十种杀菌剂对当归根腐病菌的室内毒力测定
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摘要：为探明不同杀菌剂对当归（Angelica sinensis）根腐病菌的室内抑菌活性，采用菌丝生长速率法测定10种杀菌剂对茄病镰刀菌（Fusarium solani）和尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）2种主要当归根腐病菌的室内毒力。结果表明，根腐病菌对不同杀菌剂的敏感性差异较大，其中恶霉灵、多菌灵和代森锰锌对2种病原菌均具有较强的抑制作用。
关键词：当归（Angelica sinensis）;根腐病;室内毒力测定
中图分类号：S435.672 文獻标识码：A
文章编号：0439-8114（2019）05-0054-02
Abstract： In order to find out the indoor antibacterial activity of different fungicides against Angelica sinensis root rot， the indoor virulence of 10 fungicides against two main fungi of Angelica sinensis root rot was determined by mycelial growth rate method. The results showed that the sensitivity of these two main fungi to different fungicides was quite different. Among them， hymexazol， carbendazim and mancozeb had strong inhibitory effects on both pathogens.
Key words： Angelica sinensis; root rot; indoor toxicity test
当归（Angelica sinensis）是一种大宗名贵的中药材，以根入药，性温，味甘苦辛，具有补血活血、调经止痛、调节人体免疫功能以及抗缺氧、抗癌、抑菌、抗动脉硬化及护肤美容等功效及作用[1]。当归主要分布于甘肃省，另外陕西、云南、四川、湖北、宁夏、山西和贵州等省区均有栽培，中国当归主要产于甘肃省定西市东南部，以岷县产量多，质量好，栽培历史最为悠久，被誉为道地药材[2，3]。
近年来，随着药用植物面积的增加以及品种野生变家种，病害问题日益突出，其中根腐病是发生最为严重的病害之一。当归根腐病危害当归根系及地上茎，首先叶片失水卷曲、凋谢下垂于地面，后期叶片上半部分完全伏于地面枯死，根茎部及根部可见湿腐症状，最后全株枯死[4，5]，是当归生产中的一种主要病害，严重影响当归产量与品质。
经过调查及病原菌分离，采用形态及分子生物学手段鉴定，并结合前人的研究结果，确定茄病镰刀菌（Fusarium solani）和尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）2种病原菌是引起该地区根腐病的主要病原菌[6]。本试验选用10种杀菌剂，就当归根腐病进行了室内毒力测定，对其抑菌效果进行了综合评价，旨在筛选对当归根腐病主要致病菌抑制效果理想的杀菌剂，为筛选防治当归根腐病高效、低毒、低残留杀菌剂奠定基础。
1 材料与方法
1.1 供试菌株
采集当归根腐病病株，带回实验室， 采用常规组织分离法分离病原菌并纯化培养，经形态学及分子生物学测序鉴定后使用。菌株一般保存于PDA斜面上，置于4 ℃冰箱中备用，使用前进行活化。
1.2 供试杀菌剂
