探讨公共场所公共用品的微生物检测
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[摘要] 公共用品微生物检测的目的是为了通过检测公共场所的消毒效果，从而加强公共场所消毒效率，保证公共场所的公共用品安全、卫生，通过定期对公共场所采集的物品进行微生物检测，有利于督促相关部门对公共设施制度健全的的消毒规章制度，培养消毒人员加强消毒操作技术，保障公共场所公共用品的卫生安全，提高公共场所公共用品消毒效率。
[关键词] 公共场所;公共用品;微生物;检测
[中图分类号] R7 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2020）01（a）-0160-03
[Abstract] The purpose of microbiology testing of public goods is to strengthen the disinfection efficiency of public places and to ensure the safety and sanitation of public goods in public places by testing the disinfection effect of public places. By regularly conducting microbiological testing on items collected in public places， it is helpful to urge related departments sound disinfection rules and regulations for public facilities; cultivate disinfection personnel to strengthen disinfection operation technology; guarantee the sanitation and safety of public supplies in public places; improve the disinfection efficiency of public supplies in public places.
[Key words] Public places; Public goods; Microorganism; Detection
公共场所的公共用品如果消毒不到位，会导致细菌滋生，严重会传播传染类病毒，因此需要定期通过采集公共场所中公共用品的微生物进行检查，从而有效监督公共场所卫生安全问题，也能够对传染疾病起到防范作用，通过公共用品微生物检测[1]，完善公共场所卫生安全相关规章制度，为公共安全提供科学的依据。
1 公共场所公共用品微生物检测方法
1.1 微生物检查范围
2018年，微生物检查相关机构对市内4类公共场所做了微生物检查，分别是洗浴场所、美容场所、理发场所和旅店，其中一共有490户，对其中1 076份公共卫生用品采集微生物进行检测。针对上述4类场所中毛巾、拖鞋、浴巾等进行检测，通过检测分析出其中含有大量细菌，包括大肠菌群、溶血性链球菌等，在拖鞋中检测出含有真菌成分。
1.2 微生物收集方法
通过对公共用品中随机抽取的方法，将场所中做过消毒处理准备使用的物品进行微生物收集工作，要全程进行无菌操作，通过利用将细菌消除过后的棉拭子，浸泡在10 mL灭菌生理盐水内，在采集的公共物品上進行反复的涂抹，注意要涂抹均匀[2]，利用剪刀，将手拿部分减掉，将沾取公共物品微生物的棉拭子放进生理盐水内，4 h内送往实验室检测。
1.3 微生物收集部位和面积
①对于毛巾、浴巾、枕巾等进行微生物收集时，需要先将其进行对折，将棉拭子在其反正面进行反复涂抹，范围以25 cm2为标准，反复涂抹5次过后，作为一份样品，在对其进行微生物检测时，需要每件物品收集2份微生物样品。
②对床单、被罩等进行微生物检测时，需要采集使用过程中与皮肤接触较多的部位，例如颈部或者脚部，与收集毛巾的方法相同，以25 cm2为标准，反复涂抹5次过后，作为一份样品，需要采集2份微生物样品进行检测。
③对睡衣、浴袍等进行微生物检测时，需要对即将检测的对象采取两个范围进行展开，通过不同地方采取两个25 cm2的面积范围，分别对其进行5次反复均匀的涂抹，每个公共物品的微生物检测收集2份样品。
