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西洋参中掺杂人参的鉴别研究

来源:用户上传      作者: 黄河

  [摘要] 西洋参与人参外形相似,所含化学成分相近,因此鉴别较困难。本文采用性状鉴别、理化鉴别、蛋白电泳鉴别以及分子鉴别等多种技术,将西洋参和人参进行了区别。
  [关键词] 西洋参;人参;鉴别;研究
  [中图分类号] R282 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2012)03(c)-0018-02
  
  主产于美国和加拿大的西洋参,为五加科植物西洋参Panax quinquefolium L.的干燥根,其具有补气养精、镇静解热的功效,价格较昂贵[1]。主产于我国东北的人参,为五加科植物人参Panax ginseng C.A.Mey.的干燥根和根茎,其具有大补元气、固脱生津的功效[2],价格较西洋参便宜。西洋参和人参加工后外型相似且西洋参较贵,因此造假者在西洋参中掺入人参。但由于两者药性和药效有很大区别,因此必须采用多种方法对西洋参和人参进行鉴别,从而保证患者的用药安全。
  1 性状鉴别
  西洋参呈纺锤形或圆柱形,根茎和主根稍短,表面浅黄褐色或黄白色。主根外皮光滑,上部横纹密集、纵纹浅细,皮孔样瘢痕较多。断面黄白色略显粉性,外侧有多数黄棕色树脂道,形成明显的“梅花纹”。质地硬实,密度较大(1.18~1.20 g/cm3),气香味甘回甜。人参也呈纺锤形或圆柱形,根茎和主根较长,表面呈灰黄色或黄白。主根外皮粗糙,上部横纹疏浅、纵纹粗深,皮孔样瘢痕较少。断面黄白色,具有“菊花纹”,质地较轻且松泡,密度较小(1.08~1.10 g/cm3),气微香味淡[3]。
  2 显微鉴别
  在显微镜下,西洋参主根的横断切片可见:木栓层细胞5~7层,无明显的木栓形成层,皮层细胞7~12层,形成层细胞3~5层。人参主根的横断切片可见:木栓层细胞4~6层,木栓形成层细胞1~2层,皮层细胞5~6层,形成层细胞1~2层。
  西洋参和人参的粉末中均含有淀粉粒、木栓细胞、草酸钙簇晶、树脂道以及导管等[4]。在显微镜下,西洋参粉末可见:较多的呈4~5度角形的淡黄色木栓细胞,壁厚。较少的多呈梯纹的导管网纹。树脂道较多,少量橘黄色树脂,大量油滴。草酸钙簇晶直径多为10~55 μm。淀粉粒单粒为三角形、椭圆形或类圆形,直径为2~14 μm,复粒由2~8个单粒复合而成。人参粉末可见:较少的呈多角形的淡黄色木栓细胞,壁薄。导管多为网纹。树脂道较少,金黄色粒状或条状树脂,少量油滴。草酸钙簇晶直径多为20~68 μm。淀粉粒单粒为碗形或不规则形状,直径为4~20 μm,复粒由2~6个单粒复合而成[5]。
  3 其他鉴别
  3.1 薄层鉴别
  3.1.1 对照品溶液的制备:取西洋参和人参对照药材粉末各1 g,加甲醇25 mL,超声提取30 min后滤过,取滤液并蒸干,蒸干后的残渣加水20 mL,充分振荡使其溶解,加乙醚振摇提取2次,每次10 mL,取水层后用饱和的正丁醇振摇提取3次,每次15 mL。合并正丁醇提取液,用水洗涤2次,每次10 mL,取正丁醇液蒸干,残渣加甲醇1 mL,充分振荡使其溶解,作为对照品溶液。
  3.1.2 供试品溶液的制备:取西洋参和人参的样品粉末各1 g,按对照品溶液的制备方法操作,即得供试品溶液。
  3.1.3 人参皂苷Rg1、Rb1、Re对照混合溶液的制备:分别取人参皂苷Rg1、Rb1、Re对照品适量,用甲醇制备成每1毫升各含2 mg的混合溶液,即得人参皂苷Rg1、Rb1、Re对照混合溶液。
  3.1.4 人参皂苷F11对照溶液的制备:取人参皂苷F11对照品适量,用甲醇溶解成每1毫升含2 mg的溶液,即得人参皂苷F11对照溶液。
  3.1.5 鉴别方法:分别吸取上述溶液各2 μL,点于同一硅胶G薄层板上,用适当的展开剂(展开剂的不同,会导致斑点的位置有所区别,展开剂的种类有很多,如氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)、氯仿-甲醇-水(65∶35∶10)等展开,人参的人参皂苷Re,Rg之间有一斑点,而西洋参无此斑点,西洋参的人参皂苷Rb1峰值最高为其特征,而人参的特征则是人参皂苷Re峰值最高。
