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克氏原螯虾对6种蛋白饲料的常规营养成分和氨基酸的表观消化率

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   摘要:对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)的进口鱼粉、肉粉、虾粉、菜粕、豆粕和花生粕6种饲料原料相关蛋白、脂肪和氨基酸的表观消化率进行检测。试验饲料由70%基础饲料和30%待测饲料原料组成,添加0.5%三氧化二铬(Cr2O3)为外源指示剂。选取了平均体质量(23.5±3.84) g的克氏原螯虾成虾420尾,随机分7组(含基础饲料组),每组3个重复,每重复20尾,投喂试验饲料养殖8周,采用虹吸法收集粪便进行表观消化率测定。结果表明,饲料总消化率进口鱼粉最高(87.16%),虾粉最低(65.80%);粗蛋白表观消化率菜粕最高(91.58%),虾粉最低(49.03%);粗脂肪表观消化率肉粉最高(97.54%),豆粕最低(75.76%)。6种饲料原料中进口鱼粉、菜粕及肉粉组17种氨基酸表观消化率均超过80%,其中菜粕组略高于进口鱼粉和肉粉组。研究结果显示,进口鱼粉、肉粉是克氏原螯虾饲料的优质蛋白源,菜粕则是较好的植物性蛋白源。
   关键词:克氏原螯虾;三氧化二铬;蛋白质;氨基酸;表观消化率;营养成分;饲料
   中图分类号: S963.3 文献标志码: A
   文章编号:1002-1302(2020)07-0189-04
   我国拥有世界上最大的水产养殖规模,水产品在人们生活中扮演着不可或缺的重要角色。蛋白质是动物所必需的营养物质,在动物生长发育中起着至关重要的作用。蛋白质的缺乏会降低水产动物生长速度和存活率,降低免疫力,但如果蛋白质含量过高则会引起一些营养过剩性疾病并造成养殖水体氨氮超标,因此研究最适蛋白需求量对克氏原螯虾饲料生产有着至关重要的作用。饲料中主要蛋白来源是鱼粉,但是由于近几年的环境污染和过度捕捞,导致鱼粉产量下降以及价格上涨,面对日益提高的养殖成本,研究动植物蛋白源替代鱼粉成为当前水产动物营养研究的热门方向[1]。
  克氏原螯虾喜栖息于水草、树枝、石隙等隐蔽物中,由于其适应力强,可生活在环境恶劣、水质较差的水沟、淤泥等地。克氏原螯虾具有同类相食的习性,在食物不足或密度过大的情况下会发生相互残食现象,克氏原螯虾食性较杂,对植物性和动物性饵料均会摄食[2]。目前,国内外关于克氏原螯虾饲料蛋白替代的研究还较少,但是近年来克氏原螯虾产业发展迅猛,因此迫切需要研制、开发出克氏原螯虾的专用饲料,以适应该产业的发展需求。Paul等在澳洲小龙虾幼虾(Cherax destructor)不同蛋白源(肉粉、大豆、浮游植物、蜗牛、鱼粉)的研究中发现,不同蛋白源对澳洲小龙虾的生长率,增质量率无显著影响,但甲壳色有显著差异,以浮游动物为主要蛋白源的饲料组甲壳色更深[3]。Wan等以豆粕、添加植酸酶豆粕、膨化豆粕、发酵豆粕为不同蛋白源,研究对克氏原螯虾幼虾(5.56±0.05) g生长性能、氮磷排放的影响,结果显示,添加了植酸酶的豆粕能提高克氏原螯虾的增重率和特定生长率并且降低氮磷的排放[4]。Tan等在豆粕和菜籽粕对克氏原螯虾幼虾的研究中发现,饲料中替代338 g/kg 植物蛋白可提高克氏原螯虾幼虾生长性能并补充氨基酸[5]。本试验选取进口鱼粉、肉粉、虾粉、菜粕、豆粕和花生粕6种常规蛋白原料,测定克氏原螯虾氨基酸和营养成分的表观消化率,通过比较不同饲料原料克氏原螯虾的表观消化率,筛选克氏原螯虾优质蛋白源,为克氏原螯虾配合饲料的开发提供试验依据。
