马铃薯脱毒苗快繁生产管理技术
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作者: 白元成
[关键词]马铃薯 脱毒 快繁技术
一、培养基及其制作对瓶装苗的生长影响
1.培养基材料对试管苗的生长影响。培养基包括大量元素、微量元素、铁盐、食用白糖、自来水、琼脂。试管苗单节切断繁殖宜采用固体培养基,如果工作人员在培养基灭菌过程中,不慎放气不均,一般灭菌后拿出来的培养基过稀(成糊状),影响接苗质量和幼苗生长;相反,如果培养基硬度太大,切断不易插入培养基中,影响苗切断与培养基的接触。
2.培养基制作对试管苗成活率的影响。在快繁苗时,所需的培养基一般应提前2周做,以防使用被污染的培养基,影响试管苗的成活率。另外,培养基的瓶或盒上的水珠影响快繁苗的污染和强壮生长。
二、温度对瓶装脱毒苗生长的影响
夏天昼长夜短,日光灯照射比冬天短,而自然照射光多,可提高组培瓶苗移栽后的成活率;但夏天比冬天室内温度高,污染增高,所以室内需装空调。一般温度应控制在20~25℃范围内。另外,瓶中或盒中的培养基要比平时多放,以防抽干盒或瓶中的培养基,影响幼苗的正常生长。生长间的生长架以用玻璃层为宜。
三、瓶苗污染的控制
在脱毒瓶苗的继代培养过程中,常因种种原因出现细菌类和真菌类污染,细菌污染苗极弱,且扩繁后下一代大部分表现为细菌污染,在生产中通常用抗生素来处理细菌污染。对于真菌污染的脱毒瓶苗,除严格操作规程外,可在培养基中配制不同浓度多菌灵来减轻瓶苗污染率。最主要是快繁留的基础脱毒苗没有细菌和真菌的污染。而对于继代扩繁4年以上的瓶苗,要定期进行病毒检测确认是无病毒苗。因此,要定期更新脱毒瓶苗,每年应通过剥离茎尖组织的办法培养新鲜无病毒瓶苗,以确保继代培养脱毒瓶苗质量。
四、无菌操作室内消毒灭菌
1.操作前消毒。一是无菌室刚开始工作或间隔1~2个月未进行消毒时,先把高锰酸钾倒入培养皿,再倒入甲醛,关闭门窗进行熏蒸消毒,间隔1~2d即可在室内工作;二是将工作服、口罩、拖鞋、盛装75%的酒精瓶、剪刀、镊子、苗源瓶、快繁瓶等无菌室所需物品放在无菌室固定位置,启动超净工作台,通风杀菌,并将室内紫外灯打开消毒,工作人员快速离开无菌室,灭菌25~30min即可。
2.操作中消毒。工作人员进入隔离间,穿戴好消毒服装,在组培室用75%的酒精将双手消毒,再用酒精泡的酒精棉擦超净工作台,同时将镊子、剪刀和支撑干用酒精擦过后,放在加热器进行5~6s的消毒,并将已挑拣好的无污染的脱毒苗放在超净工作台上,先打开灭菌过的快繁瓶放在超净工作台上,然后拧开脱毒苗瓶的口,用已灭菌过的镊子将脱毒苗瓶中的小苗夹出瓶口,只留根部在瓶内,用剪刀剪掉根部,然后再用镊子夹小苗离快繁瓶口1~2cm(注意不要让小苗挨上快繁瓶瓶口,以防感染),剪带1片小叶茎放在快繁瓶中。盖上盖子,在苗瓶外壁用打号枪注明该品种的编号及快繁日期。
除了上述技术外,还包括定期检查、取苗等。
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