刺五加多糖1的研究进展探究
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作者: 孙玉艳 崔玉海 李绍铭 喻江
摘 要：刺五加多糖(Acanthopanax senticosus polysaccharide, ASPS)是中药材刺五加主要药效活性成分之一。近年来，随着人们对植物多糖的不断深入研究，其独特的生物活性已逐步被人们认知，且其在人体健康应用中也具有很大潜力。因此本文对近几年刺五加多糖的提取分离、纯化及生物功能等方面的研究进展做一综述，为临床应用提供参考。
关键词：刺五加多糖；提取分离；纯化；生物功能
中图分类号：TH788+.2 文献标识码：A
多糖又称多聚糖，是由10个以上的单糖通过糖苷键聚合而成的天然高分子化合物。20世纪60年代后，人们对多糖的研究逐渐深入，大量研究证实，大多数多糖不仅具有重要的药物活性，而且有一部分多糖具有营养保健作用。刺五加多糖
（Acanthopanax senticosus polysaccharide，ASPS）是从五加科植物刺五加（acanthopanax senticosus）中提取的生物活性多糖，刺五加多糖由葡萄糖、果糖、阿拉伯糖等构成。近年来，随着刺五加多糖提取分离及纯化技术地不断提高，其生物活性也得到了进一步验证，具有巨大的开发潜力。因此本文对近几年刺五加多糖的提取分离、纯化及生物功能等方面的研究进展做一综述，为临床应用提供帮助。
1 刺五加多糖的提取分离
多糖的提取应根据多糖的来源和提取部位的不同确定所用提取方法。通过各种方法得到的多糖提取液可直接过滤或离心除去不容物，提取液一般需浓缩，而后根据多糖难溶于有机溶剂的特性加入一定体积可与水互溶的有机溶剂（如甲醇、乙醇、丙酮等）使多糖沉淀，该多糖经反复溶解与沉析，干燥后可得粗多糖。之后，通过分离除去粗多糖中混杂着的蛋白质、色素、低聚糖及无机盐等杂质。近年来有报道的刺五加多糖提取分离方法有下述几种。
1.1 浸提法
浸提法是指将样品浸泡在溶剂中，将固体样品中的某些组分浸提出来的一种方法。该方法具有生产周期短，生产成本低，操作简单，得糖率高等优点。程海涛，刘娟等人将刺五加粉末分别用石油醚（30~60℃）、95%乙醇各100ml依次回流6h，4h，过滤，滤渣按正交设计方案进行水提取，提取液与等体积氯仿正丁烷混合液震荡，放置过夜，去除上清液及在界面处的蛋白质，收集下层多糖液浓缩至50ml，加4倍体积的95%酒精，置于4℃冰箱中沉淀24h，离心收集沉淀，真空冷冻干燥后得到刺五加多糖。确定了水提部分的最佳工艺，即加入20倍量水于80℃浸提150min。另外，孙婷也考察了不同干燥方法对刺五加多糖含量的影响，结果表明冷冻干燥法优于喷雾干燥法。
1.2 超声提取
超声提取法是利用超声波增大物质分子运动频率和速度，增加溶剂穿透力，提高药物溶出速度和溶出次数，缩短提取时间的浸提方法。孟繁磊，陈瑞战等人通过以不同产地、不同采集时间的刺五加叶为原料，以苯酚-硫酸法测定刺五加多糖含量为指标，采用正交试验确定刺五加多糖超声提取的最佳工艺为：提取温度70℃、提取时间90min、超声功率500W、提取次数3次。同时也说明了刺五加多糖的含量受到刺五加的产地及采收时间影响。
2 刺五加多糖的纯化
纯化是将多糖混合物分离为单一的多糖组分，纯化方法有有机溶剂分级沉淀法，如刺五加多糖的纯化采用95%乙醇分级沉淀法，季胺盐沉淀法，柱层析法，盐析法及制备性区带电泳法等，随着纯化技术的发展，近年来还出现了膜分离技术。
3 刺五加多糖的生物功能
3.1 免疫调节作用
剌五加多糖是理想的免疫增强剂，它可以促进T细胞、B细胞、NK细胞等细胞因子的产生。袁学千等人环磷酰胺100mg/kg制造出了免疫抑制小鼠模型，实验结果表明单用刺五加多糖可明显增强小鼠脾脏和肠系膜淋巴细胞数目,脾脏白髓总体积和淋巴皮质总体积也有所增加，从而证实了刺五加多糖能使免疫器官细胞数目增加。
3.2 抗肿瘤作用
大量实验表明刺五加多糖具有抗肿瘤作用。刺五加多糖有抑制肿瘤生长，减少瘤、肺组织和血浆中PAI-1活性以及血浆μPA含量等方面对C57/BL小鼠L ew is 肺癌的发病,显示出一定的干预作用，适于用作抗癌辅助药品。ASPS可能通过激活ERK信号转导途径诱导人小细胞肺癌H446细胞发生G2 /M期阻滞。另有研究表明，ASPS 对H446细胞增殖有抑制作用，并能促进其凋亡； ASPS通过上调bax、 p53表达，下调bcl-2表达促进H446细胞凋亡。
3.3 抗氧化损伤作用
目前许多研究者发现氧自由基是引起疾病的新致病因素。随着氧化损伤分子机制研究的深入，神经保护剂的研究已成为新的着眼点。刁波、唐瑛等人采用H2O2诱导海马细胞凋亡模型，观察ASPS的抗氧化损伤作用，探讨其对神经细胞的保护作用，实验结果表明ASPS不仅对皮质神经元缺氧损伤具有保护作用，同时对体外培养的海马神经元氧化损伤同样具有保护作用。该作用机理主要是ASPS能通过降低神经细胞中NF-κB的表达，对神经元起到一定的保护作用。同时也有试验研究表明刺五加多糖对有机自由基DPPH也有清除作用。
3.4 抗疲劳作用
所谓疲劳是指人体活动到一定时候时，组织器官及至整个机体工作能力暂时降低的现象。如果疲劳长期积累而不能消除，就会发展成为过度性疲劳，引起身体某些器官的病变而危害人体健康，也会影响运动成绩的提高。韩新功利用小鼠负重游泳试验，观察小鼠灌胃给药刺五加多糖后运动性疲劳时体内相关指标变化，探讨刺五加多糖抗运动性疲劳可能机制。结果表明，刺五加多糖改善了能量代谢，提高血清肌酐水平，减少体内蛋白质动员分解的作用，同时显著降低机体内自由基的含量，具有显著的抗运动性疲劳的功效。
3.5 其他作用
刺五加多糖还具有抗菌、抗病毒、抗衰老及促进肝脾组织核酸代谢和吞噬功能等作用。
总之，随着对刺五加多糖的生物功能研究的不断深入，刺五加多糖在医药及营养保健方面的应用将会更加广泛，只有对刺五加多糖生物功能作用机理有了充分认识，对刺五加多糖工业化生产工艺流程有更深入的研究，刺五加多糖才能有更深入和广泛的应用，这也是摆在医药工作者面前的一项紧迫而重要的任务。
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通讯作者：崔玉海，男，高级工程师
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