我市流动人口人乳头状瘤病毒感染型别分析
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作者: 徐俊芳
[摘要] 目的 了解本地区流动人口妇女宫颈感染人乳头瘤病毒（HPV）基因型的分布情况。 方法 利用核酸分子杂交技术对妇女宫颈的脱落细胞进行HPV检测并具体分型。 结果 总共检测1 030例，HPV感染204例，感染率为19.81%；感染率排在前5位的依次是HPV16（占17.65%）、58（占9.31%）、33（占7.84%）、52（占6.86%）和11（占4.90%）。双重感染41例，占感染人数的20.10%；三重感染15例，占感染人数的7.35%；四重感染2例，占感染人数的0.98%。 结论 本地区流动人口宫颈HPV感染率为19.81%，常见型别为HPV16、58、33、52、11； 其次混合感染以高危型感染为主。HPV分型检测在宫颈癌筛查中具有重要意义。
[关键词] 宫颈疾病；人乳头状瘤病毒；基因型；流动人口
[中图分类号] R373 [文献标识码] B [文章编号] 1674-4721（2012）07（b）-0117-02
宫颈癌是目前威胁妇女健康的主要杀手，其预后在妇科肿瘤中相对较差，我国因为人口基数巨大，所以宫颈癌的发生例数和导致死亡的例数均为世界前列。现已明确人乳头瘤病毒（HPV）感染是宫颈癌发生的主要病因[1]，尤其是高危型HPV[2]。到目前为止，已发现的HPV亚型有100多种，而不同地区感染的HPV亚型存在很大差异，尽管是同一地区，其感染者HPV亚型也不尽相同，所以本研究主要对本地区HPV感染患者的亚型做一回顾性统计分析，以更好的确定本市流动人口中人乳头状瘤病毒感染的型别，指导临床治疗。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择本地区2011年1月～2012年1月自愿进行HPV检测的妇女1 030例， 年龄21～60岁，平均（33.5±4.2）岁，产次0～4次，平均（1.5±0.5）次。
1.2 试剂与仪器
HPV DNA抽提试剂盒（德国Qiagen公司）。人乳头瘤病毒核酸扩增分型检测试剂盒（凯普生物科技有限公司）。ABI7000荧光定量 PCR扩增仪（美国ABI公司）。HybrMiaxTM医用核酸分子快速杂交仪（香港凯普公司）。
1.3 方法
1.3.1 标本的采集及保存方法 患者取膀胱截石位，置入窥阴器暴露宫颈，利用宫颈刷取材后退出宫颈刷，将标本保存于细胞保存液内，注意低温保存尽早送检，原则上送检时间在1周内。
1.3.2 HPV分型检测步骤 主要步骤分为4步：HPV DNA提取；HPV PCR扩增；核酸分子快速导流杂交以及HPV显色分型。操作者严格按照试剂和机器操作说明书进行，结果判读以试剂盒说明书为标准，其中高危HPV亚型包括16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68和CP8304，低危HPV亚型包括HPV6、11、43、42和44，2型或2型以上者为多型感染。
2 结果
1 030例妇女接受HPV检测，HPV感染人数204例，感染率为19.81%，检出高危型基因20种，低危型基因4种，仅低危型基因HPV42未检出。单一型感染146例，占感染人数的71.57%。感染率排在前5位的依次是HPV16（占17.65%）、58（占9.31%）、33（占7.84%）、52（占6.86%）、11（占4.90%）。双重感染41例，占感染人数的20.10%， 高危型混合感染30例，高、低危型混合感染10例，低危型混合感染1例。三重感染15例，占感染人数的7.35%。四重感染2例，占感染人数的0.98%，另有其他低危类型未在表中列出。见表1。
表1 HPV双重、多重感染中HPV亚型分析（%）
3 讨论
3.1 HPV感染与宫颈病变有关
HPV感染与生殖道感染密切相关，严重者还能引起宫颈癌的发生，目前女性生殖道感染中HPV感染者已跃居我国性病发病原因的第二位[3]。根据HPV病毒亚型与患者感染后的临床表现，临床公认将其分为高、低危2型，而高危型则与宫颈上皮内瘤样病变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）发生密切相关，尤其是育龄期妇女，而且与宫颈癌的发生发展有一定相关性，低危型HPV则是引起尖锐湿疣和轻度宫颈上皮内瘤样病变的相关因素，发病后大多可以自然缓解[4]。本研究中HPV感染率为19.81%，其中对于HPV DNA的分型检测主要采用快速导流杂交技术，并结合现代PCR和生物芯片技术，将所有HPV病毒亚型分为2类，可以在检测是否存在HPV感染的同时对其进行亚型的区分，适合本所的临床特点，达到了确诊与治疗同时进行的效果。以往研究表明，HPV感染的亚型与宫颈癌的病理类型也有一定的关系，其中宫颈鳞癌患者中检出HPV16者占多数，而宫颈腺癌以及腺鳞癌者则以HPV18占主导，所以对于宫颈癌患者进行HPV的检测以及亚型的分类，对判断患者的病理类型以及预测患者预后有一定作用[5]。我国学者研究发现，HPV16和18型阳性者的5年生存率分别为73.1%和15.2%[6]。本研究发现单一型别HPV感染率达到71.57%，其中最高的为HPV16（占17.65%）和HPV58（占9.31%），分别在10.0%左右。混合感染者58例，占28.43%（58/204），大多为2种亚型HPV病毒感染。鉴于以往使用的荧光定量PCR 技术，其检测范围窄，漏检率高，本研究仅检出91例，而使用联合检测技术后，确定其漏诊率达到55.49%，尤其是对于混合性感染。
3.2 HPV型别分布存在地区差异
在美国HPV检出亚型中排在前5位的分别是56、53、16、58和52，而在非洲则是52、35、58、51和16，亚洲的印度则是以16、18、33、58和35为主，本组研究发现，本地区HPV感染者多为单一型，其中双重感染仅占20.10%，三重或四重感染则更少，其中HPV病毒感染亚型的多少可能与性伴侣的数量有一定关系。
3.3 HPV分型检测的意义
本研究对受检者实施的HPV检测，包括HPV DNA提取、PCR扩增、核酸分子杂交和分型4步。相对于以往单纯使用的荧光定量技术，有效降低了漏检率，尤其是多重感染，通过结合以往文献，笔者认为对于HPV感染者区分其亚型，可以有效指导宫颈癌的初步筛选，进行有针对性的高危人群预防。
[参考文献]
[1] 赵昀，崔淑慧，任丽华，等. 细胞学、HPV高危型检测在宫颈病变筛查中的应用[J].中国妇产科临床杂志，2006，7（2）：89-93.
[2] 金志军，张莺. 人乳头瘤病毒与宫颈癌[J]. 中国实用妇科与产科杂志，2003，19 （3）：129-130.
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[5] 王金桃，高尔生. HPV感染与宫颈癌关系研究进展[J]. 国外医学妇幼保健分册，2003，14（6）：399.
[6] 钱德英，岑坚敏，王丁，等. 高危型人乳头状瘤病毒DNA检测与细胞学联合检查对子宫颈癌前病变筛查的研究[J]. 中华妇产科杂志，2006，41（1）：34-37.
（收稿日期：2012-04-20 本文编辑：林利利）
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