左乙拉西坦对癫痫患儿的神经保护作用

来源:用户上传      作者: 仇安丽　任志民　房绍红　陈桂英　郝艳秋

　　[摘要] 目的 观察左乙拉西坦（LEV）对癫痫患儿血清神经元特异性烯醇酶（NSE）的影响，探讨LEV对癫痫患儿的神经保护作用。 方法 参与本次实验研究的有40例癫痫患儿和10例健康儿童。采用放免法测健康儿童及癫痫患儿发作72 h之内血清NSE的浓度，以此为标准对LEV治疗的癫痫患儿予8周评估。将40例癫痫患儿随机分成LEV组和VPA（丙戊酸钠）组，分别监测两组癫痫患儿在治疗前（0周）与治疗后2周、8周血清NSE浓度变化。结果 干预前LEV与VPA两组的NSE指标水平无显著差异（P = 0.398），明显高于正常儿童组（P < 0.01）；治疗2周后，LEV组、VPA组的NSE指标均有所下降，与正常儿童间的血NSE指标差异均显著（P < 0.01）；治疗8周后，NSE值在三组间有显著性差异，LEV组与正常儿童间的差异不显著（P = 0.669），VPA组与LEV组及正常儿童组的差异显著（P < 0.01），均高于二者的平均值。结论 左乙拉西坦会降低癫痫患儿血清NSE的水平，可能具有神经保护作用。
　　[关键词] 癫痫；左乙拉西坦；丙戊酸钠；神经元特异性烯醇酶
　　[中图分类号] R742.1 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2013）25-0031-02
　　Neuroprotection effect of LEV in children with epilepsy
　　QIU Anli1 REN Zhimin2 FANG Shaohong2 CHEN Guiying1 HAO Yanqiu2
　　1.Department of Pediatrics， Harbin Children’s Hospital， Harbin 150010， China； 2.Department of Pediatrics， the Second Hospital Affiliated to Harbin Medical University， Harbin 150086， China
　　[Abstract] Objective To investigate effects of levetiracetam （LEV） on serum neuron-specific enolase （NSE） for understanding its neuronal protection in children with epilepsy. Methods Forty children with epilepsy and ten healthy children participated this study. The children with epilepsy were randomized into two groups： one was treated under LEV （n=20） and the other was under VPA （n=20） for eight weeks. The NSE level in the serum was assessed in the healthy children once. The NSE level of children with epilepsy was assessed within 72 hours after seizure before the treatment as well as at 2 and 8 weeks after the treatment. Results Before the treatment， the serum NSE level was comparable between children treated with VPA and children treated with LEV （P = 0.398）， but was higher than that in healthy children （P < 0.01）. After the two-week-treatment， the NSE level was reduced in children treated with VPA （P < 0.01） and children treated with LEV（P < 0.01） but was still significantly greater than that of normal children （P < 0.01）. After the eight-week treatment， the NSE level was comparable between children under the LEV treatment and normal children （P = 0.669）， while the higher NSE level was observed in children under the VPA treatment in comparison with normal children （or children with the LEV treatment） （P < 0.01）. Conclusion LEV decreases the serum NSE level in children with epilepsy and thus may have potential protection of neuronal damage.