30%恶霉灵水剂，四川国光农化股份有限公司;50%锰锌·氟吗啉可湿性粉剂，中化农化有限公司;72%甲霜·锰锌可湿性粉剂，利民化工股份有限公司;50%甲基硫菌灵可湿性粉剂，四川国光农化股份有限公司;50%多菌灵可湿性粉剂，江苏蓝丰生物化工股份有限公司;80%代森锰锌可湿性粉剂，美国陶氏益农化工有限公司; 50%氟吗·乙铝可湿性粉剂，中化农化有限公司;75%百菌清可湿性粉剂，利民化工股份有限公司;25 g/L咯菌腈悬浮剂，先正达作物保护有限公司;70%烯酰·双脲氰水分散粒剂，深圳诺普信农化股份有限公司。
1.3 室内毒力测定
采用菌丝生长速率法[7]测定10种杀菌剂对根腐病菌的毒力。用无菌水将供试杀菌剂稀释成各梯度浓度，然后用此稀释液配制含杀菌剂PDA平板。取培养6 d的病原菌菌落，用打孔器打取直径为6 mm的菌饼，将此菌饼移植于含杀菌剂培养基上，菌落面朝下，每处理重复3次，以加入等量无菌水制成的PDA平板为对照，将各处理培养皿倒置于28 ℃恒温培养箱内培养。4 d后采用十字交叉法测量各菌落直径大小，计算抑菌率。抑菌率=（对照菌落直径-处理菌落直径） /（对照菌落直径）×100%]。以杀菌剂质量浓度的对数值（x）为横坐标，各处理浓度的生长抑菌率（y）为纵坐标，求毒力回归方程、抑制50%目标菌所需杀菌剂浓度（EC50）和相关系数[8，9]。
2 结果与分析
2.1 10种杀菌剂对茄病镰刀菌的毒力测定
根据对茄病镰刀菌的室内毒力测定结果，求得毒力回归方程（表1）。10种杀菌剂对茄病镰刀菌的抑制作用由强到弱依次为甲基硫菌灵、百菌清、恶霉灵、多菌灵、代森锰锌、锰锌·氟吗啉、甲霜·锰锌、氟吗·乙铝、烯酰·双脲氰、咯菌腈。其中甲基硫菌灵的EC50最小，只有0.568 3 mg/L，抑制作用最大;而咯菌腈的EC50最大，为270.204 4 mg/L，抑制作用最弱。
2.2 10种杀菌剂对尖孢镰刀菌的毒力测定 根据对尖孢镰刀菌的室内毒力测定结果，求得毒力回归方程（表2）。10种杀菌剂对尖孢镰刀菌抑制作用由强到弱依次为恶霉灵、多菌灵、代森锰锌、甲霜·锰锌、甲基硫菌灵、百菌清、锰锌·氟吗啉、氟吗·乙铝、烯酰·双脲氰、咯菌腈。其中恶霉灵的EC50最小，只有0.636 7 mg/L，抑制作用最大;而咯菌腈的EC50最大，为143.040 8 mg/L，抑制作用最弱。
3 讨论
毒力回归方程能有效反映不同浓度杀菌剂与抑菌效果的关系，EC50表示抑制50%目标菌所需杀菌剂浓度，是衡量杀菌剂毒力强弱最可靠的标准，可以利用EC50对不同种类杀菌剂毒力强弱进行比较[10-12]。EC50越大表明杀菌剂的毒力越弱，病害对其敏感度越低，反之，杀菌剂毒力越强，病害对其敏感度越高[13]。本研究采用菌丝生长速率法测定了10种杀菌剂对当归根腐病菌的室内毒力，结果表明，对茄病镰刀菌抑制作用从强到弱依次为甲基硫菌灵、百菌清、恶霉灵、多菌灵、代森锰锌、锰锌·氟吗啉、甲霜·锰锌、氟吗·乙铝、烯酰·双脲氰、咯菌腈;对尖孢镰刀菌抑制作用从强到弱依次为恶霉灵、多菌灵、代森锰锌、甲霜·锰锌、甲基硫菌靈、百菌清、锰锌·氟吗啉、氟吗·乙铝、烯酰·双脲氰、咯菌腈。甲基硫菌灵、百菌清、恶霉灵、多菌灵、代森锰锌对茄病镰刀菌EC50均小于10 mg/L，毒力高，而对尖孢镰刀菌毒力高的杀菌剂为恶霉灵、多菌灵、代森锰锌、甲霜·锰锌，EC50均小于10 mg/L。因此，综合考虑各因素，恶霉灵、多菌灵和代森锰锌对当归根腐病有较好的防治效果，建议在生产中交替使用以减弱抗药性的产生。
然而，由于田间与实验室环境的差异，在实际使用时还需进行田间防效试验，另外，根腐病是典型的根部土传病害，以菌丝和菌核在土壤和病残组织中存活，其存活时间较长，发病后防治困难，因此，建议采取以预防为主，多种防治相结合的综合防治措施。
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