日本圆叶海棠的组培快繁技术

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　　摘要：以日本圆叶海棠新梢茎尖或带腋芽茎段为材料，进行组培快繁。诱导培养基为MS+6-BA0.3mg/L(单位下同)+NAA0.03；增殖培养基为MS+6-BA0.2+NAA0.02；壮苗培养基为MS+6-BA0.1+NAA0.02；生根培养基为1/2MS+IBA0.1+IAA0.2。增殖系数7～8；生根率98％；移栽成活率86％。
　　关键词：日本圆叶海棠；组培快繁技术
　　中图类号：S661.4　文献标识码：A　文章编号：1002－2910(2008)02－0056－02
　　
　　日本圆叶海棠(Malus prunifolia Borkhvar.ringo Asami)，别名丸叶海棠，是日本培育苹果苗木中广泛应用的一种基砧，其显著特点是扦插繁育能力强，扦插成活率可达90％以上。经过组培脱毒的圆叶海棠生长量大，抗逆性强，嫁接亲和性好，具有更稳定的生长势，用圆叶海棠扦插繁殖取代实生播种繁殖是苹果育苗中的一次革命。本文建立的日本圆叶海棠快繁体系，可在短期内获得大量无毒无性系砧木，实现周年生产，满足苹果苗木生产对砧木的需求。
　　
　　1　培养条件
　　
　　①诱导培养基：MS+6-BA0.3mg/L+NAA0.03m/L；②增殖培养基：MS+6/-BA0.2mg/L+NAA0.02mg/L；③壮苗培养基：MS+6/-BA0.1mg/L+NAA0.02mg/L；④生根培养基：1/2MS+IBA0.1mg/L+IAA0.2mg/L。前3种培养基均加蔗糖35g/L，生根培养基蔗糖为23g/L，pH值5.8，培养温度为25℃，光照强度为1500～2000Lx，光照时间为14小时／天。
　　
　　2　生长与分化情况
　　
　　2.1　无菌材料的处理
　　选取日本圆叶海棠春季萌发抽生的新梢茎尖或带腋芽的茎段，剪成长3～5cm的茎段置于三角瓶中，先用少许洗衣粉浸洗2～3分钟，然后用自来水冲洗到没有泡沫为止，在超净工作台上，用0.1％HgCl2消毒8分钟，再用无菌水淋洗5～6次，滤纸吸干水分，剪成长1～2cm的单芽茎段或带几个较小叶片的茎尖，接种于诱导培养基上。
　　
　　2.2　不定芽的分化及丛生芽增殖
　　芽在诱导培养基上培养20天后开始萌动，伸长成无菌苗。在无菌条件下，将上述伸长苗再切段，每段1～2个芽，接入增殖培养基中，30天后可产生大量丛生芽，将丛生芽再切段，接种在相同培养基上继代培养。增殖系数为7～8。
　　
　　2.3　壮苗培养
　　在增殖培养基中，获得大量的丛生芽，但芽分化较多，植株生长较细弱，因此，将经过继代增殖的小植株，在生根前接种在壮苗培养基中，进行壮苗培养，获得健壮的无根试管苗。
　　
　　2.4　诱导生根及移栽
　　取株高2.5～3cm小苗接种到生根培养基上培养2周左右，生根率达98％。然后在调控温室驯化生根20天，当试管苗根长2～3cm、茎干微呈红色、叶大而浓绿时，开口练苗3天，然后用镊子夹出试管苗，栽入已配好营养土(珍珠岩、麦茬土和河沙按1:2:1混合)的六棱型营养钵中，用0.1％多菌灵消毒后，保持80％的湿度，两周后开始长出新根和新叶，成活率达86％。当长出2～4片真叶时开始移人大田，成活率达98％。

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