浅析蓝每盛世组培快繁技术
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摘要：本文以盛世茎段作为外植体试验材料，研究了不同培养基对诱导率、增殖倍数的影响。通过研究蓝莓盛世品种茎段组织培养再生体系，确定各培养阶段的最佳培养条件，为蓝莓盛世品种组培快繁提供依据。
关键词：蓝莓;盛世;外植体蓝莓，又称越橘，因其果实中富含花青苷、鞣化酸等抗氧化物质，具有缓解眼疲劳、预防心血管疾病、提高人体免疫力等功效，颇受全球消费者青睐，被列为人类五大健康水果之一，堪称21世纪“世界水果之王”。蓝莓盛世品种是2000年由美国佛罗里达大学选育出的，树体生长健壮，丰产性强，平均单果重2.37克，果实天蓝色，果蒂痕小且干，质地极硬，风味甜且高抗茎干溃疡病，具有广阔的市场前景。
1 材料与方法
1.1 实验材料
该试验以蓝莓盛世半木质化茎段为外植体，采自辽宁省农科院大连分院试验基地。
1.2 实验方法
无菌株系的建立：晴天上午取温室内生长健壮、腋芽饱满的一年生枝条，去掉叶片，剪成1.0～1.5厘米长的单芽茎段，用饱和洗衣粉澄清液浸l0分钟后，再用自来水冲洗30分钟，在超净工作台上用75%酒精浸30秒，无菌水洗1次，再用0.1%升汞灭菌6～10分钟后，用无菌水冲洗3次，再放入带3层滤纸的培养皿中，待茎段上的水被滤纸吸附后，将单芽茎段接种在诱导培养基上。
诱导培养基筛选：不定芽诱导以WPM为基本培养基，附加不同浓度的玉米素ZT（0.3，0.5，0.8，1.0，1.5）毫克/升，添加一定浓度的赤霉素GA30.5毫克/升与生长素IAA0.3毫克/升添加蔗糖30克/升，琼脂4.6克/升，将培养基pH值调至5.4每天光照12小时，光照强度1500～3000勒克斯，培养温度25°C。诱导试验每个处理只接种了10个单芽，3次重复，20天调查其污染率与诱导率。
增殖培养：增殖培养以WPM为基本培养基，附加不同浓度的玉米素ZT（0.3，0.5，0.8，1.0，1.5）毫克/升，添加一定浓度生长素IAA0.3毫克/升，糖30克，琼脂4.6克调pH值至5.4，待诱导出来的不定芽长高至2～3厘米时，接种到设定的培养基上，每处理接种3瓶，每瓶5个1.0～1.5厘米单芽茎段，3次重复，60天调查增殖倍数及生长势。
炼苗：选生长健壮的试管苗进行移栽，将试管苗在大棚内逐渐打开瓶口，经常转动瓶身，使之适应外界条件，一般需3～5天。
应用DPS软件对试验数据进行方差分析。
2 结果与分析
2.1 不同ZT浓度对盛世外植体诱导率的影响
由表1可以看出，盛世的污染率都不高，这与在温室内取外植体有一定的关系，枝条上的杂菌相对露地上要少很多。诱导率随着ZT浓度的增加而升高，当ZT浓度增加到1.0毫克/升时，诱导率达86.67%，当ZT浓度增加到1.5毫克/升时的诱导率下降为83.33%。由此可以看出随着ZT浓度的增加外植体诱導率逐渐升高，当ZT浓度达到一定高度时，诱导率达到最高，再增加ZT浓度，诱导率反而下降。
2.2 不同ZT浓度盛世的增殖倍数的影响
由表2可见，盛世增殖培养ZT浓度在0.3毫克/升时，试管苗生长较慢，随着ZT浓度增加，试管苗株高、生长表现均有所提高，当ZT浓度增加到0.8毫克/升时，试管苗株高4.47厘米，试管苗生长健壮形态正常，增殖倍数达6.4倍，有效苗比例高，生长表现均好于其他处理，随着ZT浓度的增加基部大量萌发丛生芽，增殖倍数变大，苗变细变弱，玻璃化苗增加将来可用于移栽的有效苗减少，不利于优质种苗的生产。
随着ZT浓度增加，当ZT浓度达到0.8毫克/升时，盛世试管苗增殖率最高，达6.4倍，较其他处理差异显著。
2.3 移栽
移栽前用烟熏剂（异丙威、腐霉利、百菌清等）熏棚。做宽1.0～1.2米的苗床，长按棚宽而定，苗床土要进行消毒，移栽基质为水苔，水苔浸泡1～2天后，铺在消毒好的苗床上，厚度5厘米左右，浇透水后再用多菌灵对水苔进行杀菌。取出培养瓶内的植株，剪成2～3厘米长枝段，用1000倍液的海藻素浸泡5分钟，扦插在经过消毒处理好的水苔上。枝1.5～2.0厘米，栽完浇水，做成小拱棚，上覆无纺布，大棚上外遮阳。温度控制在25°C左右，相对湿度80%以上，一周后逐渐打开小拱棚，20天后植株开始生根，顶尖长出新叶。
3 小结
试验结果表明，蓝莓盛世品种的最佳诱导培养基为WPM+ZT1.0毫克/升+GA30.5毫克/升+IAA0.3毫克/升+糖30克+琼脂4.6克，诱导率高达86.67%;最佳增殖培养基为WPM+ZT0.8毫克/升+IBA0.1毫克/升+糖30克+琼脂4.6克，增殖倍数为6.4倍。蓝莓盛世诱导与增殖培养过程中，通过提高玉米素ZT的浓度，可有效地提高诱导率和繁殖倍数。外植体诱导试验中过高的ZT浓度会抑制腋芽的萌发，而在增殖试验中过高的ZT浓度会使试管苗的丛生芽数量增加过大，苗变弱，玻璃化倾向增加，质量急剧下降。
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