  1 材料与方法
  1.1 试验动物及养殖条件
  试验用克氏原螯虾[成虾,平均体质量(23.5±3.84) g],购自盐城市盐都某克氏原螯虾养殖场,选择个体健康、无伤残、大小规格一致的个体。
  随机将420尾试验用虾分为7组,每组设3个重复,每个重复设20尾,分别放在21个水族箱中,水族箱长1.0 m,宽0.5 m,水深0.1 m。每个水族箱放置瓦片和PPR水管给克氏原螯虾躲避。每天保持不间断增氧,溶解氧>5.0 mg/L,水的pH值范围为7~8。每3 d换水1次,使用水为经过曝气的自来水。
  1.2 试验饲料
   基础饲料由进口鱼粉、豆粕、菜粕、虾粉、肉粉、花生粕、血粉、干酒糟、面粉、米糠、玉米、鱼油、豆油、磷酸二氢钙、预混料、黏合剂、食盐、乌贼膏组成。
  原料经粉碎机粉碎,过80目筛,试验饲料由70%基础饲料和30%待测饲料原料(进口鱼粉、肉粉、虾粉、豆粕、菜粕、花生粕)组成,并以0.5%三氧化二铬(Cr2O3)为外源指示剂。试验饲料配方见表1。
  1.3 饲养管理与粪便收集
  每日08:00和17:00投喂2次,按照克氏原螯虾体质量的3%~5%进行喂食。投喂后等待1 h用捞网回收饲料残饵,再等待3 h后用虹吸法将粪便收集到之前备好的培养皿内,在烘箱中于65 ℃烘干后放入自封袋,在试验室冰柜中-15 ℃冷冻保存,连续收集约30 d,直到收集到足量的粪样以供生化分析。
  1.4 测定指标及方法
  饲料原料、饲料和克氏原螯虾粪便样品按照AOAC方法[6]分析样品中水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分含量;饲料和粪便中Cr2O3含量采用Furukawa & Tsukahara的方法[7]测定;采用Biochrom20型氨基酸自动分析仪[8]测定16种氨基酸(除色氨酸、脯氨酸外),结果见表2。
  基础饲料和试验饲料氨基酸的表观消化率计算公式[9]:饲料某种营养成分的表观消化率=[1-(饲料中Cr2O3百分含量×粪便中该营养成分百分含量)/(糞便中Cr2O3百分含量×饲料中该营养成分百分含量)×100%。
   饲料原料营养成分的表观消化率=(试验饲料某营养成分的表观消化率-0.7×基础饲料某营养成分的表观消化率)/30×100%。
  1.5 数据分析与处理   所得试验数据均以“平均值±标准误”表示,采用SPSS 19.0分析软件经单因素方差分析后,若存在显著差异,则采用Duncans法进行多重比较。P<0.05 表示差异显著。
  2 结果
  2.1 克氏原螯虾对6种蛋白饲料的常规营养成分的表观消化率
  由表3可知,克氏原螯虾对6种蛋白饲料原料的表观消化率差异较大,饲料原料总消化率中进口鱼粉组(87.61%)最高,虾粉组(65.80%)显著低于其他组(P<0.05),其他组间差异不明显(P>0.05);粗蛋白表观消化率中,菜粕组的表观消化率(91.58%)最高,豆粕组(49.30%)和虾粉组(49.01%)顯著低于其他组(P<0.05),其他各组间差异不明显(P>0.05);粗脂肪表观消化率豆粕组[CM(22](75.76%)显著低于其他组(P<0.05),肉粉组(97.54%)最高。
  2.2 克氏原螯虾对6种蛋白质原料中氨基酸的表观消化率
  由表4可知,对于克氏原螯虾成虾,进口鱼粉、菜粕及肉粉组17种氨基酸表观消化率均超过80%,6种饲料原料中虾粉组17种氨基酸表观消化率均为最低,除甘氨酸表观消化率外,菜粕组氨基酸表观消化率均为最高。