  3.2 荧光鉴别
  取西洋参和人参药材的新折断面,在遮光下用紫外灯(波长为254 nm)观察样品断面,西洋参的断面皮部呈蓝白色荧光,木部呈蓝紫色荧光;而人参的断面皮部呈蓝白色荧光,木部呈天蓝色荧光。
  3.3 蛋白电泳鉴别
  蛋白电泳的原理是[6-7]:各种蛋白质都有其特有的等电点,在高于其等电点pH的缓冲液中,将形成带负电荷的质点,在电场中向正极泳动,在同一条件下,不同蛋白质带电荷有差异,分子量大小也不同,所以泳动速度不同,蛋白质可分成五条区带。
  影响电泳迁移率的因素主要有以下几个[8-9]:(1)电场强度:电场强度越大,带电质点移动速度越快;(2)溶液的pH值:溶液的pH值距离质点等电点越远,质点所带净电荷越多,电泳速度越快;(3)溶液的离子强度:溶液的离子强度越高,质点的泳动速度越慢,但区带分离度却越清晰;(4)电渗:支持物电渗作用越小,质点移动速度越大。
  实验结果表明:西洋参为色深谱带和扩散带各1条,而人参为色深谱带2条,色浅谱带和扩散带各1条。
  3.4 分子鉴别
  1990年,美国的Williams和Welsh两个研究小组提出了PAPD技术(随机扩增的多态性DNA),它是以任意顺序列的寡核苷酸单链为引物,对所研究的基因组DNA进行随机扩增,采用该技术能够获得清晰的多态性DNA指纹图谱,可以清楚地区分易混的中药材[10]。
  现在,国内已有很多学者采用分子鉴别技术来对西洋参和人参进行鉴别。如罗志勇等采用扩增片段长度多态性DNA(AFLP)法,将人参、西洋参干燥根的基因组DNA经EcoRI/Msel酶切,并与相应的人工接头连接后,使用选择性引物进行PCR扩增,经过变性聚丙酰胺凝胶电泳检测,成功地构建出重复性好的西洋参与人参的DNA指纹图谱[11-12]。
  4 小结
  西洋参和人参的外形很相似,所含成分相近,因此很容易产生混淆。西洋参和人参都是名贵的中药材,目前由于西洋参的价格高于国产人参,因此有将人参混入西洋参中冒充西洋参的情况,这就要求我们采用先进的鉴别技术对两者进行区分。在本文中,采用了性状鉴别、显微鉴别、薄层鉴别、荧光鉴别、蛋白电泳鉴别以及分子鉴别技术,对西洋参和人参进行了准确区分。其中性状鉴别、显微鉴别、薄层鉴别以及荧光鉴别技术对于仪器没有什么特殊要求,而且操作简便,易于推广。但是,蛋白电泳鉴别及分子鉴别技术对仪器的要求较高,可能在一般基层医疗机构和药房不易推广,更适合于研究使用。
  [参考文献]
  [1] 蒋皖芳,刘曙. 182批西洋参鉴别检验的分析[J]. 中成药,1995,17(9):1.
  [2] 翁国勋. 西洋参和人参的紫外光谱鉴别[J]. 广东药学,1999,9(2):22. [3] 赵寿经. 人参、西洋参同工酶电泳分析[J]. 特产研究,1996,18(4):21. [4] 朱钜清. 西洋参的真伪鉴别[J]. 中成药,1995,17(5):48.
  [5] 李智. 西洋参中掺杂人参的鉴别[J]. 人参研究,2004,16(1):37.
  [6] 姜顺善. 关于人参品种的比较研究[J]. 人参研究,1992,4(1):16.
  [7] 谢宗万. 全国中草药汇编[M]. 北京:人民卫生出版社,1996:11.
  [8] 阎文玖. 中药材真伪鉴别[M]. 北京:人民卫生出版社,1994:75.
  [9] 张贵君. 现代实用中药鉴别技术[M]. 北京:人民卫生出版社,2000:25.
  [10] 王铁生. 中国人参[M]. 沈阳:辽宁科学技术出版社,2001:98.
  [11] 李向高. 西洋参的研究[M]. 北京:中国科学技术出版社,2001:110-111.
  [12] 田进国. 人参和西洋参的红外光谱鉴别[J]. 中药材,1996,19(2):70.
  (收稿日期:2012-02-13)


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