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齐齐哈尔地区赤芍及苍术仿野生栽培试验及质量评价

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  摘要:目的:通过建立仿野生环境进行齐齐哈尔地区赤芍及苍术药材的人工生产以指导实践,对栽培赤芍的质量考察,以评价栽培品的质量。方法:通过野外采挖两种药材的根,在室外仿野生条件下进行栽培,采用高效液相法定量测定。结果:赤芍栽培品植株性状与野生品一致,所含芍药苷5%;苍术栽培品植株性状与野生品一致,所含苍术素为0.68%。随栽培年限的增长,含量呈递增趋势。结论:在仿野生条件下获得的赤芍及苍术栽培品所含指标成分含量均高于法定标准仿,本实验结果可说明在齐齐哈尔地区仿野生栽培赤芍及苍术具有可行性。
  关键词:齐齐哈尔地区 赤芍及苍术药材 栽培赤芍及苍术
  引言:赤芍是一种多年生草本植物,分布于俄罗斯、中国等地作为传统常用中药之一。2015年版《中国药典》规定赤芍来源于毛莨科植物芍药(Paeonla lactifloraPall)或川赤芍(Paeonla veitchii Lynch)的干燥根,以内蒙古多伦县出产“多伦赤芍”为道地药材,目前,野生芍药的野生资源在逐渐减少。
  苍术是一种应用十分廣泛的传统中药,北苍术(Atractylodeschinensis(Dc)Koidz)是其来源之一,主要产自内蒙古自治区东北部、山西省以及东北三省,随着市场需求的增多,野生苍术资源逐渐匮乏。仿野生种植是解决市场窘境的有效途径,但是,仿野生品的质量有待于借助实验手段予以评价。
  黑龙江省齐齐哈尔市毗邻内蒙古,气候及环境与内蒙古相近,具备赤芍人工种植及栽培的仿野生环境。本研究在仿野生环境条件下,对赤芍及苍术进行人工生产,研究适用于齐齐哈尔区域的仿野生栽培技术,并通过必要的成分分析进行质量评价,以期农业生产、增产、可持续发展提供技术支撑。
  一、仿野生试验室(田)概括
  室外仿野生环境为齐齐哈尔医学院药用植物园,土壤为沙壤土。
  二、材料与方法
  (一)实验材料
  仪器:Waters E2695高效液相色谱仪、MDF-492超低温冰箱、高速多功能粉碎机、PALL水纯化系统、ML203T/02十万级电子天平。
  试剂和药材:,甲醇(色谱级)、磷酸二氢钾、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、甲酸,均为分析纯。
  实验样品:栽培品经鉴定为赤芍及苍术;分别标记为CS、CZ。
  对照品:芍药苷及苍术素(中国食品药品检定研究院)。
  (二)栽培品的移栽及采收
  赤芍:于4-5月间,畦面顺向开浅沟,沟深5-7cm,将室内出芽的野生赤芍根芽移栽至室外仿野生试验田中,按株距30cm栽种,芽朝上,用少量土固定芽头,再用腐熟饼肥或有机肥料施入沟内,覆土后稍压即可。于移栽后第三年的秋季采收栽培品,晾干后保存在-80°C条件下。
  苍术:于秋季9月移栽至林荫地,剔除残次的幼苗,畦中间高两边低,一端预留出移栽槽,宽约15-20cm,深度根据种苗根长,顶芽向上摆在移栽槽中,株距约15-20cm,覆土约5cm,行距保持35-40cm。
  (三)色谱条件
  赤芍栽培品的检测条件:AgilentZORBAX Eclipse xDB-c18色谱柱(250×9.4mm,5um);以甲醇-0 05mol-L-1磷酸二氢钾溶液(50:50)为流动相,流速1.0mL·min-1,检测波长230nm,进样量:10ul。待检样品的制备:以甲醇为溶剂,制成0.50 mg-ml-1的芍药苷对照液,备用:分别精密称取赤芍栽培品粉末约0.5g,两份,精密加甲醇25ml,浸泡4h后超声音处理,放冷,补齐失重,摇匀,经0.45pm微孔滤膜,取续滤液备用。
  苍术栽培品的检测条件:Diamonsilc18色谱柱(4.6mm×250mm,5u1);流动相甲醇:水=(79:21)等度洗脱:流量1.0ml/mln;检测波长340nm;进样量20um。待检样品的制备:以甲醇为溶剂,制得20mg-ml-1的苍术素对照液;取苍术栽培品,用粉碎机粉碎,过三号筛,精密称取0.2g,置具塞锥形瓶中,精密量取甲醇50ml加入锥形瓶,用封口膜密封后,称定重量,超声处理(功率250w,频率40KHz)lh,取出锥形瓶冷却至室温后,称定重量,用甲醇补足缺失的重量,摇匀后,经0.45um过滤膜后,取续滤液备用。
  (四)数据处理
  选用SPSS 20.0处理实验数据,实验结果均以X±SD表示。
  三、实验结果
  (一)室外栽培品的性状
  三年生的赤芍栽培品植株高度约70cm,叶互生,叶片近革质,有柄,长约6cm,小叶为长圆形、椭圆形,先端渐尖基部楔形,绿色,无毛;花,顶生,大形,花梗长,无毛,生叶状苞片,萼片3-5,倒卵形,绿色;花瓣粉红色,倒卵形,雄蕊多数,花药黄色,根纺锤状或圆柱状肥大,红褐色,折断面粉白色。
  苍术栽培品茎直立,单生或少数茎成簇生,基部叶花期脱落:中下部茎叶几无柄,倒卵形,中部以上或仅上部茎叶不分裂,倒长卵形,全部叶硬纸质,两面绿色,无毛,边缘或裂片边缘有针刺状缘毛或者重刺齿。头状花序单生茎枝顶端,总苞钟状,苞叶针剌状羽状全裂或深裂。小花白色,瘦果,被稠密的顺向贴伏的白色长直毛,冠毛刚毛褐色或污白色。
  (二)指标成分的含量测定
  经过HPLC测定,基线平稳,三年生赤芍栽培品含有芍药苷为6.5%,符合法定药品要求。
  经过HPLC测定,基线平稳,三年生苍术栽培品含有苍术素为0.68%,符合法定药品要求。
  结论:本研究在室外的仿野生环境条件下,栽培赤芍、苍术,通过测定栽培品中的指标成分,符合法定标准,表明齐齐哈尔地区栽培赤芍、苍术具有一定的可行性,期待扩大规模,进一步规范仿野生栽培技术,以指导本区域农民种植,实现保质增产和创收。
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