  3 讨论
  3.1 粪便收集及表观消化率计算方法的选择
  目前,水产动物营养研究已有很多收集粪便的方法,如挤压法、解剖法、肛吸法、虹吸法、连续过滤法、倾析法、网捞法和积粪器法等[10],但是这些方法均各有优缺点。董小林等研究表明,不同粪便收集方法、收集时间都对表观消化率有影响,研究指出,在挑选新鲜粪便情况下、在排便高峰期用虹吸法是一种有效的方法[11]。本试验选择指示剂法节省了时间和劳动力,在不能全部收集粪便的情况下,指示剂法更具优势[12],并采用三氧化二铬来作为外源指示剂测定表观消化率。在畜禽营养研究中表明,三氧化二铬作为外源指示剂具有不易被动物吸收、对动物本身影响小的优点,在近几年动物营养研究中被广泛使用[13]。本试验使用“70%基础饲料+30%试验饲料原料”的方法,以确保克氏原螯虾正常生长所需要的各种营养物质[14]。这样使用饲料配比,既保证饲料营养成分组成的平衡以满足试验克氏原螯虾的健康正常生长所需,也保证了消化率测定的科学性、准确性。
  3.2 克氏原螯虾对6种蛋白饲料常规营养成分的表观消化率
  常规营养成分表观消化率从侧面体现了生物对饲料中营养物质的利用率。本试验中菜粕组的蛋白、脂肪消化率超过90%,其中进口鱼粉组的各个营养成分的消化率均超过80%,这与刘修英等研究的苏氏圆腹芒对常用蛋白饲料表观消化率的结果[15]一致,可能是饲喂纤维素含量较高的植物性蛋白饲料会导致克氏原螯虾消化酶活性降低和食糜通过消化道时间减少,使得其表观消化率降低。克氏原螯虾对进口鱼粉总的消化率最高,可能是进口蛋白质含量高、品质好,氨基酸组成齐全且平衡,钙磷含量高且比例适宜,克氏原螯虾以摄食动物性蛋白为主使得进口鱼粉饲料消化率高于一些植物性蛋白饲料,这与之前一些研究结果一致,如Zhou等研究团头鲂(Megalobrama amblycephala)对动物性蛋白源和非动物性蛋白源的表观消化率影响,发现团头鲂对非动物性蛋白源的表观消化率显著高于动物性蛋白源,进一步说明水产动物的食性与饲料中蛋白质的消化率密切相关[16]。虾粉消化率最低的原因可能是虾粉中含有几丁质,其化学组成类似于纤维素,很难被克氏原螯虾消化吸收。此外,虾粉脂肪含量高,长时间贮存易氧化酸败,而饲料加工方式也是导致虾粉消化率过低的一个因素[17]。
  3.3 克氏原螯虾对6种蛋白饲料氨基酸的表观消化率
  原料蛋白质的质量是影响鱼类营养的首要因素,而水产动物对其蛋白质和氨基酸的消化率是判断原料能否利用的重要指标[18]。试验结果显示,菜粕组中赖氨酸水平低于其他组(花生粕组除外)导致其对氨基酸表观消化率高,该结果与张微微等研究饲料中赖氨酸水平对克氏原螯虾的消化酶活性影响的结论[19]相似,即过量的赖氨酸水平会导致氨基酸比例失衡,阻碍克氏原螯虾对其他氨基酸的消化吸收,同时还抑制克氏原螯虾肠道消化酶活性,从而使克氏原螯虾对饲料原料氨基酸的表观消化率降低。虾粉组氨基酸表观消化率最低,除虾粉中所含几丁质抑制克氏原螯虾的消化吸收外,可能是试验饲料虾粉中的氨基酸比例不平衡和饲料加工方式不当,这与钱国英等研究中华绒螯蟹对常用饲料原料氨基酸消化率的结果[20]一致。因此,在配制克氏原螯虾饲料时应充分考虑在不同饲料和原料配合中,不同原料同种氨基酸的消化率差异,须保证氨基酸比例平衡,在满足克氏原螯虾氨基酸需求条件下,提高其对饲料氨基酸的消化率。
  4 结论
  进口鱼粉、肉粉作为较为出色的克氏原螯虾饲料蛋白源更具优势,菜粕则是较好的植物性饲料蛋白源。
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