探讨猪病诊断和防治中PCR技术的应用
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摘 要：文中全面阐述PCR技术在猪病诊断与防治中的应用，结合PCR技术特点，分析该技术在猪病诊断与防治过程中的应用，提升猪养殖水平，促进养殖经济效益的提升。
关键词：猪病诊断;PCR技术;防治技术
在我国养殖业中，个体散养户是一种独立养殖方式，由于相关技术的成熟，产业规模不断扩大。但养猪疾病的出现在很大程度上降低了养殖户的经济效益，制约着养殖业的可持续发展。由于部分散养户对养猪疾病的认识不到位，导致难以对养殖工作形成有效的防控。同时，我国猪养殖数量与规模持续增大，但受到饲养水平等因素限制，使得猪场养殖中猪病发生概率增加，猪病大多由典型性与多种病毒混合感染引起，临床特征典型性不明显，造成诊断难度增加。猪病诊断和防治过程中运用PCR技术可以快速准确明确病因，本文就此展开论述。
一、猪病诊断和防治现状分析
1.不重视疾病预防工作。当前，对于我国猪群的散养而言，最大的问题就是缺乏科学理论支撑。在养殖过程中只能依赖传统的经验，难以形成完整的养殖体系。大部分养殖人员对于疾病预防不够重视，不会及时给猪群注射免疫疫苗。养殖户养猪过程中过分依赖经验，加上缺乏科学指导，因此难以形成科学认识。通常情况下，养殖户只能对常见的猪痢疾、猪瘟有些许认识，对其他疾病的认识严重不足，一旦在养殖户的猪群中爆发传染性疾病，养殖户难以做到迅速反应，最终导致出现严重损失。
2.疾病治疗有效性不足。养殖户的养殖观念落后，理论知识的限制，导致猪群疫病爆发后难以得到及时、有效的治疗，严重时在猪群中暴发疾病，迅速蔓延，甚至导致全军覆没。这种理论知识体系的缺乏在很大程度也限制了我国养殖户规模的持续增加。但正是由于散养的小规模，因此养殖人员的成本较低、经济损失在一定范围以内。最严重的问题在于，农村养殖过程中通常会将家禽和家畜一同养殖，一旦在猪群中爆发传染性疾病，家畜也容易患病，最终出现严重危机。正是在这种背景下，疫病得不到有效治疗，危害严重。
3.无法排除危险的因素。由于养殖户在理论方面的缺陷，养殖户难以对猪病形成深刻认识，难以发现出现疾病的根源。只能在疾病暴发后，才能汲取一定的经验，但这种经验没有建立在对疾病的全面认识上，因此积累的经验不够全面，也不够客观、不够科学。因此猪群疾病的隐患依然严重，养殖户危险因素难以消除，之前的遗留问题依然不能解决。
二、猪病诊断和防治中PCR技术的应用
1.PCR技术分析。近些年猪病发生率增加，病症表现的愈发严重，直接影响到猪养殖产业的发展。猪病诊断与防治过程中关键在于快速明确病因，依据病原菌种类采取有效的措施进行应对，引入PCR技术可以满足这些需求。
猪病诊断与防治时PCR技术优势有三：操作简单、扩增效果显著、特异性较高。PCR技术下目的基因可以短时间内快速扩增，将微量基因快速检测出来。PCR技术下靶序列两头引物-寡核苷酸会对特异性产生影响。PCR技术迅速发展，延伸出不同种类的技术，如常见的PCR多重技术、PCR荧光定量技术、RT-PCR技术，猪疫病方面这些技术发挥着重要作用。
2.PCR技术应用
（1）猪圆环病毒检测应用。实验人员设计扩增引物时依据基因储存库中猪圆环病毒的基因序列ORF2进行，模板基因选择该病毒的临床分离基因，接着适当筛选反应条件，保证设计出可以检测猪圆环病毒2型的PCR方法。实践结果表明，通过这一方法对病毒进行扩增基因处理后，可以得到559bp长的目的基因片段，同等条件对比类似检测基因，这些结果均呈现阴性，说明这种检测方法特异性显著。
