地奥心血康增强大鼠缺血再灌注损伤后心肌抗氧化能力

来源:用户上传      作者: 娄建石

　　材料与方法
　　
　　药物 地奥心血康原料药,纯度为93%,棕色粉状,易溶于水,由国家天然药物工程技术研究中心提供。
　　动物 健康Wistar大鼠,雄性,体重250～300 g,由中国医学科学院放射医学研究所实验动物中心提供。
　　试剂 2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TIC),Sigma公司;肌酸激酶(CK)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)测试盒均购自南京建成生物工程研究所;Trizol购自 Invitrogen;RT-PCR试剂盒、Marker,Mn-SOD及内参β-actin引物均购自宝生物工程(大连)有限公司。
　　仪器 BL-420E生物机能实验系统、HX-200型动物人工呼吸机;HZS-H型超级恒温水浴振荡器;VIS-7220可见分光光度计;UNIVERSAL-16R高速冷冻离心机;RT-PCR仪;DYY-12C型电泳仪;UNIVERSALHOODⅡ凝胶成像系统。
　　方法 将大鼠随机分为4组:I/R组,心肌缺血预适应(CIP)组,地奥心血康高剂量组(DH),地奥心血康低剂量组(DL)。缺血/再灌注(I/R)及CIP组给予10 ml/(kg・日)生理盐水,DH和DL组分别给予279 mg/(kg・日)、139.5 mg/(kg・日)地奥心血康,连续7天,末次灌胃24小时后实施手术。
　　
　　结果
　　
　　血压和心率 缺血后,4组的平均动脉压和心率均呈降低趋势,再灌注后有所回升,但均低于缺血前水平,各组间差异无显著性。
　　心电图ST段 缺血期4组的ST段均呈进行性抬高,至缺血30分钟达峰值,但CIP,DH及DL组ST段抬高幅度均低于I/R组(P<0.01),组间差异无显著性。再灌注后各组ST段均逐步恢复至缺血前水平,各实验组之间的ST段高度差异无显著性。
　　心肌梗死面积 各组之间缺血范围差异无显著性,与I/R组相比,CIP、DH及DL 组梗死范围明显减少(P<0.01),梗死区/不着色的危险区(IS/AAR)比值明显降低(P<0.01),三组之间差异无显著性。
　　心肌氧化、抗氧化物质检测与I/R组相比,CIP、DH及DL组再灌注末血浆CK活力明显降低(P<0.05),NO含量明显升高(P<0.01);心肌组织中抗氧化酶SOD活性明显升高(P<0.01),脂质过氧化产物MDA含量则明显减少(P<0.01),见表1。
　　
　　心肌组织Mn-SOD表达I/R组在缺血区内Mn-SOD的基因表达明显下调,与I/R组相比,CIP、DH、DL组则下调幅度变小(P<0.01)。
　　
　　讨论
　　
　　地奥心血康胶囊主要成分甾体皂苷广泛存在于薯蓣科、百合科和豆科等植物中,其中在薯蓣科植物中的含量丰富。它对于冠心病、动脉粥样硬化、高血脂等心血管疾病有很好的治疗作用。本研究采用I/R模型观察地奥心血康对心肌的保护作用,从氧化抗氧化角度探讨其机制。心律失常是心肌I/R损伤的重要特征,而心肌梗死范围被认为是判断心肌I/R损伤严重程度的“金标准”。本研究以早期CIP作为阳性对照,结果表明地奥心血康可降低缺血期心律失常发生,缩小心肌梗死范围,具有与CIP程度相当的心脏保护作用。
　　本实验结果表明:①地奥心血康能显著降低CK活性,减少MDA含量,升高SOD活性,特别使心肌细胞线粒体内Mn-SOD表达增强,从而具有抗氧自由基,保护缺血引起的心肌组织损伤作用。②心脏缺血预适应组和地奥心血康高、低剂量组线粒体Mn-SOD活性及表达都较I/R组增强,说明心肌缺血后引起的自由基水平升高,由于氧化应激线粒体抗氧化酶活性增加,表达增强,从而起到保护作用。③地奥心血康能显著升高NO水平,提示本品可改善心肌缺血时血管内皮细胞的功能。

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