18种化学杀菌剂对樱桃茎腐病菌的室内毒力测定

来源:用户上传      作者:刘晓琳　于晓丽　王群青　田园园　王丽丽　王培松　王英姿

　　摘要：为测定不同化学杀菌剂对樱桃茎腐病病菌的毒力，采用平皿法分析25%吡唑醚菌酯悬浮剂（SC）、20%肟菌酯SC、30%王铜SC、80%三乙磷酸铝水分散粒剂（WG）、30%烯酰·咪鲜胺SC、43%氰霜·百菌清SC、80%福美双可湿性粉剂（WP）、40%氰霜唑·烯酰吗啉SC、33.5%喹啉铜SC、18%烯肟·氟环唑SC、20%氰霜唑SC、35%氟啶胺·烯酰吗啉SC、30%烯酰·甲霜灵WG、80%烯酰吗啉WG、60%锰锌·氟吗啉WP、60%嘧菌酯WG、77%硫酸铜铝WP、722 g/L霜霉威盐酸盐水剂（AS）等18种药剂对樱桃茎腐病的抑制效果。结果表明，18种供试杀菌剂对樱桃茎腐病病菌的毒力差别较大，吡唑醚菌酯对樱桃茎腐病病菌的抑制效果最好，其EC50为0.153 9 mg/L;氰霜·百菌清、氰霜唑·烯酰吗啉、氰霜唑、烯酰·甲霜灵、烯酰吗啉、烯肟·氟环唑等化学杀菌剂对樱桃茎腐病病菌也有较好的防治效果，其EC50分别为1.103 3、0.582 9、0.831 0、0.426 0、6.051 7、7.723 7 mg/L。福美双、肟菌酯、王铜、三乙磷酸铝、烯酰·咪鲜胺、喹啉铜、氟啶胺·烯酰吗啉、锰锌·氟吗啉、嘧菌酯、硫酸铜铝、霜霉威盐酸盐等化学杀菌剂对樱桃茎腐病病菌菌丝生长的抑制效果较差，其EC50在10.416 8～948.653 6 mg/L 之间。该研究结果为田间防治樱桃茎腐病的有效化学药剂选择提供了参考和理论依据。
　　  关键词：樱桃茎腐病;烟草疫霉;平皿法;化学杀菌剂;毒力
　　  中图分类号：S436.629   文献标志码： A
　　 文章编号：1002-1302（2020）19-0106-05
　　收稿日期：2019-12-17
　　基金项目：国家自然科学基金（编号：31701751）;山东省农业微生物重点实验室开放基金（编号：SDKL2017015）;山东省自然科学基金（编号：BS2015NY004）。
　　作者简介：刘晓琳（1996—）女，山东潍坊人，硕士研究生，从事植物病理学研究。E-mail：liuxiaolin116055@qq.com。
　　通信作者：于晓丽，博士，高级农艺师，从事植物病理学研究。Tel：（0535）6352015;E-mail：yuxiaoli92jn@126.com。
　　我国大樱桃的主要产区是烟台市和大连市，烟台市自19世纪70年代开始栽培种植大樱桃，至今已有140多年的历史。烟台市种植樱桃面积最广、引进最早、产量最高、品种众多，现在大樱桃已成为烟台市的“城市名片”[1]。樱桃茎腐病是由烟草疫霉（Phytophthora nicotianae）引起的病害，主要危害叶片和新生枝条的茎部，导致叶片和新生枝条干枯死亡[2-3]。调查发现，樱桃茎腐病是导致樱桃苗木大面积死亡的主要病害，在多雨高温的年份发病的苗圃更容易出现毁园现象[3-4]。化学药物防治仍然是病虫害防治的主要手段，生物杀菌剂防治虽然具有安全无污染的优点，对食品安全具有重要的作用[5]，但在灾害严重泛滥的时候，大多数的生物杀菌剂治疗效果并不明显，不能够与化学杀菌剂混用，且容易受到环境因素的制约和干扰。化学杀菌剂杀菌范围广、见效快，混合使用能够发挥更好的药效，在病害严重时期优点更加突出[6]。目前对烟草疫霉引起的植物病害，其田间防治主要以化学药剂防治为主，但随着杀菌剂的大量使用，随之而来的是病原菌对化学药剂产生抗药性。据报道，烟草疫霉已对甲霜灵产生了抗药性[7]。因此，为了在田间更好地防治樱桃茎腐病，须要筛选更多安全高效的化学杀菌剂在田间交替使用，避免产生抗药性。本研究通过室内毒力测定对25%吡唑醚菌酯悬浮剂（SC）、50%肟菌酯SC、30%王铜SC、80%三乙磷酸铝水分散粒剂（WG）、30%烯酰·咪鲜胺SC、43%氰霜·百菌清SC、50%福美双可湿性粉剂（WP）、40%氰霜唑·烯酰吗啉SC、33.5%喹啉铜 SC、18%烯肟·氟环唑SC、20%氰霜唑SC、35%氟啶胺·烯酰吗啉SC、30%烯酰·甲霜灵WG、80%烯酰吗啉WG、60%锰锌·氟吗啉WP、60%嘧菌酯WG、77%硫酸铜钙WP、722 g/L霜霉威盐酸盐水剂（AS）等18种化学药剂进行室内筛选试验，以期为田间科学选药提供理论依据。
