气相色谱法测定乳酸左氧氟沙星中有机溶剂残留量

来源:用户上传      作者: 黄京燕 乔家彬 马慧艳 宋志超 李爱星 吴春丽

　　[摘要] 目的：建立乳酸左氧氟沙星中有机溶剂残留量的测定方法。方法：采用毛细管气相色谱法，色谱柱为HP-5毛细管柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm），程序升温技术，用内标对比法分离测定甲磺酸左氧氟沙星的残留溶剂。结果：两种溶剂在各自对应的浓度范围内线性关系良好（r>0.999 6），平均回收率分别为100.42%、100.24%，RSD分别为0.775%、0.778%，最低检测限为7.1、11.0 ng。结论：该方法灵敏、准确、可靠，适用于本品有机溶剂残留量的检测。
　　[关键词] 乳酸左氧氟沙星；气相色谱法；有机溶剂；残留量
　　[中图分类号] R927 [文献标识码] C [文章编号] 1674-4721（2011）11（c）-045-02
　　
　　Determination of residual organic solvents in levofloxacin lactate by gas chromatography
　　HUANG Jingyan1, Qiao Jiabin2, MA Huiyan2, SONG Zhichao1, LI Aixing2, WU Chunli2*
　　1.Henan Institute of Veterinary Drug Centre, Henan Province, Zhengzhou 450008, China; 2.School of Pharmaceutical Sciences of Zhengzhou University, Henan Province, Zhengzhou 450001, China
　　[Abstract] Objective: To establish a method for determination of residual solvent in levofloxacin lactate. Methods: Residual solvent in levofloxacin mesylate were determined by capillary gas chromatog raphy using a HP-5 capillary column(30 m×0.32 mm×0.25 μm), and a detector of FID, and a direct injection. Results: The 2 solvents showed good linear relationship within a certain concentration range (r>0.999 6). Residual solvents were well separated in the column with the respective mean recovery range of 100.42% and 100.24%. The respective repeatability (RSD) was 0.775% and 0.778%, and the respective detection limits was 7.1 ng and 11.0 ng. Conclusion: The method has been proved to be accurate and sensitive. It is quite suitable for content determination of organic solvents in levofloxacin lactate.
　　[Key words] Levofloxacin lactate; Gas chromatography; Organic solvent; Residual level
　　
　　乳酸左氧氟沙星是新一代喹诺酮类合成抗菌药，适用于敏感菌所致的呼吸、消化、泌尿、生殖系统、皮肤软组织及外科、耳鼻喉科、眼科、口腔科的各种急、慢性细菌感染。由于乳酸左氧氟沙星在制剂生产过程中使用了甲醇和正丁醇溶剂，根据《中国药典》2010年版二部附录P残留溶剂测定法的要求，应建立残留溶剂测定方法考察其是否残留，并应符合第三类溶剂残留限度的要求[1]，需对这两种残留溶剂准确定量并作为方法学研究[2-8]，应用外标法测定，方法准确、可靠。
　　1 仪器与试剂
　　Agilent 6890N气相色谱仪（HP6890化学工作站），甲磺酸左氧氟沙星（批号：20091001、20091002、20091003，河南普瑞制药有限公司提供）。乙醇、正丁醇、N，N-二甲基甲酰胺均为分析纯。
　　2 方法与结果
　　2.1色谱条件
　　色谱柱：HP-5毛细管柱（Agilent公司，固定液为（5%）苯基-（95%）甲基聚硅氧烷，规格：30 m×0.32 mm×0.25 μm）；柱温：初始温度50℃，保持5 min，以20℃/min升温至280℃，保持5 min；进样口温度：200℃，载气为N2，流速1 ml/min；分流比80∶1；FID检测器，检测器温度：300℃，H2流速：30 ml/min，空气流速：300 ml/min。
　　2.2 溶液配制
　　2.2.1 储备液配制 精密称取乙醇50.08 mg、正丁醇50.06 mg，置10 ml量瓶中，分别加N,N-二甲基甲酰胺（以下简称DMF）稀释至刻度，摇匀，制成乙醇5.008 mg/ml、正丁醇5.006 mg/ml，作为内标储备液。
　　2.2.2 对照品溶液配制 精密量取乙醇和正丁醇的储备液各0.5 ml，置10 ml容量瓶中，加DMF稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。
　　2.2.3样品溶液配制 乙醇溶液的配制：精密称取乙醇54.9 mg，置100 ml量瓶中，加DMF稀释制成每1 ml中含乙醇0.549 mg的溶液，摇匀，备用。正丁醇溶液的配制：精密称取正丁醇49.9 mg，置100 ml量瓶中，加DMF稀释制成每1 ml中含正丁醇0.499 mg的溶液，摇匀，备用。
　　2.3系统适用性试验
　　精密量取乙醇溶液、正丁醇溶液、对照品溶液、DMF各1 μl，分别注入气相色谱仪，记录色谱图。结果DMF无干扰，不影响测定。乙醇、正丁醇在该色谱条件下分离度好，分离效能较高。
　　2.4 线性试验
　　分别精密量取“2.2.1”项下储备液4、2、1、0.5、0.25 ml，置10 ml量瓶中，加DMF稀释至刻度，摇匀，即得乙醇、正丁醇的系列标准溶液。精密量取标准溶液各1 μl，分别注入气相色谱仪，记录色谱图。以峰面积对溶液浓度进行线性回归。结果表明，在所示各线性范围内，乙醇、正丁醇的线性关系良好。结果见表1。
　　
　　表1 线性关系考察
　　
　　2.5 检测限与定量限
　　取“2.2.2”项下对照品溶液，以DMF为溶剂逐步稀释，进样1 μl，记录色谱图，以信噪比3∶1确定检测限，以信噪比10∶1确定定量限。乙醇、正丁醇的检测限分别为7.1、11.0 ng，乙醇、正丁醇的定量限分别为27.5、33.3 ng。
　　2.6 精密度试验
　　精密量取“2.2.2”项下对照品溶液1 μl，注入气相色谱仪，重复进样6次，记录色谱图。计算测得峰面积，考察精密度。结果乙醇、正丁醇的RSD分别为2.10%、2.07%。结果见表2。

