家畜弯曲杆菌病的分析、诊断和防治
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摘要:弯曲杆菌病的病原是弯曲杆菌。该菌可引起患病动物出现腹泻,还可造成牛、羊和犬的流产、不孕以及禽类的传染性肝炎等疾病。人类若食用被该菌污染的肉类,对人的健康将带来巨大危害。养殖户需要了解弯曲杆菌病的病原和流行特点,通过实验室诊断可确诊该病,并根据病型采取合理的应对措施。
关键词:家畜;弯曲杆菌病;诊断;防治
中图分类号:S858.2 文献标识码:B文章编号:2095-9737(2019)07-0119-02
1 病原和流行特点
弯曲杆菌是革兰氏阴性弯曲的杆状菌,与呼吸道疾病和肠道疾病有关。对于生殖性疾病,通过性接触(牛胎儿弯曲杆菌性病亚种)或者通过食入(胎儿弯曲杆菌胎儿亚种和空肠弯曲杆菌,常见于绵羊和山羊,牛很少见)感染侵害生殖道的彎曲杆菌。对于肠道疾病,通过直接或间接粪-口腔途径感染与肠道疾病相关的弯曲杆菌(空肠弯曲杆菌、大肠弯曲杆菌),并且可能是主要的传播方式。
2 实验室诊断
2.1 样本采集
生殖性疾病(牛):用于培养和观察的样本最好取自公牛的阴茎包皮,通过吸引作用将包皮垢收集到受精管。如果培养母牛样本,应从阴道前面采集样本。不考虑性别,全群取10%或20头牛(或更多)用于诊断检测的采样。
生殖疾病(绵羊和山羊):来自肝脏和流产胎儿皱胃的样本是最佳的,胎盘和流产胎儿的体液通常也大量感染。
肠道疾病:家畜粪便样品常被用于空肠弯曲杆菌感染的诊断。
2.2 直接检查
生殖性疾病(牛):少量的弯曲杆菌与大量的正常菌群混在一起时,在革兰氏染色的涂片中,很难观察到弯曲杆菌。已经证实,在检测方面,荧光抗体染色的标本是有价值的。观察感染材料的湿片,弯曲杆菌呈特征性的“歪斜状”运动。
生殖性疾病(绵羊和山羊):对流产胎儿的胃内容物进行革兰氏染色(石碳酸复红染色),在样品中常可见到该菌。这一发现与有时在肝脏发现的油炸圈饼形坏死相结合,有助于做出诊断。
肠道疾病:大多数病例是由空肠弯曲杆菌引起的腹泻,在革兰氏染色结合石碳酸复红染色的粪涂片中,可以观察到大量柔嫩的弯曲杆菌。
2.3 分离
生殖性疾病(牛):将包皮垢、阴道分泌物或者胃内容物放在含有抗菌剂的培养基中(通常加入万古霉素、多黏霉素B或C、甲氧苄氨嘧啶,以减少非弯曲杆菌的生长;在某些抑制真菌生长的配方中,加入两性霉素B)。平皿放在含6%氧气、5%~10%二氧化碳的环境中,37℃条件下培养,48 h内进行检查。
生殖性疾病(绵羊和山羊):将皱胃内容物(取自流产胎儿)和肝脏组织放在血琼脂板上(依据被污染的程度,决定加入或者不加入抗生素),平皿放在含6%氧气、5%~10%二氧化碳的环境中,37℃条件下培养,在48 h内进行检查。
肠道疾病:最好用含有抗生素的选择培养基,从感染的肠道样本中分离空肠弯曲杆菌和大肠弯曲杆菌(弯曲杆菌-CVA含有头孢哌酮、万古霉素、两性霉素B),平皿放在含6%氧气、5%~10%二氧化碳的环境中,37℃或42℃孵育。
2.4 鉴定
氧化酶阳性、革兰氏阴性的弯曲形杆菌是分离到弯曲杆菌属或弧菌的依据。尽管已有几种发酵反应可用于弯曲杆菌的鉴定,但这些方法冗长而费时。以检测特定DNA序列为基础的方法可被用于鉴定(如通过PCR反应,扩增特定DNA序列,产生一定大小的片段,或者确定编码rRNA的基因序列)。同样,细胞壁脂肪酸的分析也很有效。
2.5 血清学诊断
有时可用血清学方法对牛与弯曲杆菌相关的生殖性疾病进行诊断,当子宫颈、阴道黏液中含有针对弯曲杆菌抗原的抗体时,即可确诊该病。将1个棉球放在子宫颈附近的阴道内,用于采集样本,取出后收集黏液并进行一系列稀释。感染后3~80天内,在子宫颈阴道黏液中出现凝集素(抗体),大约持续7个月。家畜在发情期4~5天后或者发情前的1~2天收集样本,由于在发情期分泌黏液较多,此时采集的样本需过度稀释,血液的存在使检测失效。也可通过ELISA检测抗空肠弯曲杆菌的抗体,据报道可在发情期间进行该试验,并且在感染后18~40天内呈现阳性。
3 防治措施
生殖性疾病(牛):可用链霉素非肠道注射治疗公牛。将青霉素和链霉素溶液滴入公牛的阴茎包皮,进行局部治疗。据报道,免疫公牛可以清除带菌状态。最好通过预防来防止该病发生,健全的饲养管理方式可降低该菌侵入畜群的机会。使用测试结果为阴性的青年公牛与后备母牛配种,剔除来源不清母牛,是消除弯曲杆菌的有效方式。一旦该菌存在于牛种群中,可以让牛群休息一个繁殖季节,并且精选公牛,该法可消除来自母牛的病原,当重新交配时又排除了传染源。人工授精技术是提高牛质量和控制疾病传播的一种有效方法。母牛的治疗不提倡使用抗生素。该病呈地方性流行的地区,常使用菌苗预防该病,每年可进行1次疫苗接种。
生殖性疾病(绵羊和山羊):注射抗生素可以治疗该病,可以防止流产大规模发生,注射青霉素最为有效。应将流产母羊与那些未被感染的羊分离饲养,防止健康羊感染。在羊配种前,注射弯曲杆菌菌苗能够预防该病发生。
肠道疾病:空肠弯曲杆菌引起家畜的肠炎常具有自限性。大环内酯类抗生素(克拉霉素、泰乐菌素)是治疗空肠弯曲杆菌性腹泻的选择药物。当不能使用大环内酯类药物时,尽管有四环素抗性株(R质粒为基础)存在,采用四环素治疗仍是有效的。目前,还没有控制家畜空肠弯曲杆菌性肠炎的免疫制剂。
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