姬松茸多酚的提取及检测
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姬松茸,又名巴西菇,为纯天然绿色食品,是一种美味可口的药食兼用菌,其含有的多糖抗癌活性在已知的真菌中居首位。另外,姬松茸还含有多种活性物质,其中的多酚类物质具有抗氧化、抗癌等多种活性。本实验从姬松茸中提取多酚,并分析其含量及种类,将对姬松茸食用菌营养成分的研究及相关产品的开发具有重要意义。
一、材料和方法
材料。姬松茸:1号:河北民安农业开发有限公司提供;2号:购自于上海;3号:购自于福建。
试剂。无水乙醇、甲醇、甲酸、没食子酸、多酚类物质标品(芦丁、肉桂酸、对香豆酸、表儿茶素、咖啡酸等),均购自徐州中达生物科技有限公司。
二、实验方法
姬松茸多酚提取方法:采用水浴回流加热法。
多酚含量计算方法:制作标准曲线采用福林酚法,根据回归方程计算三种不同姬松茸子实体中多酚的含量。
多酚的检测:采用高效液相色谱1100检测。方法:流动相A:甲醇,B: 1%的甲酸水,流速0.84Ml/min,柱温35℃,检测波长280nm。
三、结果与分析
标准曲线的制备。采用福林酚法绘制标准曲线(见图1),该标准曲线基本反映了样品中总酚的量和光吸收之间的关系,能够用来进行总酚含量测定实验。
总酚含量的测定。对三种样品进行总酚含量测定,结果显示:不同产地的样品中多酚含量有所差异(见表1)。其中样品1中多酚含量较高。
多酚种类的检测。采用高效液相色谱法对样品1中多酚进行检测,检测的多酚物质包括芦丁、肉桂酸、对香豆酸、表儿茶素、咖啡酸等。其中根据标品出峰时间,样品在保留时间23.368min(见图2右图)的峰和标品中23.348(见图2左图)出峰时间几乎一致,初步判断为对香豆酸。
四、讨论
姬松茸是一種富含多种活性成份的食药用兼用菌,其中多酚也是姬松茸含有的一种重要活性物质,因此,对于姬松茸多酚的研究是非常重要的。国内目前对姬松茸多酚开展的研究多集中于多酚提取条件的优化、总酚分离纯化及其功能方面的研究,对于姬松茸多酚具体成份的研究较少。本实验通过对不同来源的姬松茸多酚进行提取并测定其含量,发现了来源不同的姬松茸总酚含量不同,同时通过高效液相色谱的方法初步确定样品1中含有对香豆酸多酚成分。但姬松茸多酚中可能还含有其它多酚类物质,因此对于姬松茸多酚的研究还需要更加深入的研究。
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