蝴蝶兰叶片诱导再生培养最佳配方的研究

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　　摘要以蝴蝶兰H001幼叶进行组织培养，探讨了MS培养基附加不同浓度配比的激素，对叶片诱导再生的影响。结果表明：在MS+0.5 mg/L NAA+5.0 mg/L 6-BA培养基中有新叶芽形成，离体再生效果最佳。
　　关键词蝴蝶兰H001；离体叶片；诱导；培养
　　中图分类号 S682.31 文献标识码A文章编号 1007-5739（2011）10-0185-02
　　
　　蝴蝶兰（Phalaenopsis amabilis）为著名的盆栽观花植物，花型如蝶、花期较长，具有很高的观赏价值，为热带兰中珍品。蝴蝶兰属单型茎的兰花，很少有侧芽萌发，靠自然无性繁殖，繁殖率极低，有性繁殖又因种子细小，不含有种子萌发所需要营养的胚乳和其他组织，在自然条件下很难萌发。国内外对蝴蝶兰组织培养技术都有一定的研究[1-7]。该文主要研究离体叶片在不同浓度激素的MS培养基中对蝴蝶兰诱导培养的影响，最终找出一个最佳配方。
　　1材料与方法
　　1.1试验材料
　　蝴蝶兰品种为H001。
　　1.2试验设计
　　采用MS培养基为基本培养基，激素为NAA与6-BA，试验设计不同激素浓度如表1所示。
　　2结果与分析
　　外植体幼叶接种于不同激素水平的培养基，生长明显不同。30 d时，在MS+0.5 mg/L NAA+6.0 mg/L 6-BA培养瓶中（图1），叶片颜色逐渐发黄，也未产生愈伤组织；在MS+0.4 mg/L NAA+5.0 mg/L 6-BA培养瓶中（图2），叶片颜色保持绿色，但没有生长的迹象；在MS+0.4 mg/L NAA+6.0 mg/L 6-BA培养瓶中（图3），幼叶有新叶芽长出，但芽体较小；在MS+0.5 mg/L NAA+4.0 mg/L 6-BA培养瓶中（图4），也同样出现了芽体，长出新的较小叶芽；在MS+0.5 mg/L NAA+5.0 mg/L 6-BA培养瓶中（图5），有新芽长出，芽体较大，基部出现许多小的芽突起；在MS+0.4 mg/L NAA+4.0 mg/L 6-BA培养瓶中（图6），有新芽长出，芽体也较大；在MS+0.6 mg/L NAA+4.0 mg/L 6-BA培养瓶中（图7），有新芽长出，芽体也较大，颜色略淡，在MS+0.6 mg/L NAA+6.0 mg/L 6-BA培养瓶中（图8），叶片颜色保持绿色，虽然没有死亡，但也没有生长的迹象。
　　经后期培养60 d观察，MS+0.5 mg/L NAA+5.0 mg/L 6-BA（图9）上的幼叶长势较快，而其他激素浓度配方中幼叶发生褐变或停止生长。因此，初步认为：不同培养基配方试验，以幼叶在MS+0.5 mg/L NAA+5.0 mg/L 6-BA培养基芽体生长最好，离体培养效果最佳。
　　3结论与讨论
　　（1）将蝴蝶兰幼叶进行组织培养，不同诱导培养基配方试验表明：在MS+0.5 mg/L NAA+5.0 mg/L 6-BA培养基中有新叶芽形成，离体再生效果最佳。
　　（2）在MS培养基中附加不同浓度配比激素，一般认为6-BA促进长芽，NAA促进生根。但由于培养基中6-BA浓度远高于NAA，所以植物芽体丰盛，但根的伸长效应并不明显。
　　（3）虽然前期叶片也长出芽体，但在以后的生长中，发生褐变或停止生长，对于造成该现象的具体原因，还需要进一步研究。
　　4参考文献
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