　　1 材料与方法
　　1.1 试验药剂
　　试验主要药剂有25%吡唑醚菌酯SC（江苏剑牌农化股份有限公司）、50%肟菌酯SC（南通泰禾化工股份有限公司）、30%王铜SC（广东大丰植保科技有限公司）、80%三乙磷酸铝WG（利民化工股份有限公司）、30%烯酰·咪鲜胺SC（江苏辉丰农化股份有限公司）、43%氰霜·百菌清SC[中农立华（天津）农用化学品有限公司]、50%福美双WP（江西中讯农化有限公司）、40%氰霜唑·烯酰吗啉SC（青岛星牌作物科学有限公司）、33.5%喹啉铜SC（浙江海正化工股份有限公司）、18%烯肟·氟环唑SC（沈阳科创化学品有限公司）、20%氰霜唑SC（江苏剑牌农化股份有限公司）、35%氟啶胺·烯酰吗啉SC（安道麦马克西姆有限公司）、30%烯酰·甲霜灵WG（青岛奥迪斯生物科技有限公司）、80%烯酰吗啉WG（江苏健神生物农化有限公司）、60%锰锌·氟吗啉WP（沈阳科创化学品有限公司）、60%嘧菌酯WG（江苏明德立达作物科技有限公司）、77%硫酸铜钙WP（西班牙艾克威化学工业有限公司）、722 g/L霜霉威盐酸盐AS[拜耳作物科学（中国）有限公司]。
　　1.2 试验方法
　　1.2.1 含药培养基配制
　　1 L 10% V8汁固体培养基：100 mL V8汁中加入1 g CaCO3，与水1 ∶9（体积比）稀释，加入15 g琼脂粉，121 ℃高溫灭菌15 min。 　　用Eppendorf微量可调移液枪取1 mL 10 000 mg/L 杀菌剂母液，用灭菌去离子水将供试药剂配成一定浓度的稀释液，取1 mL稀释液加入49 mL 10% V8汁固体培养基中，混合均匀后倒入培养皿中制成含药平板。
　　1.2.2 平皿法
　　2018年4月3日在室内无菌环境下，用接种针挑取直径为6 mm的菌丝块，放置于含药平板中央，以不加药平板作为对照，每个浓度重复3次，26 ℃恒温培养5 d。应用十字交叉法垂直测量平板菌落直径，计算药剂对樱桃茎腐病病菌菌丝生长的抑制率。抑制率=（对照菌落直径-处理菌落直径）/对照菌落直径×100%。
　　1.3 数据分析
　　用DPS 18.10软件对数据进行回归分析，计算各处理浓度的对数值（X）和菌丝生长抑制率概率值（Y），求毒力回归方程和相关系数，得出生物杀菌剂对樱桃茎腐病病菌的抑制中浓度（EC50），并得到95%置信区间。
　　2 结果与分析
　　2.1 18种化学杀菌剂对樱桃茎腐病病菌菌丝生长的抑制效果
　　由表1可知，25%吡唑醚菌酯SC的抑制效果最明显，在药剂浓度为0.20～25.00 mg/L范围内，抑制率为49.41%～79.22%，药剂浓度较低时依然有较好的抑制效果;30%烯酰·甲霜灵WG次之，在药剂浓度为0.20～25.00 mg/L范围内，抑制率为2549%～92.94%;40%氰霜唑·烯酰吗啉SC在药剂浓度为0.20～25.00 mg/L范围内，抑制率为3961%～100.00%;20%氰霜唑SC在药剂浓度为020～25.00 mg/L范围内，抑制率为47.84%～6431%;43%氰霜·百菌清SC在药剂浓度为020～25.00 mg/L范围内，抑制率为27.45%～8392%;50%肟菌酯SC在药剂浓度为0.20～2500 mg/L范围内，抑制率为1.96%～60.00%;30%王铜SC在药剂浓度为0.39～25.00 mg/L范围内，抑制率为0.78%～17.65%;80%三乙磷酸铝WG在药剂浓度为0.39～25.00 mg/L范围内，抑制率为0.39%～10.20%;30%烯酰·咪鲜胺SC在药剂浓度为0.39～25.00 mg/L范围内，抑制率为118%～35.69%;50%福美双WP在药剂浓度为020～25.00 