　　
　　表2 精密度试验
　　
　　2.7 重复性试验
　　取同一批甲磺酸左氧氟沙星（批号：20091001）0.5 g，精密称定，共6份，分别置5 ml量瓶中，加DMF溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取溶液各1 μl，分别注入气相色谱仪，记录色谱图，同时测定“2.2.2”项下对照品溶液。按外标法以峰面积计算，结果表明本方法重复性良好。
　　2.8 回收率试验
　　取同一批甲磺酸左氧氟沙星（批号：20091001）0.5 g，精密称定，共6份，分别置5 ml量瓶中，精密加入储备液0.25 ml，加DMF稀释至刻度，摇匀。精密量取溶液各1 μl，分别注入气相色谱仪，记录色谱图，同时测定“2.2.2”项下对照品溶液。根据峰面积计算回收率。结果：乙醇、正丁醇的平均回收率分别为100.42%、100.24%，RSD分别为0.775%、0.778%。结果见表3。
　　
　　表3 加样回收率试验（%）
　　
　　2.9 样品测定
　　取甲磺酸左氧氟沙星（批号：20091001，20091002，20091003）0.5 g，精密称定，分别置5 ml量瓶中，加DMF溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。精密量取供试品溶液和“2.8”项下对照品溶液各1 μl，分别注入气相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算。结果表明，三批甲磺酸左氧氟沙星样品均未检出乙醇、正丁醇，符合药典规定。
　　3 讨论
　　HP-5是非极性毛细管柱，适用于多核芳烃、酚、酯、碳氢化合物、药物及醇等，比较适合用于残留溶剂分析。在该研究条件下各物质均可达到有效分离，且峰形好，灵敏度高，重现性好。
　　本研究采用毛细管柱，程序升温方式对有机溶剂的分离良好。能对样品都进行测定，操作简便，且方法的精密度、最低检测限、回收率等均符合要求，故本法适用于乳酸左氧氟沙星中残留有机溶剂的检测。
　　[参考文献]
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　　（收稿日期：2011-08-08）

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