中药骨疏康联合运动早期干预大鼠去卵巢后骨质疏松的研究

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　　摘要　目的：评价中药骨疏康联合运动早期预防骨质疏松疗效。方法：三月龄去卵巢大鼠为模型，分为单纯运动组(OVX+ET)、中药治疗组(OVX+GSK)、运动加中药组(OVX+GSK+ET)、假去势组(SHAM)、倍美力组(0VX+ES)、去势组(0VX)，治疗时间3月。治疗结束时测各组大鼠骨密度；检测骨生物力学性能。结果：①大鼠股骨灰重／干重和股骨、腰椎体骨密度在OVX+GSK+ET组显著高于OVX+ET、OVX+GSK、OVX，但达不到SHAM组和OVX+ES水平，有统计学差异；②L5腰椎压缩试验最大承载应力在去卵巢各组之间无显著差异。股骨三点弯曲试验在OVX+GSK+ET和OVX--ET负荷能力最强。结论：①运动联合中药早期干预能对抗去卵巢引起的大鼠骨量丢失，有协同作用，能改善骨生物力学性能；②跑步运动能改善股骨生物力学性能，减少骨折发生。关键词 中药 骨疏康运动 骨质疏松骨生物力学
　　骨质疏松(PMO)是以全身骨量减少，骨组织微观结构退化为特征，导致骨脆性增加以及易于发生骨折的全身代谢性骨病。PMO的发病率和死亡率已位于非感染性疾病的第四位，仅次于心血管疾病、肿瘤和糖尿病之后，影响全球约2亿人，其中80％是女性。PMO妇女骨脆性增加，骨折发生率30～40％，同时，由骨折引起的高致残率不仅严重危害妇女健康，而且增加社会、家庭的负担。因此，如何对PMO进行早期干预不仅是医学问题，还是社会问题。
　　
　　1　材料与方法
　　
　　1.1 实验材料；选用3月龄清洁级雌性SD大鼠50只，由浙江医学科学院动物实验中心提供，除灌胃外，标准饲料和去离子水喂养，自由饮食。
　　1.2　实验方法：称重后，用3％戊巴比妥腹腔内注射麻醉，背侧切口切除卵巢。SHAM组手术路径和麻醉同上，找到卵巢后切除部分卵巢周围脂肪，不做卵巢切除。
　　1.2.1　动物分组：因麻醉意外死亡2只。随机分为：正常对照组(假去势，SHAM)8只；骨质疏松模型组(去势组，OVX)8只；去势后运动组(OVX+ET)7只；去势后中药组(OVX+GSK)8只；去势后运动+中药组(OVX+ET+GSK)8只；去势后雌激素组(OVX+ES)9只。
　　1.2.2　治疗方法：手术后正常饲养7天后开始治疗，时间为3个月。SHAM组、OVX组、OVX+ET组按lOrel／kg蒸馏水灌胃；()VX+GSK组和OVX+ET+GSK组骨疏康按4.8g／kg(相当于l临床剂量的10倍)灌胃；OVX+ES组给予倍美力0.6mg／kg灌胃，使用前配成混悬液(浓度为0.595mg／ml)。每日1次。OVX+ET组和OVX+ET+GSK组按要求进行跑台训练。每月称重1次。
　　1.2.3　运动方案：参照Bedford设计的动物运动负荷标准，采用段氏BF98型鼠类跑台进行运动训练。每周连续训练5天，休息2天。
　　1.2.4　取材方法：OVX+ES组和OVX组因灌胃死亡各1只。3个月后，大鼠称重麻醉处死，将右股骨和腰椎取出，剔除软组织，置于-20℃保湿保存。
