男性尖锐湿疣患者皮损HPV基因型别的分析

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　　【摘要】目的：探讨丽水地区男性尖锐湿疣（CA）患者皮损人乳头瘤病毒（HPV）基因分型情况。方法：采用 HybriMax 医用核酸分子快速杂交系统对丽水地区110 例男性CA患者的疣体组织样本进行HPV基因分型检测。结果：110 例患者中107 例HPV检测阳性，HPV感染率97.27%，单一型感染76例，多重感染31 例，感染高峰年龄段集中在21～40岁。检测出HPV基因型14 种，常见高危型为HPV16、53、52、33、CP8304、58、51、51、68、59；常见低危型为HPV11、6。结论：丽水地区男性CA患者HPV感染以低危型为主，高危型及多重感染率高。
　　【关键词】尖锐湿疣；男性；乳头瘤病毒；基因型
　　【Abstract】Objectives： To explore the genotypes of human papilloma virus （HPV） of the male condyloma acuminate （CA） patients in Lishui area. Methods： Through HybriMax， HPV genotype test was used to detect the genotype of 110 male CA patients in Lishui area. Results： The positive rate of HPV infection was 97.27%T （107）. Among the 110 patients， there were 76 simple infection patients and 31 multiple infection patients. The peak age of infection was from 21 to 40. Totally， 14 kinds of HPV genotypes were detected. The common high-risk genotypes were HPV16， 53， 52， 33， CP8304， 58， 51， 68 and 59. The common low-risk genotypes were HPV11 and 6. Conclusion： The low-risk genotype HPV infection is very common in Lishui area， with high rates of high-risk and multiple infections.
　　【Key words】Condylomata Acuminata； Male； Papillomavirus； Genotype
　　【中图分类号】R752.5+3【文献标志码】A
　　尖锐湿疣（condyloma acuminate，CA）是皮肤性病门诊常见的疾病，由人乳头瘤病毒（human papilloma virus，HPV）感染引起，其传染性强、复发率高，发病率已跃居我国性传播疾病的第二位[1]。由HPV感染导致的死亡率最高的疾病是宫颈癌，然而男性 HPV 感染亦是一个严重的问题，它除了引起男性外生殖器和肛周疣的发生外，还可引起肛门癌、阴茎癌以及口腔癌。肛门HPV感染及肛门上皮内瘤变在男-男同性恋者中非常常见，并会增加感染HIV的可能[2，3]。现已发现HPV临床亚型200 余种，且不同地区的尖锐湿疣患者感染HPV亚型也不同[4]。因此，为了解本地区男性尖锐湿疣患者皮损HPV感染亚型及分布情况，我们运用PCR-反向斑点杂交技术对110例男性尖锐湿疣患者进行 HPV 感染的分型检测，为临床防治和流行病学调查提供参考。
　　1对象与方法
　　1.1对象
　　本研究经医院伦理委员会批准并与患者签署知情同意书。参照中国疾病预防控制中心制定的《性传播疾病临床诊疗指南》中尖锐湿疣诊断标准，选取2012年12月至2013年11月至丽水市人民医院及丽水市中心医院皮肤性病门诊就诊且确诊尖锐湿疣的丽水地区男性患者110例，年龄16～65 岁，未接受物理和药物治疗。
　　1.2标本采集
　　采用活检钳采集尖锐湿疣疣体组织约0.3 cm×0.3 cm×0.3 cm，至10%中性福尔马林液中保存，并标识。
　　1.3主要仪器与试剂
　　DK-8D型37℃电热恒温水槽，CH90-2 台式低速离心机，DK-8D 型 100℃电热恒温水槽，PTC-200PCR 扩增仪，水浴摇床，中山大学达安基因股份有限公司生产的人乳头瘤病毒基因分型检测试剂盒 。
　　1.4HPV检测方法
　　HPV DNA 基因分型检测，采用中山大学达安基因股份有限公司生产的人乳头瘤病毒基因分型检测试剂盒。本试剂盒采用 DNA 反向斑点杂交技术， 结合专业数码凝胶成像与分析系统，通过 P 值（积分光密度差值） 判断中国人群中广泛分布的 19 种 HPV 基因型别，包括高危型HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68及CP8304（中国人特有的高危亚型），和低危亚型HPV6、11、43型3种。
　　2结果
　　2.1HPV DNA 的基因型检测结果
　　本研究病例110例，标本采集部位为外生殖器和肛周，其中外生殖器81 例，肛周29例；HPV检测阳性107例，感染率为97.27%（107/110）。所有检测的19 种基因型中，检测出14 种，未发现高危亚型中的18、31、35、39、56型。见表1。
　　2.2HPV多重感染情况
　　110例阳性样本中单一型感染76 例，单一感染率为69.09%，多重感染31例，多重感染率为28.18%。见表2。 　　2.3尖锐湿疣患者HPV感染年龄分布情况
　　HPV阳性患者以21～40岁年龄段所占比例最高。其中20岁以下患者7例（6.36%），21～40岁患者65例（59.09%），41岁以上患者38例（34.54%）。见表3。
　　3讨论
　　中山大学达安基因股份有限公司生产的人乳头瘤病毒基因分型检测试剂盒采用反向斑点杂交技术，结合专业数码凝胶成像与分析系统， 通过 P 值（积分光密度差值） 判断中国人群中广泛分布的19 种 HPV基因型别，具有灵敏、特异等特点[5]。经过对本地区110例男性尖锐湿疣患者进行19种 HPV 基因分型的检测， 有以下发现：（1）本地区110例男性尖锐湿疣患者皮损中HPV阳性人数107例，检出率为97.27%，所有检测的19 种基因型中，共检测出14 种 ，未发现高危亚型中的18、31、35、39、56型，裴立红等[6]之前报道的检测结果仅检测到5种基因型别，因而本研究结果更能反映本地区男性尖锐湿疣患者HPV基因的多样性。基因型以低危型为主，低危型感染率为90.91%，以HPV6、11为主，这与目前国内外报道结果一致[7-9]。（2）高危型感染率高、亚型广、多重感染比例较高，高危型感染率为43.64%，多重感染比例为28.18%，研究表明高危型HPV感染与多种肿瘤的发生有关[10]。 同时，据有关报道，单一型HPV感染可使女性患宫颈癌的风险增加19.9倍，HPV多重混合感染可使宫颈癌的发病风险增加31.8倍[11]，而男性在女性HPV感染过程中起到了病毒传播的“载体”作用[12-15]。 所以，王文格等[16]建议男性患者，无论高危、低危型，均建议让其配偶或性伴做宫颈 HPV分型检测并查有无宫颈病变， 因其部位较隐蔽， 发病不易被发现， 为防止以后的反复交叉感染， 应以及早发现，早防早治为佳 。 （3）感染人群年龄跨度大，高峰延长现象。尖锐湿疣患者年龄从16～65 岁，跨度大，提示感染人群广泛；感染高峰年龄为21～40 岁，提示本地区尖锐湿疣 患者HPV 感染以青壮年为主，可能因为此人群为性活跃人群，同时存在多个性伴侣有关。因此，对性活跃年龄段患者进行全面性病检查及健康教育，对控制性病传播有积极意义。
　　本研究未对16岁以下及65岁以上患者进行检测，存在一定的局限性，有待进一步研究。综上所述，本地区男性尖锐湿疣患者HPV感染具有以低危型为主、高危型及多重感染率高的特点，须在临床工作中引起重视。
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　　（收稿日期：2014-06-16）
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