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薄层色谱法鉴别荭草中的黄酮类化学成分

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  【摘要】目的:建立荭草中黄酮类化学成分的鉴别方法。方法:利用酸水解得到黄酮苷元的提取条件,以槲皮素和山奈酚为对照品,增加了荭草中黄酮类化学成分的薄层色谱鉴别。结果:在供试品色谱与两种对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的清晰荧光斑点,分离度高。结论:所建立的方法能很好地对荭草中的黄酮类成分进行质量控制。
  【关键词】荭草;槲皮素;山奈酚;薄层色谱
  荭草为蓼科植物红草Polygonum orientale L.的干燥果穗及带叶茎枝,具有清热解毒,祛风除湿,活血消肿功能,临床上用于风湿性关节炎,冠心病,心胃气痛等,为贵州少数民族用药[1]。国内不少学者利用高效液相色谱法(HPLC)对荭草的指纹图谱进行了大量的研究[2],而以荭草为君药研制的注射剂已批准进入临床研究。另据文献报道,荭草花的活性成分主要有黄酮类成分和四环三萜类皂苷,如荭草素和荭草苷、异荭草素及其苷、山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷、1,3,5-三羟基苯、3,3′-二甲氧基鞣花酸-4-O-β-D-葡萄糖苷、山柰素-3-O-α-L-鼠李糖苷、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷、山柰素等[3]。然而,荭草作为中药材却缺乏完善的质量标准和普遍适用于县级市的有效分析手段。因此,为控制该中药材质量,本文利用薄层色谱法(TLC)对荭草药材花类部分的黄酮类化学成分进行了研究。现报道如下。
  1仪器与试药
  1.1仪器薄层色谱扫描仪-成像系统(生产厂家:瑞士CAMAG公司;型号:REPROSTAR 3),Sartorius BP211D电子天平,超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司,250W/40kHz)。
  1.2试药荭草(批号:20111123,购于东莞市国药有限公司);地榆对照药材(批号:121286-200402,购于中检所);槲皮素对照品(来源:中检所,批号:槲皮素110081-200304),山奈素对照品(来源:中检所;批号:110861-200002);硅胶G薄层板(德国Merck公司),甲醇为分析纯(广州市化学试剂厂),水为超纯水,其余试剂均为分析纯。
  2方法与结果
  取荭草样品适量,粉碎,过3号筛;取粉末约1g,置150mL具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25mL,密塞,精密称定,超声处理30分钟(功率250W,频率40kHz),放冷,精密称定,滤过,精密量取续滤液20mL,置另一具塞锥形瓶中,加入甲醇10mL、25%盐酸10mL,加热回流1小时,放冷,提取液转移至50mL量瓶中,甲醇定容至刻度,滤过,取续滤液,即得。照薄层色谱法(《中国药典》2010版一部附录ⅥB)试验,吸取上述3种溶液各2μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20:14:1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铝乙醇溶液,热风吹干。结果表明,供试品色谱中,在与槲皮素和山奈酚对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的清晰荧光斑点,分离度符合要求。结果见图1。
  
  3讨论
  3.1笔者曾经采用不同品牌的薄层板,包括德国Merck公司、青岛海洋化工集团有限公司和自制手铺薄层板,以及不同的温度、湿度下对地榆配方颗粒的定性鉴别进行比较,发现实验结果无显著性差异,表明该TLC方法耐用性良好,受外界因素的影响很小,适合作为荭草药材质量控制手段。
  3.2荭草花部分的活性成分主要有黄酮类成分主要为荭草素和荭草苷、异荭草素及其苷、山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷、山柰素-3-O-α-L-鼠李糖苷、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷、山柰素等[2],即荭草花的活性成分主要来源于以2种活性单体槲皮素[4]和山奈素为苷元的黄酮苷。考虑到药材的成分种类及含量受产地、采收季节、生态环境的影响很大,因此本实验选择测定酸水解后得到的、相对稳定的2个苷元(槲皮素、山奈素),侧面反映本品有效成分的存在,从而估计其有效性。
  
  参考文献
  [1]贵州省药品监督管理局编. 贵州省中药材、民族药材质量标准(2003年版)[S]. 贵阳:贵卅l科技出版社,2003:267.
  [2]王爱民,王永林,兰燕宇,等. 荭草药材指纹图谱的研究[J]. 中成药,2006,28(1):5-7.
  [3]李勇军,何 迅,刘志宝,等. 荭草化学成分的研究[J]. 中国中药杂志,2009,34(20):2613-2615.
  [4]朱宇同,王艳芳,王新华. 槲皮素药理作用研究进展[J]. 天然产物研究与开发,2003,15(2):171-173.
  
  作者简介:胡明霞,女,(1967-),湖北医科大学大专毕业,主管护师,现于湖北省仙桃市中医院骨科工作

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