白地霉液体发酵条件优化研究

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　　摘要：利用单因素试验筛选培养基碳氮源及氮源分别为玉米粉及豆柏粉，正交试验确定最佳培养时间为2天时，最佳液体发酵条件转速200 r/min，温度30℃，装液量为50ml∕250ml，起始pH5.0。
　　关键词：白地霉;液体发酵;生物量;正交实验
　　1 绪论
　　白地霉是一种常见的真菌[1]，菌体细胞含有蛋白质，具有十分重要的经济价值[2-5]。目前对白地霉液体发酵系统研究报道较少，本实验计划通过摇瓶液体培养法，确定白地霉药瓶液体发酵的最佳培养基和最佳培养条件，进一步确定最佳的放大培养工艺，为提高营养成分和有效成分提供理论数据[4-5]。
　　2供试菌种与方法
　　2.1供试菌种
　　白地霉保藏菌种：由长春医学高等专科学校提供。
　　2.2 试验方法
　　2.2.1碳源筛选
　　碳源选择葡萄糖、玉米粉、可溶性淀粉、纖维饲料、麸皮，氮源为蛋白胨，其余成份不变。按10%接种量接入100ml培养基中，转速150r/min， 29℃培养3d，测其生物量。
　　2.2.2氮源筛选
　　氮源选择蛋白胨、豆柏粉、鱼粉、棉子饼粉、尿素，碳源为葡萄糖，其余成份不变。10%接种量接入100ml培养基中，转速150r/min， 29℃培养3d，测其生物量。
　　2.2.3发酵周期试验
　　碳源及氮源分别为为葡萄糖及蛋白胨，配制摇瓶液体培养基，培养温度为29℃，150r/min，接种量10%，装液量100ml，培养1d、2d、3d、4d、5d，并测定其生物量。
　　2.2.4液体发酵条件的优化[7]
　　利用玉米粉和豆柏粉为碳氮源，配制摇瓶液体培养基，设计四因素（温度、转速、装液量、起始pH），分别培养2天。正交试验确定最佳组合。
　　2.2.5生物量测定[8]
　　将发酵液用40目筛过滤、抽滤，用蒸馏水反复冲洗，60℃烘干至恒重，精确称重，计算生物量。
　　生物量（g/L）=菌丝体干重（g）/发酵液体积（ml）×1000
　　3 结果与分析
　　3.1碳源筛选结果
　　3.2 氮源的筛选结果
　　3.3发酵周期试验结果
　　3.4液体发酵条件的正交试验结果
　　4结论
　　本实验通过单因素试验确定白地霉液体发酵的适宜碳源及氮源为玉米粉及豆柏粉，最佳培养时间为2天。通过正交试验确定白地霉最佳液体深层发酵条件为：转速200 r/min，温度30℃，起始pH5.0，装液量50ml∕250ml。
　　参考文献：
　　[1]刘亚男，冯娜，薛憬花，吴平，魏孝义.白地霉的化学成分研究.热带亚热带植物学报，2008，28（5）27-32.
　　[2]郑莉莉，刘天明，王慧，需美鑫，孙丙升.白地霉的应用研究进展.食品研究开发，2008，18（6）16-18.
　　[3]白地霉的培养及其核酸降解液的制备.农业科技通讯，1970.6，41（8）12-15.
　　[4]杨庆尧.食用菌生物学[M].上海科学技术出版社，1981，36（4）：56-58.
　　[5]汪维云，朱金华.食用菌液体发酵技术研究进展及展望[J].中国食用菌，1997，17（2）：11-15.
　　[6]王莘.发酵工艺原理试验技术[M].吉林科学技术出版社，2005，28（8）：46-47.
　　[7]周剑丽，胡建锋，陈秀勇，牛晓娟，邱树毅.响应面法优化白地霉发酵麻疯树饼粕产蛋白质饲料工艺条件.中国饲料，2009，52：169-175.
　　[8]周键，孙培龙，赵培城.食用菌深层发酵的研究进展[J ].微生物学通报，2003，30 （6）：111-114.
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