　　[Key words] Epilepsy； LEV； VPA； Neuron-specific enolase
　　癫痫（epilepsy）是小儿常见的中枢神经系统疾病，是慢性脑损伤疾患，频繁发作会导致脑的不同区域神经元死亡及损伤，常导致患儿智力低下，不能生活自理，严重影响患儿的生活质量。左乙拉西坦（LEV）是一种新型抗癫痫药物，具有独特的化学结构及作用机制，良好的药代动力学特性[1]：高效的生物利用度，线性动力学，较低的血浆蛋白结合力等，LEV已广泛应用于部分性癫痫发作。 　　近年来国内外除了研究LEV抗癫痫作用外，更关注其神经保护作用，Haichen Wang等[2]在闭合性脑损伤（CHI）及蛛网膜下腔出血（SAH）鼠模型、Gibbs等[3]在电诱导癫痫持续状态（SE）模型中均已经证明了LEV具有神经保护作用。而蒋莉等[4]研究报道血清神经元特异性烯醇酶（NSE）是临床检测脑损伤的有效指标。本文我们对2012年2～9月哈尔滨医科大学附属第二医院儿内科门诊及儿童医院神经科门诊癫痫患儿的临床资料进行研究，旨在探讨LEV引起癫痫患儿血清NSE浓度变化及其意义，分析其神经保护作用，从而指导临床合理用药。
　　1 对象与方法
　　1.1研究对象
　　1.1.1诊断与分类标准 根据国际抗癫痫联盟1981年癫痫发作的国际分类及1989年癫痫及癫痫综合征的国际分类[5]、临床表现和EEG检查均符合癫痫的诊断，并将发作类型分为全身性发作和部分性发作。
　　1.1.2研究纳入标准 ①新诊断癫痫患儿是2012年2～9月哈尔滨医科大学附属第二医院儿内科门诊及儿童医院神经科门诊就诊的患儿，就诊前半年内起病，无热惊厥发作频繁或癫痫持续状态，呈全身性发作，临床表现和EEG检查均符合癫痫诊断；②对照组为年龄、性别相仿的同期门诊健康体检儿童，入选儿童及其监护人了解本实验的研究目的和方法，愿意参与本研究；③确诊癫痫前未服抗癫痫药物（AEDS）；④仅LEV、VPA单药治疗且治疗后无发作；⑤头CT或MRI检查无明显异常；⑥丙戊酸钠组检测血药浓度。
　　1.1.3 病例排除标准 ①初诊患儿癫痫发作类型是部分性发作；②VPA、LEV治疗过程中发作未控制，改用、合用其他AEDs等添加治疗者；③脑发育迟滞或既往有脑部疾病史；④未按照约定时间定期复诊。
　　1.2 研究方法
　　1.2.1分组与设计 依据纳入标准将入组病例40例随机分成两组，LEV组20例，男12 例，女 8例，年龄12月～11岁，平均（6.00±3.02）岁。VPA组20例，男10例，女10例，年龄9月～11岁，平均（5.00±3.12）岁。LEV组20例癫痫患儿采用优时比公司的开普兰片，规格250 mg，每日（10～30） mg/kg，口服。VPA组20例，给予丙戊酸钠口服，每日（20～30） mg/kg，口服。正常组10例，男5例，女5例，年龄4～8岁，平均（5.1±1.8）岁。
　　1.2.2检验方法 采集LEV组、VPA组癫痫患儿治疗前，治疗后2周、8周全血及10例健康儿童的全血，离心后留1.5 mL的血清分别贴上标签，置-70℃冰箱冻存待测。采用ELESA分析法测定NSE含量（试剂盒为ADL公司产品），严格按照说明书进行操作。
　　1.3统计方法
　　采用SPSS18.0软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（x±s）表示。固定时间因素（0周、2周、8周）LEV组与正常组或VPA组的比较，在每个时间点上做单因素方差分析或两样本t检验，P < 0.05为差异有统计学意义。
　　2 结果
　　LEV组对癫痫患儿治疗后血清NSE浓度的变化见表1。健康儿童组各随访时间点的血清NSE指标无显著差异。从各时间点看，干预前LEV与VPA两组的血清NSE指标水平无显著差异（P = 0.398），但明显高于正常儿童组（P <0.01）；治疗2周后，LEV组、VPA组的血清NSE指标均有所下降，与正常儿童间的NSE指标差异均显著，但VPA组高于LEV组，LEV组高于正常儿童组；治疗8周后，VPA组与LEV组及正常儿童组的差异显著（P < 0.01），均高于二者的平均值，而LEV组与正常儿童间的血清NSE浓度差异不显著（P =0.669）。干预前后各组之间存在交互效应（F=86.816，P<0.01）。
