硝基呋喃类药物及其代谢物检测方法的研究进展
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摘要：本文对于硝基呋喃类药物具体的种类和理化性质以及可能带来的危害进行了相关的分析，并且对于胶体金免疫和酶联免疫以及高效液相色谱，还有液相色谱串联质谱等一些当前被使用在对硝基呋喃类药物和其代谢物残留进行检查方式的具体使用情况进行研究，同时针对这一药物检测方式的有效应用给出了个人的一些建议。
关键词：硝基呋喃类药物及代谢物;检测方法;研究进展
1 硝基呋喃类药物简介
硝基呋喃类药物其本身属于呋喃核的5位引入硝基以及2位被引入到其他基团中的一种通过人工合成方式生成的抗菌药。因为这一类类药物其本身都存在C=N双键与5-硝基呋喃环的一种结构，因此四种药物的理化性质是相同的，其都属于一种无臭并且味苦，同时拥有稳定性质的一种黄色结晶粉末。其本身对于光敏感和代谢会产生一定的影响，其在和蛋白质融合在一起的时候会构成一种相对稳定的蛋白结合物。
2 硝基呋喃类药物及其代谢物残留检测方法
2.1 胶体金免疫法（GICA）
胶体金免疫法其属于前处理的方式其进行反应的时间相对较短，并且仅仅需要使用肉眼就能够对其进行定性的一种检测方法。我国的相关研究人员对于饲料中硝基呋喃抗生素胶体金检测试的纸条进行研究，检测出其中呋喃唑酮和呋喃它酮，以及呋喃西林与呋喃妥因进行检测的最低极限分别能够达到5，3，2，2 μg·kg-1，假阳性率能够达到2%，假阴性率则能够达到为0。
2.2 酶联免疫法（ELISA）
酶联免疫吸附试验是一种具有高特异性和高灵敏度的半定量定量方法。它操作简单，检测时间短。它可以实现大量样品的同时检测。因此，它经常被用作药物残留分析的筛选方法。2004年，Cooper等首次制备了AOZ多长抗体，并提出了用于虾组织AOZ检测的ELISA方法。该方法的建立为开发硝基呋喃代谢物的ELISA奠定了基础。徐一平[24]建立了AHD的ELISA方法，检出限为0.085 mg·mL-1，通过测定猪肉样品的回收率确定了该方法的准确性。现在市场上，如德国R-Biopharm，英国RANDOX等公司都有成熟的产品。
2.3高效液相色谱（HPLC）
高效液相色谱法是检测硝基呋喃及其代谢物的常用方法之一。由于呋喃结构的紫外光谱吸收不明显，灵敏度降低，不能满足检测要求。然而，衍生化后，硝基呋喃代谢产物可以产生强烈的紫外吸收，检测限提高到1μg·kg-1。王元等建立了一种用酸测定水产品中四种硝基呋喃代谢物的方法。- 分解样品，2-氯苯甲醛衍生化，用乙酸乙酯萃取，并用SPE柱纯化，5.0-500。μg·L-1浓度范围内线性关系良好，定量限为1.0μg·kg -1，两次加入浓度水平的平均回收率为76%～102%，相对标准偏差小于10%（n = 6）。Chumanee等采用2-萘醛甲醛衍生法，用液相色谱 - 二极管阵列检测器检测虾肉中4种硝基呋喃代谢物，检出限为1μg·kg-1。
3 结论
目前，用于硝基呋喃类抗生素和其代谢物检测方式主要有胶体金免疫法和酶联免疫法以及液相色谱即串联质谱检测法，液相色谱法的优势是自动化和精准度相对较高，可是其因为受到基质效应的干扰经常会产生一些假阳性，并且其检测的仪器相对比较贵操作过程较为繁琐在进行前处理过程较为复杂，因此需要有专业的人员对其进行分析。而液相色谱串联质谱法，其自身的特异性相对较高敏感度和精确度也非常的强，这样的情况使得检测极限相对较低。可是其在使用上的成本比较高，操作流程复杂是其存在的主要缺点。而酶联免疫法和胶体金免疫法基本上拥有快速简便和高特异性的优势，可是却不能够去完成电量检测的需求，并且其经常会产生一些假阳性或者是假阴性的风险。所以针对不同的环节和不同的样品，需要结合实际的情况去选择不同的方式，只有这样才能够使得其测量的结果更加的准确和高效，除此之外还能够降低使用资金。而在对液相色谱或串联质谱检测方式进行使用的过程中建议去运用内标法去完成定量这种方式不仅能够减少基质效应对其产生的干扰同时还能够防止前处置技术过程中目标成分丢失而产生的定量不精准的情况。对于酶联免疫法或胶體金免疫法进行选择的时候，需要尽可能选择一些质量合格，并且其自身稳定性较高的产品，同时使其在对产品进行使用之前完成所需要的验证。
硝基呋喃代谢物需要经过衍生增大分子量，通过这种方式去使其色谱行为得到改善同时还能够令离子化效率检测的精准度与灵敏度得到提升，当前我们国家所制定的检测标准和国外报告的文献里的一些标准都是通过加入了其他物质去保持在恒定温度下进行检测的这样的一种情况所需要的检测时间相对较久，并且其检测效率也无法得到有效保证，尤其是在遇到一些紧急或突发情况的时候，就会使得检测机构对检测结果的上报出现延迟，当前很多文献报道选择的都是新型衍生化剂去进行检测，这样的一种方式能够减少衍生时间，同时还能够满足检测极限，使其回收率得到较大提升，笔者曾经通过把温度提高到60度的方式，持续4小时去对其进行验收，获得的结果和连续进行16个小时的衍生，存在的差异并不是很大，但是如果将这种方式进行大范围的使用，还需要对其进行进一步的验证。
参考文献：
[1]生威，李季，许艇.动物性产品中硝基呋喃类抗生素残留检测方法研究[J].农业环境科学学报，2006（25）：429-434.
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