　　1.2.5　检测方法：①骨密度测定：取右侧股骨及第五腰椎，常温解冻。使用双能x线骨密度仪及所附的小动物软件，测定骨密度。②生物力学测定：腰椎压缩试验：咬除第五腰椎关节突、椎板等表面突起部分，置于万能材料机上进行压缩试验，试验速度2mm／min，微机自动绘制载荷一变形曲线。股骨三点弯曲试验：右侧股骨进行试验，至其发生骨折。加载速度为2mm／min，支点跨距为20mm，微机描记载荷一变形线。③测股骨干重和灰重：取股骨三点弯曲试验后的股骨，置于油浴箱内，调整油浴温度为105°，烘2小时。称重，为股骨干重。将烘干的股骨置人马弗炉400℃2小时、600℃3小时灰化，冷却后称其重，为灰重，计算灰重／干重。
　　1.3　统计方法：SPSSl6.0软件对数据进行统计处理。组间采用单因素方差分析，双侧P<0.05为有显著性差异。
　　
　　2　结果
　　
　　2.1　大鼠股骨灰重／干重和股骨、腰椎体骨密度：大鼠股骨灰重／干重和股骨、腰椎体骨密度OVX+GSK+ET组显著高于OVX+ET、OVX+GSK、OVX，但达不到SHAM组和OVX+ES水平，有统计学差异；OVX+GSK显著高于OVX；OVX和OVX+ET两组之间无显著性差异。见表1。
　　2.2　生物力学性能测试：L5腰椎压缩试验最大载荷、最大应力及弹性模量在去卵巢各组(除外OVX+KS组)之间无显著差异。股骨三点弯曲试验最大载荷、最大应力、弹性模量在OVA+GSK+ET和OVX+ET最强(P<0.05或P<0.01)，OVX+GSK组和OVX组间无明显差别。见表2。
　　
　　
　　3　讨论
　　
　　3.1　运动联合中药治疗对骨矿物和骨密度的影响：骨质疏松是以骨强度下降、骨折风险性增加为特征的骨骼系统疾病，骨强度反应骨骼的两个主要方面：骨矿密度和骨质量。骨的生物力学性能是反应骨质量的重要指标。而骨密度和骨灰重是反应骨量的金标准。本实验结果表明大鼠股骨灰重／干重和股骨、腰椎体骨密度在OVX+GSK+ET组显著高于OVX+ET、OVX+GSK、OVX，有统计学差异，但达不到SHAM组和OVX+ES水平；OVX+GSK显著高于OVX；OVX和OVX+ET两组之间无显著性差异。结果提示中药治疗能改善去卵巢大鼠的骨量丢失，而单纯中等负荷跑台运动并不能增加骨质疏松大鼠的骨量，但是中药与运动联合治疗有对抗因去势引起骨量丢失的作用。与国内外其他学者研究结果类似。
　　3.2　运动联合中药治疗对骨生物力学性能影响：在本实验中股骨三点应力试验最大载荷、弹性模量和最大应力以运动联合中药组最高，达到雌激素组和假去势组水平，单纯运动组也比单纯中药组显著增高，而单纯中药治疗组与OVX组相比无统计学差异，但在第五腰椎的压缩试验中最大载荷、弹性模量和最大应力在OVX、OVX+GSK、OVX+GSK+ET组明显低于SHAM和雌激素治疗组，而组间均无差异。结果提示大鼠跑台运动能改善股骨骨生物力学性能，但对腰椎生物力学性能无作用，可能由于因为本实验设计的跑台运动对大鼠的腰椎没有产生轴向的应力刺激因而不能改善腰椎骨生物力学性能。
　　骨疏康为中药复方制剂，其主要成分为淫羊藿、熟地黄、丹参、黄芪、骨碎补等；方中以淫羊藿补肾强筋骨；熟地益精填髓，滋阴补血；丹参补血且散瘀滞；黄芪补气升阳，利水退肿，并具有调节免疫和抗衰老作用；骨碎补有补肾强骨、续伤止痛的功效。全方共奏补肾填精壮骨、益气养血化瘀之效，从而调整全身机能，防治骨质疏松症。

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