非洲猪瘟的检测技术

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　　非洲猪瘟（ASF）是野猪和家猪的一种高度致死性传染病，死亡率可达100%，主要由非洲猪瘟病毒（ASFV）引起。据临床研究发现，该病可细分为四大类型。急性型潜伏期略短，大约5天以内，在临床上主要表现为高热、表皮发黑，在1周左右发生死亡。猪在感染病毒后以发热、出血性病变为主要特征。有的毒株可引起高发病率和高死亡率。目前尚无有效预防该病的疫苗。现发现ASF的临床症状与经典猪瘟十分相似，对于防控和根除该病，简便、灵敏的诊断技术至关重要。沈阳市首次出现此类病例，随后在多个省份暴发，造成巨大经济损失。ASF的慢性病例与艾滋病的某些症状相似，也曾有研究者将ASF称为猪的获得性免疫缺乏综合征。ASF属于一种复杂的出血性传染病，并且目前并没有研制出预防该病的疫苗。适用于ASF或与其相似临床症状的疾病的诊断与鉴别的方式相对较少，并且对于活病毒的诊断技术手段较为欠缺。随着ASF的肆意蔓延，愈加需要更完善的技术来诊断鉴别病毒，而对于实验室而言，则需要把检测方法进一步的完善，减少漏洞的出现。
　　该病目前还没有发现治愈和防控的疫苗，所以我国研究并建立高效，完善的ASFV检测实验室，通过该实验室的快速成立为ASF的防控和治疗做好了很重要的铺垫。就目前来看，ASF病原学诊断技术包括核酸检测、抗原检测和活病毒检测等一系列。目前，ASFV的检测技术主要有针对病毒DNA的核酸检测技术和病毒抗原、抗体反应的免疫学技术两大类，通过研究世界卫生组织推荐ASFV的检测方法主要有 实时荧光定量PCR检测、PCR检测和ELISA检测等。通过免疫学的知识进行抗体检测，通过检测我们可以了解到ASFV的感染过程以及发生阶段，这样会使我们更好的进行治疗，但是这种方式的检测，抗体只有感染病毒到一定程度才会出现，这样会对治疗造成一定延误，所以ELISA等其他抗体检测的方法存在一定的限制性。PCR、实时荧光定量 PCR、LAMP等分子生物学技术在猪感染ASFV的早期即可检测到病毒核酸，这种方法的研究和普及对早期的检测起到至关重要的作用。总体来说，ASFV的实验室检测方法有很多种，各自有不同的优缺点。
　　核酸检测，PCR检测技术是目前应用最为广泛的检测技术，其具有特异性强、灵敏度高的特性。PCR检测操作方法简单、快捷。但扩增后需要使用溴化乙锭来进行电泳检测，且该方法的敏感性较低。是目前最简单的分子生物学检测技术。同时PCR技术也适用于对保存不当的组织及血液样品进行检测。实时荧光定量PCR方法，将光谱技术引入其中，特异性扩增产物的量是通过荧光信号的强弱变化定量测定，不但解决了敏感性较低的问题，而且减轻了电泳检测中溴化乙锭对环境的污染。实时荧光定量PCR可同时快速检测大批量样品，因其特异性高、敏感性好，是目前应用最广泛的检测技术。酶联免疫吸附試验 （ELISA），目前常用的免疫学诊断技术是ELISA试验，该实验操作过程简单、操作速度快，可用于猪群中ASFV感染的大规模调查，但无法对ASFV的早期感染做出诊断，具有一定的滞后性。
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