荧光定量PCR法与酶联免疫吸附法在乙型肝炎病毒检测中的应用价值体会
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【摘要】目的 对荧光定量PCR法与酶联免疫吸附法检测乙型肝炎病毒的应用价值进行研究。方法 选取于2013年1月～2017年2月在献血中发现的100例乙型肝炎病毒携带者作为研究对象，使用荧光定量PCR法和ELISA 法检测研究对象血浆标本的HBV DNA 和血清学标志物，然后对结果进行比较分析。结果 在乙肝标志物为阳性的各组患者中均发现不同程度的病毒DNA复制。大三阳的阳性率为96%、HBV DNA 拷贝数平均值为3.13×108；小三阳的陽性率为86.6%，HBV DNA拷贝数平均值为5.87×105；HBeAg与HB-sAb的阳性率为51.0%，HBV DNA拷贝数平均值是2.31×104，除此之外的血清标志物阳性组合的阳性率比较低，HBV DNA拷贝数平均值也不高。可见，大三阳的阳性率与HBV DNA含量是最高的，同其余各组相比，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 荧光定量PCR法检测乙型肝炎病毒具有更高的可靠性和敏感度，能够对HBV感染和复制状态进行真实反映，对乙型肝炎早期诊治、传染性判断，及预后监测质量具有重要意义。
【关键词】荧光定量PCR法；酶联免疫吸附法；乙型肝炎
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095-6681.2019.13..01
乙肝病毒是我国重要的传染性疾病，具有较高的发病率，是不容忽视的公共卫生问题。若长期携带乙肝病毒，极易诱发肝硬化和肝衰竭等疾病，对患者生命健康带来严重威胁。随着抗病毒药物的不断推出，HBV变异株数量增加，使得血清学检测更加困难，准确性和敏感性都受到影响[1]。近几年，生物技术发展使得HBV检测克服了传统PCR技术的缺陷。本次研究对荧光定量PCR法与酶联免疫吸附法检测乙型肝炎病毒的应用价值进行研究，具体报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2013年1月～2017年2月在献血中发现的100例乙型肝炎病毒携带者作为研究对象，所有研究对象年龄18～56岁，其中有女32例，男68例。
1.2 方法
确保无菌条件下对献血者血液进行采集，采集静脉血
5 mL，在温度为4摄氏度的冰箱中放置2小时后将血清分离进行检测。将S/CO超过15且HBsAg筛查为有反应性的献血者血浆挑出，运用ELISA检测方法对血清标志物表面抗体和抗原、e抗体和e抗原、核心抗体进行检测；使用荧光定量PCR法检测乙型肝炎病毒的DNA。上述操作均按照说明书要求严格执行，并按试剂说明书标准进行判定。
1.3 统计学方法
使用统计学软件15.0对数据进行分析。用%表示不同方法测得的阳性率，用平均值表示拷贝数，数值用均数±标准差进行表示，对两组间数据进行t检验，P<0.05，表示差异具有统计学意义。
2 结 果
2.1 荧光定量PCR检测乙型肝炎DNA和ELISA的检查结果
在乙肝标志物为阳性的各组患者中均发现不同程度的病毒DNA复制。其中，HBsAg阳性血清有69例，其中
HBV DNA呈阳性的有56例，所得到的阳性检测率为81.2%；对67例HBV DNA阳性血清运用ELISA法进行检测，结果发现有39例呈阳性，所得到的结果是荧光定量PCR的58.2%。本次研究大三阳的阳性率达到96%、乙肝病毒DNA拷贝数的平均值为3.12×108；小三阳的阳性率为86.6%，
H乙肝病毒DNA拷贝数的平均值是5.88×105，除此之外的血清标志物阳性组合的阳性率比较低，HBV DNA拷贝数平均值也不高[2]。可见，大三阳的阳性率与HBV DNA含量是最高的，同其余各组相比，差异有统计学意义（P<0.05）。
3 讨 论
HBeAg是反应人们血液传染性与否的重要指标，HBsAg是检测乙肝携带者的主要指标。大三阳包括HBcAb、HBsAg和HBeAg （三项呈阳性），是对患者体内乙肝病毒高传染性和复制率的反映。本次研究显示：大三阳的阳性率为96%、HBV DNA拷贝数平均值为3.13×108，这就说明荧光定量PCV法与酶联免疫吸附法检测乙肝病毒复制方面具有较好的效果，能够准确判断出患者是否处于乙肝病毒感染时期（这一结果同胡庆宏等人的研究结果相一致）；小三阳的阳性率为86.6%，HBV DNA 拷贝数平均值为5.87×105，小三阳的乙肝病毒DNA含量低于大三阳组，HBeAb转阳与HBeAg转阴就代表小三阳患者处于恢复期，但是患者体内仍有乙型肝炎病毒的DNA复制；HBeAg与HB-sAb的阳性率为51.0%，HBV DNA拷贝数平均值是2.31×104，除此之外的血清标志物阳性组合的阳性率比较低，HBV DNA拷贝数平均值也不高。可见，大三阳的阳性率与HBV DNA含量是最高的，
同其余各组相比，差异有统计学意义（P<0.05）。
综上所述，荧光定量PCR法检测乙型肝炎病毒具有更高的可靠性和敏感度，能够对HBV感染和复制状态进行真实反映，对乙型肝炎早期诊治、传染性判断，及预后监测质量具有重要意义。
参考文献
[1] 高东旗，乔 杨，赵景平，等.某部乙型病毒性肝炎病例调查及感染危险因素[J].解放军预防医学杂志，2016，（06）：795.
[2] 朱明岩，叶 英.不同荧光定量PCR技术在乙型肝炎病毒检测中的应用评价[J].安徽医药，2016，（09）.
本文编辑：赵小龙
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