mg/L范围内，抑制率为0.78%～6039%;33.5%喹啉铜SC在药剂浓度为0.20～25.00 mg/L 范围内，抑制率为1.18%～45.10%;18%烯肟·氟环唑SC在药剂浓度为0.20～25.00 mg/L 范围内，抑制率为17.65%～55.29%;35%氟啶胺·烯酰吗啉SC在药剂浓度为0.39～12.50 mg/L范围内，抑制率为3.92%～100.00%;80%烯酰吗啉WG在药剂浓度为1.56～25.00 mg/L范围内，抑制率为11.76%～92.55%;60%锰锌·氟吗啉WP在药剂浓度为3.13～25.00 mg/L范围内，抑制率为1.96%～92.94%;60%嘧菌酯WG在药剂浓度为0.20～25.00 mg/L范围内，抑制率为1804%～37.25%;77%硫酸铜钙WP在药剂浓度为0.20～25.00 mg/L范围内，抑制率为0.39%～22.35%;722 g/L霜霉威盐酸盐AS在药剂浓度为0.20～25.00 mg/L范围内，抑制率为19.22%～3882%。
　　2.2 毒力测定结果
　　经DPS回归分析各处理浓度的对数值（X）和菌丝生长抑制率概率值（Y），得到不同杀菌剂对樱桃茎腐病病菌的毒力回归方程、相关系数和抑制中浓度（EC50）。室内毒力测定结果（表2）表明，18种供试杀菌剂对樱桃茎腐病病菌的毒力差别较大。分析EC50表明，吡唑醚菌酯对病菌的抑制效果最好，其EC50为0.153 9 mg/L;氰霜·百菌清、氰霜唑·烯酰吗啉、氰霜唑、烯酰·甲霜灵、烯酰吗啉、烯肟·氟环唑等化学药剂对樱桃茎腐病病菌也有较好的防治效果，其EC50分别为1.103 3、0.582 9、0831 0、0426 0、6.051 7、7.723 7 mg/L。福美双、肟菌酯、王铜、三乙磷酸铝、烯酰·咪鲜胺、喹啉铜、氟啶胺·烯酰吗啉、锰锌·氟吗啉、嘧菌酯、硫酸铜铝、霜霉威盐酸盐等对樱桃茎腐病病菌的防治效果较差，其EC50在10.418 6～1 948.653 6 mg/L之间。
　　3 结论与讨论
　　该试验供试的18种化学杀菌剂对樱桃茎腐病病菌的毒力差别较大。其中，吡唑醚菌酯、氰霜·百菌清、氰霜唑·烯酰吗啉、氰霜唑、烯酰·甲霜灵、烯酰吗啉、烯肟·氟环唑等化学药剂对樱桃茎腐病的病原菌烟草疫霉的防效较好，其EC50分别为0153 9、1.103 3、0.582 9、0.831 0、0.426 0、6.051 7、7723 7 mg/L;福美双对病菌的EC50虽然较高，为14.406 1 mg/L，但作为一种保护性杀菌剂，在感病前或感病初期使用能够提高植物抗性，有较好的保护效果;吡唑醚菌酯被用来防治子囊菌、担子菌、半知菌和卵菌纲真菌引起的病害，并且对黄瓜白粉病、葡萄霜霉病、马铃薯晚疫等均有较好的防治效果[8];氰霜·百菌清在防治甜瓜霜霉病、葡萄霜霉病上效果较好，其2种有效成分对卵菌纲引起的病害有很好的防治作用，2种有效成分作用机制不同，能够延缓抗药性的产生[9];氰霜唑·烯酰吗啉对作物具有高效的保护、治疗和内吸作用，具有效期长，与其他杀菌剂没有交叉抗性等优点;氰霜唑作为新型的低毒杀菌剂，有效期长、具有很好的保护活性和一定的内吸和治疗活性等优点，对卵菌的所有生长阶段均有作用，且对已经对甲霜灵产生的抗性或敏感性的菌株依然有活性[10];烯酰吗啉主要被用于防治葡萄等果树上的霜霉病和晚疫病等卵菌病害，防治效果较好[11];烯肟·氟环唑是三唑类与甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的复配制剂，对病害具有预防和治疗活性;福美双是一种低毒、广谱保护性杀菌剂，对多种作物的霜霉病、疫霉病等病害均具有较好的防治效果[12-13]。该研究结果为樱桃茎腐病的田间防治提供了高效化学杀菌剂选择的理论依据。结合当年降雨、温湿度等气象资料及该病害田间发病的情况[2]，适时适量用药，以達到防治该病害的目的。 　　参考文献：
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