（2）猪瘟病毒的检测应用。猪瘟病毒具有一定的潜伏期，在此期间诊断困难大大加大。其潜伏期大概在4-10天左右，由于环境因素的变化以及猪的体质问题，也有可能出现或长或短的情况。通过猪瘟的临床症状表现，可以将病情分为最急性发病、急性发病、亚急性发病以及慢性发病等几个层次。如：急性发病的染病猪同样也会在提问上出现明显的变化，同时呈现出高烧不退的情况。在发病初期，猪还会表现出食欲减退、精神萎靡、无法站立的情况。对于病猪的眼部会出现结膜炎的症状，充血严重，同时伴随有粘液性的分泌物。另外還会出现严重的出血性肠炎表现为腹泻和血便症状。随着PCR技术的应用，人们根据设计引物的不同，建立了RT-PCR技术来对猪瘟进行检测，结果表明，其能够对猪瘟病毒的核酸序列进行扩增，而且这一扩增具有明显的特异性，同时检测结果的可靠性也非常高，因此能够对猪瘟进行快速诊断和防治。
（3）呼吸与繁殖综合征应用。这类猪病主要发生在母猪身上，通过母乳喂养等传递给仔猪。这种病症直接影响到母猪繁殖，还会降低到仔猪存活率，通过快速诊断技术检测这一病症。实验人员利用聚合酶链式反应检测相关病症，通过研究与实验构建完善的检测方法PCR。这种检测技术应用时要注意相关内容：如果是从陈旧样品中提取RNA的话，容易出现降解反应情况。电泳实验过程中新鲜样品中存在的明显RNA有三条，且三条RNA外形相对完整。提取完成RNA后，利用反转录经过7d，降解反应就会出现。
（4）混合病毒的检测。在对猪病进行检测和防治的过程中，经常会遇到两种或者两种以上病毒混合感染的情况，而且长期以来大量的兽医都只是利用以往的经验来进行诊断和治疗，因此极易错过最佳的治疗时机。而应用PCR技术进行猪病的诊断和防治就变得非常有价值。
三、猪病诊断和防治中PCR技术应用质量控制措施
1.做好宣传工作。猪疾病防治工作直接关系到民众生命安全与公共卫生安全，要求各级领导部门提高对其重视度，提高领导并构建完善的监督检查机制，做好防疫工作规划，提高方案的合理性，依据各地具体情况配合畜牧兽医部门开展工作。同时，政府要提高对防疫工作的重视度，适当增加资金额度与支持力度。通过媒体宣传等方式宣传猪检疫工作，提高检疫人员对防疫工作的重视度，宣传理念的同时树立猪检疫工作的权威性，提高法律意识。
2.提升兽医专业素养。对于猪疾病的诊断和治疗应该在原有的基础上，重视诊断实验技术的应用。对于有条件的兽医基站或者猪场需要建立科学的实验室，对猪的疾病进行迅速的检测，从而提高诊断的准确性，为后续的对症治疗打下基础。在饲养过程中，应该进行科学管理，必要时对于有条件的农场应该聘请技术指导顾问。同时科学选择消毒药剂，并结合当地的流行病症进行免疫处理，在用药上需要结合自身的情况，不能盲目用药。在使用兽药时，应该充分结合药物的特征、作用机理、适应病症与猪的发病情况进行对比，准确用药。同时在开药过程中需要标明药物的用途、剂量、方法以及疗程，并控制好用药的时间和次数，通过足够的疗程处理，保证治疗效果。
3.提高专业养殖水平。散养人员应该加强学习，不断提升养殖水平。定期参加相关的学习培训工作，而且积极学习养殖专业知识，并重视对养殖环境的改善。做好猪群的防疫工作，并严格落实，从源头上提高防治效果。对免疫间隔时间和防治治疗应该科学掌握，及时安排科学合理的免疫流程，不断提升养殖户养殖猪群的抗风险能力。因此，在选择散养场地的过程中，应该尽量选择通风、干燥、排水良好的位置，同时对于场地应该进行彻底的打扫处理，并对容易伤害猪群的物品及时进行处理，从而有效排除污物，有效控制传染源。对于猪群中出现的疾病，需要根据疾病的类型和程度选择用药，同时还应该对整个治疗过程充满耐心，用药过程中需要及时关注猪群的变化情况，及时对用药情况进行调整，确保治疗效果。如果在治疗过程中出现死亡现象，应该继续观察，不能因为个别猪的死亡迅速否决用药的准确性。
四、结语
总之，猪病诊断与防治过程中合理利用PCR技术，可以提高猪病诊断质量与效率。希望通过本文论述，为类似研究提供借鉴，推动我国猪病诊断水平提升，提高猪场养殖质量。
参考文献：
[1]PCR技术在猪病诊断和防治中的应用，王金平;张会超，现代畜牧科技 2018-06-08.
[2]猪病诊断和防治过程中PCR技术的应用，杨显荣 当代畜禽养殖业2016-11-05.
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