长药隔重楼、七叶一枝花与竹溪重楼、球药隔重楼和毛重楼分别在第4、6、7年达到最高值。不同重楼属植物中的皂苷种类以及皂苷含量也有不同,七叶一枝花、滇重楼、球药隔重楼、球药隔重楼中重楼皂苷中含量最高的分别是重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ和Ⅶ、所有。吴建平等[15]利用高效液相色谱法测定了九种重楼中的皂苷含量,发现根茎与须根中有皂苷成分是七叶一枝花(华重楼)和云南重楼(滇重楼)。而多叶重楼、宽叶重楼、长药隔重楼、狭叶重楼等须根中含有部分皂苷成分。
  4 地上与地下部分重楼皂苷含量测定比较研究
  邹亮等[16]采用紫外检测器的HPLC(HPLC - UV)测定了不同产地滇重楼不同部位中4种重楼皂苷含量,不同产地皂苷含量不同,栽培皂苷含量要高于野生的,而且不同部位也有不同,其中根茎含量最高,其次是叶,再是果实、须根,而茎中最少。刘佳等[17]采用 HPLC 检测华重楼、七叶一枝花、球药隔重楼和狭叶重楼不同部位的4种重楼皂苷进行测定,发现地下根茎均高于地上部分,其中七叶一枝花含量最高,而且4种重楼的地上茎、外种皮、果皮分别与地下根茎中重楼皂苷I含量存在正相关性。李晨等[18]利用HPLC法测定了不同产地的多叶重楼根茎、茎、叶中4种重楼皂苷的含量,发现多叶重楼根茎、茎、叶中4种重楼皂苷总含量具有极显著性差异,根茎、叶中重楼皂苷Ⅰ、Ⅶ含量较高。王彩步等[19]利用HPLC法测定了不同居群多茎滇重楼根茎、茎、叶中主要活性成分4种重楼皂苷含量,发现同居群多茎滇重楼不同部位中4种重楼皂苷含量和总含量有差异,根茎中主要是重楼皂苷Ⅰ、Ⅶ,茎中是重楼皂苷Ⅶ,叶中皂苷活性成分分布不规律。杨亚利等[20]采用HPLC法检测七叶一枝花、华重楼皂苷含量,发现地下根茎的薯蓣皂苷及皂苷元含量要高于其他部位,华重楼的地下根茎含有较高的薯蓣皂苷元,七叶一枝花的外种皮和华重楼的叶片中薯蓣皂苷含量较高,七叶一枝花果皮与华重楼叶片中薯蓣皂苷元含量较高,七叶一枝花全植株的薯蓣皂苷及皂苷元总含量最高。戴雪雯等[21]采用超高效液相色谱法(UHPLC)测定不同种植基地滇重楼根茎中4种重楼皂苷及总皂苷的含量,并用液质联用(LC-MS)技术定性分析其甾体皂苷有效成分的差异。发现根茎中重楼皂苷Ⅰ及总皂苷含量差异较小,重楼皂苷Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ含量差异较大;重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅲ(薯蓣皂苷)、重楼皂苷Ⅴ、重楼皂苷Ⅶ是根茎中甾体皂苷的主要存在形式,根茎中重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷H、重楼皂苷Ⅵ、纤细薯蓣皂苷差异较大。   5 结语
  重楼生长周期较长,药用价值较大,市场需求量增加,导致野生的重楼资源急剧减少,对其各个部位的有效成分进行充分利用是解决资源浪费的最有效手段。通过对国内外的研究文献和相关资料来看,重楼属的地上部分也具有与根茎类似的皂苷含量,对地上部分的皂苷含量测定也在不断深入,也有不少学者对地上和地下部分的皂苷含量进行对比,发现重楼的地上茎、叶、种子、果皮和外种皮等地上部分皂苷含量还是相当丰富的,所以地上部分的利用对于重楼医药价值研究有重要的意义。充分利用重楼各部位的皂苷成分能够有效地解决供不应求的肆意挖掘的野生重楼资源的危机,减轻对重楼资源有用部分的随意摒弃的压力。
  参考文献:
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  基金项目:阿坝师范学院2017年校级青年基金项目(ASC17-05)
  作者简介:黄睿(1990-),女,四川人,硕士,助教,研究方向:生物资源与利用研究。
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