蜂胶的亚急性毒性研究

来源:用户上传      作者: 黄佳宁　陈秀锦　陈冠敏　林　澍

　　[摘要] 目的：研究蜂胶的毒性。方法：试验动物按体重随机分低、中、高及溶剂对照四组，给予不同浓度受试物，连续灌胃30天后，进行血常规、血生化机及病理学检查。结果：各指标与对照组比较差异均无统计学意义。结论：蜂胶对机体不存在毒副作用，可放心食用。
　　[关键词] 蜂胶 大鼠 毒理学
　　
　　蜂胶，是蜜蜂从一些植物的芽苞、枝干上采集来的树脂,混入蜜蜂上腭腺的分泌物后和蜂蜡等形成的一种具有芳香味的粘性胶状固型物。蜂胶包含复杂的化学组成，研究证明蜂胶中含有20余类、300多种天然成分，其中包括多种人体必需的微量元素、氨基酸、芳香化合物、黄酮类物质，还有丰富的有机酸、萜烯类物质、维生素、酶、多糖等具有生物活性的成分。具有抗菌消炎、 提高免疫，促进伤口愈合和组织修复、能改善血液循环有保护血管、抗癌等功能，近年来大量研究表明蜂胶对心血管病、糖尿病、肿瘤都有一定疗效，已成为保健食品研究领域的热点，那么长期服用蜂胶制品对人体是否有害呢？本研究通过亚急性毒性试验，系统评价其对人体的毒性作用，为开发利用提供科学依据。
　　
　　1 材料及方法
　　
　　1.1 受试物
　　蜂胶软胶囊内容物，成分：精制蜂胶25%、大豆油71%、蜂蜡1.5%、卵磷脂2.5%。推荐量2粒×1 g/粒。
　　1.2 实验动物
　　试验选用上海斯莱克实验动物有限责任公司提供的清洁级SD大鼠80只，雌雄各半，体重65～77g。许可证号：SCXK（沪）2007-0005。
　　1.3 饲养环境
　　福建省疾病预防控制中心SPF级动物实验室，许可证号：SYXK(闽)2007-0006。
　　1.4 仪器
　　日立7060C全自动生化分析仪、SHANDON EXCELSIOR全自动密封脱水机、BM-VI生物组织冷冻包埋机、SHANDON Finesse325石腊切片机、CS-IV摊片烤片机、电热鼓风干燥箱、OLYMPUS BX-51研究型生物显微镜、美国雅培CELL-DUN3700血球分析仪、全自动染色机、电子天平。
　　1.5 试验方法
　　各性别动物按体重随机分成4组，每组各10只。试验按受试物人日推荐量的25、50和100倍，设3个剂量组为0.83、1.66、3.33 g/kg BW。低、中、高剂量组分别按166、333、666 mg/mL浓度配制，另设大豆油为溶剂对照组，以经口灌胃方式给予，灌胃体积为5.0 mL/kg BW。试验期间动物单笼喂养，自由进食饮水，每天观察动物形态，记录饲料洒漏量，每周记录一次体重和2次食物摄入量。喂养30天后，摘眼球采血作血常规及生化指标测定，取出肝、肾、脾、睾丸称重，并对肝、肾、脾、胃肠、睾丸、卵巢作病理学检查。
　　1.6 观察指标
　　1.6.1动物的一般表现、体重、进食量、食物利用率。
　　1.6.2血常规及生化指标：红细胞计数、白细胞计数、白细胞分类、血红蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素、肌酐、总胆固醇、甘油三酯、血糖、总蛋白、白蛋白。
　　1.6.3病理解剖：脏体比、大体观察及病理组织学检查（肝、脾、肾、胃肠、睾丸和卵巢）。
　　1.7 实验数据统计方法
　　实验数据以SPSS软件进行单因素方差分析。经方差齐性检验，方差齐的实验数据采用LSD法进行统计分析，方差不齐的实验数据采用Tambane法进行统计分析。
　　
　　2 结果
　　
　　2.1 一般形态观察该样品三个剂量组的大鼠毛质白、有光泽，外观形态与对照组比较无区别，也无死亡现象。 2.2 动物体重增长与食物利用率由表1、2、3可见，各剂量组大鼠实验结束时体重及体重增重、进食量、食物利用率与对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。
　　
　　2.3 血常规检查结果
　　由表4、5可见，三个剂量组大鼠的血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数和白细胞分类均在本实验室正常值范围内。
　　
　　
　　2.4 血清生化检验结果由表6、表7可见，3个剂量组大鼠的血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素、肌酐、总胆固醇、甘油三酯、血糖、总蛋白、白蛋白测定值均在本实验室正常值范围内。
　　
　　
　　2.5 大鼠脏体比的影响由表8、9可见,各剂量组大鼠脏体比与对照组比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。
　　
　　2.6 病理组织学检查
　　各剂量组动物大体检查未发现明显病变，且生化指标未见异常，因此仅选对照组及高剂量组作组织病理学检查。高剂量组动物肝、肾、胃肠、脾、睾丸、卵巢组织学检查未发现特异性病变。
　　结果描述：①肝：正常肝小叶结构存在，肝细胞无明显肿胀，仅少数肝细胞胞浆内出现少许细小的脂肪空泡，呈轻度脂肪变，这种脂变肝细胞呈散在小灶分布，范围小。肝细胞无坏死改变。少数肝汇管区见淋巴细胞等炎细胞浸润，无纤维组织增生，胆管未见异常。②肾：肾皮髓质结构清楚，肾小管上皮无肿胀变性，少数大鼠肾间质中有灶性炎细胞浸润，个别大鼠肾小管内见少量透明管型，少数大鼠肾髓质部见小囊肿。③脾：脾白髓、红髓结构清楚，白髓、红髓无明显扩张或萎缩现象。④胃和十二指肠：粘膜完整，无明显出血、坏死、糜烂、溃疡及炎细胞浸润，无明显腺体增生萎缩改变。⑤睾丸：曲细精管正常，可见各级生精细胞及成熟精子。个别间质轻度水肿。⑥卵巢：发育正常，可见各级卵泡和成熟黄体。
　　以上病理学改变仅在个别动物中发生，各组标本病理变化无明显差异，因此认为被检脏器（肝、肾、脾、胃和十二指肠、睾丸或卵巢）未见与受试物有关的病理学改变（各组标本病理变化详见表10～16）。
　　
　　
　　
　　3 小结与讨论
　　试验期间，各组动物生长活动正常。试验结束时，样品各剂量组动物体重、体重增重、进食量、食物利用率、脏体比与对照组比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。样品各剂量组动物血常规、血生化均在本实验室正常值范围内。对受检脏器作组织病理学检查，未见特异性病变。该试验用的样品是蜂胶软胶囊内容物，蜂胶和大豆油含量占96%以上，对照组设为大豆油溶剂对照组，从而消除了大豆油对试验结果的影响，因此该试验即为蜂胶的亚急性毒性研究。以上试验结果证明蜂胶对机体不存在毒副作用，可放心食用。
　　
　　参考文献：
　　[1] 王亚群,任永新.蜂胶的化学成分及其保健作用[J].食品与药品, 2006, 8(12):75-76.
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　　[3] E Mellion,E Stratis,I Chinou,Volatile constituents of propolis from Various regions of Greece-Antimicrobial activity [J].Food Chemistry, 2007, 103(2): 375-380.

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