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浅谈农残快速检测技术及常见问题的解决方法

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  当前,安徽阜阳农业生产过程主要使用氨基甲酸酯、有机磷等农药,部分农药可残留在蔬果外表。此类农产品和生物体内Ache(全称为“乙酰胆碱酯酶”)结合,导致酶活性受到抑制,致使人出现中毒症状。将蔬菜和Ache之间进行萃取反应,可检测出农产品中农药残留情况。但是,应用此检测技术,可能存在干扰因素,影响检测结果准确性,因此,探索出检测技术的问题的处理方式十分重要。
  1、农残快速检测技术应用流程
  (1)准备阶段
  准备阶段,需要结合检测要求,合理选择检测仪器,对仪器进行自检,保证其功能良好。同时检测过程需要利用信息技术,运用检测系统,保证信息获取的真实性。选择智云达ZYD-NP6D检测仪,该仪器光源稳定,有多个通道,带液晶显示屏,能够对蔬果中的氨基甲酸酯类农药快速检测。自检过程先预热10~15min,保证光源的稳定性,同时登陆农残快检系统,设置端口和检测仪相连,并将之前检测的参数值、检测信息等清除。
  (2)制备对照液并测试
  对照液的制备过程,选择缓冲液2.5mL,酶100uL,将二者加入到比色皿当中,待其均匀混合之后,将100uL的显色剂添加其中,并添加底物20uL。将所有物质摇匀之后,放置于比色皿当中展开对照测试,合理的结果区间为0.3~0.8,一旦超出此范围,即代表操作环节存在问题,或者显色的时间较长,此时,需要重复上述准备流程,重新制备,直到结果合格。
  (3)录入信息
  在检验环节,需要将待检验产品的名称以及检测标准等重点信息全面地录入到检测系统当中,保证整个检测过程具备专业信息支持,提高结果的准确性,保证农残快检过程可顺利得到预期效果,为检测过程技术的顺利应用提供信息保障。
  (4)制备检测液
  选择2g待检样品,若为蔬菜,可剪成边长为1cm的方片,若为瓜果可切成1cm正方体,将其置于三角瓶当中,向其中添加10mL的缓冲液,之后振荡2min,过滤出清液作为待测试液。选择100uL酶放入比色皿当中,加入2.5mL待测液,混合均匀之后静置10min,向其中添加100uL显色剂,并加20uL底物。将比色皿盖上,之后上下颠倒2次,将其置于仪器当中测试。
  (5)判定结果
  对于农残快检结果的判定,主要有以下三种情况:第一,当样品抑制率<50%,即可说明,被检测的农产品中存在较少的农药残留量,即样品检测结果“合格”。第二,当样品抑制率≥50%时,此时说明被检测的农产品中含有较高的农药残留量,即样品检测结果“不合格”,需要立即暂停相关农产品的市场交易活动,同时,对产品进行追踪,向上级主管部门进行汇报。第三,当样品抑制率处于40%~50%区间内,此时代表样品“疑似农药残留超标”,需要进行重复检查,进一步确认。复检之后,若抑制率>40%,需要使用色谱仪展开分析,确认之后停止该农产品的市场交易,对其追踪,向主管部门进行汇报。
  2、农残快速检测中常见问题处理方式
  (1)处理“假阳性”问题
  在农残的快速检测过程,可能出现“假阳性”结果,对此主要使用下列三种方式进行处理:
  第一,复核整体检测过程,检测员需要结合检测过程,检查空白对照值的精准性,抑制率为检测值、空白对照值之间的比率,因此,空白对照值是影响检测结果的关键因素。当结果中出现多数样品呈“阳性”时,此时需要核对对照值的真实性,提升检查结果准确度。与此同时,对检查过程的取样流程、方法、有效性等进行核对。当取样过程方法不当时,也会造成上述结果。例如:部分蔬菜韭菜、香葱、香菜等自身对酶活性影响较大,在检测上述农产品时,可先将整株进行浸泡,防止浸泡液流出,导致检测结果出现“假阳性”,为检测结果的判定提供依据,保证整个检测过程完全符合农残快检的操作规范,规避检测中的结果风险。
  第二,重点落实检测环节反应温度的一致性检查,由于农残快检过程温度对酶稳定性、活性等影响程度较高。如果冬季检测,实验室中可能温度条件难以恒定,可在“水浴锅”内完成10min的酶反应;在夏季检测时,由于室温过高可能抑制酶的活性,因此,可选择上午时间将试剂配制好,保证验过程处于恒温环境中进行。在具体实践过程,为提高检测成功率,需要全面检查反应全程温度是否恒定,落实空白对照组设计,保证检测结果的精准性。
  第三,检查酶受到抑制的反应时间,整个检测过程,由于酶抑制时间的不同对检测结果以及结果利用等有重要影响。当酶受抑制时间较长时,其抑制率也会提高。当待检样品中加入底物之后未迅速置于比色池当中,就会将酶的反应时间延长,导致结果中有多个抑制率值呈“假阳性”。对此,为保证检测过程侧科学性,高效实施检测计划,需要保障对照组、检测组等酶抑制的反应时间相一致。
  (2)处理无效数值问题
  检测环节,检测结果中存在负值,主要因为检测过程吸光值比对照检测吸光值高,导致系统出现错误。此時,需要重新进行对照试验,检测环节严格对移液枪的使用作出规范,保证农残检验流程规范,提高结果精度。
  在检测过程,比色池当中产生个别无数值的通道,针对这一问题,主要可对检测仪进行检查,对紫外光灯的工作状态全面检查,确认其是否存在故障。同时,还需对酶、显色剂等添加情况展开全方位检查,为检测环节提供精准的参考信息。对以上无效数值的处理可保证后续检测流程顺利进行,处理上述问题时,相关人员需要重点积累检测经验,不断提高农残快检工作水平。
  总而言之,在农残快检过程,需要依靠完善的检测流程,针对检测环节存在的各类问题,要找出影响因素,采取针对性解决措施,提高检测结果的准确性,保证结果的高效利用。同时,农药种类逐渐多样化,要求检测技术不断发展,将检测流程进一步优化,对此需要相关技术人员深入思考,全面分析检测过程的影响因素,运用先进的技术加以解决,提高检测结果质量和精度。
  (作者单位:236000安徽省阜阳市颍州区农业技术推广中心)
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