　　3 讨论
　　癫痫是小儿神经系统常见病，是以神经元异常放电所致的暂时性中枢神经功能失常为特征的综合征。癫痫发作时，脑组织存在缺血缺氧，由于神经元对缺血缺氧最为敏感， 因此即使短暂的供血供氧障碍也会造成神经元的损伤。神经元特异性烯醇酶（NSE）分布于神经细胞及神经内分泌细胞中，是一种糖酵解酶，与神经细胞分化成熟有关，并参与神经细胞的能量代谢过程。神经细胞受损后，NSE随细胞崩解而释放入脑脊液中，脑胶质细胞和其他神经组织中不含有这种酶，成为神经细胞损伤的重要标志。因而可以利用这种酶在癫痫发作前后的变化来了解神经元损伤情况[6]。Lasxmikants等[7]动物模型实验中发现单次癫痫发作或是癫痫持续状态（SE）均可造成脑损伤导致脑功能异常。近年来无论是动物实验或临床研究证实，惊厥发作后血清NSE的变化与神经元死亡的发生发展规律一致，认为血清NSE 可能作为临床检测脑损伤的有效指标[4]。
　　VPA 除抗癫外还具有神经保护和抗凋亡作用。Chen等[8]在大鼠中脑星型胶质细胞中发现VPA 具有诱导神经营养及神经保护作用。本研究中，VPA治疗前后血清NSE逐渐降低，也证实了其神经保护作用。LEV是一种新型抗癫痫药物，其抗癫痫机制不明，多数研究认为，LEV与脑内突触囊泡蛋白SV2A结合，调节突出囊泡循环与神经递质释放到突出间隙控制癫痫发作[9]。近年来对LEV神经保护作用的研究较少，多为体外研究。Sendrowski K等[1]通过体外光镜下神经元细胞形态测试和乳酸脱氢酶释放活动，证明LEV能够阻止低氧诱导下海马神经细胞死亡，高剂量LEV组神经细胞存活率高于对照组二倍。Haichen Wang等[2]在闭合性脑损伤（CHI）及蛛网膜下腔出血（SAH）鼠模型中通过测量大脑中动脉的直径证明LEV能够改善损伤的脑细胞功能，减少CHI及SAH鼠模型中的血管痉挛及神经元损伤的组织学改变。Klitgaard等[10]发现在毛果云香碱诱导的癫痫发作模型中LEV可以减少海马细胞死亡，增加海马细胞兴奋性。Gibbs等[3]在电诱导SE模型中发现，LEV能有效防御SE后线粒体机能障碍和氧化应激，揭示了其神经保护活动优于其抗癫痫特性。在本研究中，LEV组、VPA组癫痫患儿抽搐发作72 h内血清NSE浓度均显著升高，与正常组有明显差异，LEV组、VPA组治疗2周时血NSE浓度下降（LEV组较VPA组下降明显），但与正常组仍有差异，治疗8周时LEV组血清NSE浓度接近正常，与正常组无差异，而VPA组血清NSE浓度下降，但与正常组有差异。本研究可以看到在0～8周治疗期间，接受LEV组治疗患者血清NES浓度比接受VPA组治疗患者血清NES浓度有明显减少，同时，LEV组治疗患者血清NES浓度变化的速度比VPA组治疗患者血清NES浓度变化的速度快，综上所述，LEV影响了癫痫患儿发作后血清NSE浓度的变化，减轻癫痫患儿的脑神经元损伤，可能对癫痫患儿具有一定的神经保护作用，对临床用药及改善患儿生活质量有很大的意义。LEV与VPA在治疗过程中均有效的控制了癫痫发作，其中有4例患儿出现了嗜睡，1例易怒，未发现对记忆力，注意力等认知功能的影响。由于配合本实验患儿例数有限，LEV对癫痫患儿血清NSE的影响及其所揭示的神经元保护作用还待进一步研究，以便临床应用。 　　[参考文献]
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　　[2] Haichen Wang，Junling Gao，Timothy F，et al. Levetiracetam is neuroprotective in murine models of closed head injury and subarachnoid hemorrhage[J]. Neurocrit Care，2006，5（1）：71-78.
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　　（收稿日期：2013-05-21）
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