④在对拖鞋进行采集微生物样品时，将鞋内与皮肤接触最多的部位进行采集，可以通过脚趾部分对其25 cm2的面积进行反复的涂抹，5次过后作为一份样品，通常可以将一双鞋作为一份样品，采集的总面积为50 cm2。
2 样品的培养及检验流程
2.1 实验器材和培养基
想要对公共场所中的公共物品进行科学的微生物检测，就要通过各种实验器材和培养基的支持，通过高压蒸汽灭菌器、试管、器皿、恒温培养箱等实验器材对微生物进行检测[3]，利用生理盐水、血琼脂培养基、孟加拉红培养基等对微生物的繁殖提供营养基质。
2.2 微生物检验流程
①对采集的样品进行稀释，将放有采样后棉拭子的试管充分震摇，此液为1：10的样品匀液，用1 mL无菌吸管吸取1：10的样品匀液，沿管壁缓缓注入到盛有9 mL的无菌生理盐水管中，制成1：100的样品匀液。每递增稀释一次，都要更换一次1 mL无菌吸管。
②对样品中细菌总数进行检验，通过对样品的分析，预测出样品的污染情况，选择1～2个稀释度的样品匀液，对其采取10倍递增稀释过程中，将吸取的1 mL匀液分别放置在2个无菌器皿中，再通过1 mL的稀释液，对两个无菌器皿中的样品进行对比，把营养琼脂冷却到45～50度左右，取15～20 mL分别倒入2个无菌器皿中[4]，并将其混合均匀，待琼脂凝固之后，把2个无菌器皿进行翻转，放到培养箱中进行培养。 ③对菌落进行计数，对菌落的计数要选择菌落数在30～300 CFU之间，并且无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。在计数过程中，若所有稀释度的菌落数均超过300 CFU，用稀释度最高的平板的菌落平均数乘以最高稀释倍数进行计数;若所有稀释度菌落数均小于30 CFU，则按照稀释倍数最低的平板的平均菌落数乘以稀释倍数进行计数;若所有稀释度均无菌生长，则以<1乘以最低稀释倍数进行菌落计数;若所有稀释度菌落数均不在30～300 CFU之间，以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数进行计数;若只有1个稀释度的菌落数在适宜范围内，以两个平板的平均菌落数乘以相应稀释倍数计数;若两个连续稀释度菌落数均在适宜范围内，则按菌落计数公式计算。
3 微生物检测方法
3.1 大肠杆菌检测方法
通过乳糖胆盐发酵实验进行检查，将收集的公共物品微生物样品倒进双料乳糖胆盐发酵液中，置于培养箱内培养18～24 h，继而对其进行仔细的观察，通过分析确定是否有酸和气产生，如果没有出现产酸和产气的现象，则通过检测可以认定为大肠菌群为阴性[5]，如果观察过程中发现产酸和产气现象，需要进行分离培养，从而进一步证实实验。
分离培养：从产酸和产气的样品中，挑取1环培养液，转接到伊红美蓝琼脂平板中，再将其放置在培养箱中18～24 h，取出并进行仔细观察菌落在培养过程中形成的形态进行分析，通过革兰氏染色镜检对其进行下一步研究。在伊红美蓝琼脂平板选取类似大肠菌群菌落接种到乳糖发酵管中，置培养箱中培养18～24 h，凡乳糖发酵产酸产气，革兰氏染色为阴性的无芽胞杆菌，即为检出大肠菌群。
3.2 金黄色葡萄球菌检测
①将采取的公共用品中的1 mL微生物样品放在9 mL的氯化钠肉汤培养基内，培养18～24 h，继而需要从培养基中取出1～2接种环接种在血琼脂培养基中，置培养箱中培养18～24 h，此时平板上菌落成圆形、金黄色、凸起，表面光滑，周围有溶血环，选取其中较为典型的菌落，通过镜检进行分析，如果是革兰氏阳性，会出现葡萄状排列现象。
②通过血浆凝固酶实验进行金黄色葡萄球菌检测，吸取新鲜血浆，按照1：4的标准进行，其中0.5 mL放在灭菌试管中，再加入等待检测的肉汤培养物中的细菌[6]，要注意培养24 h左右的，取0.5 mL放在灭菌试管中，将新鲜血浆和待检菌混匀，放在温箱中，每隔30 min对其仔细观察一次，放置24 h左右，如果检测出现凝块现象，可以确定检测结果是阳性。
③实验报告，在上面叙述的实验过程中，如果平板出现典型菌落生长现象，通过染色镜检，血浆凝固酶试验阳性，得出科学的报告。
3.3 溶血性链球菌检测方法
①选取1 mL的公共用品微生物样品，将其放置在9 mL的葡萄糖肉浸液肉汤中，如果样品出现污染严重的现象，要根据上文所提到的同样量接种在匹克氏肉汤中，放在培养皿中18～24 h，接种在血平板上，再放置18～24 h进行培养，将其中产生的溶血圆形的细小菌落挑起，放置在血平板对其进行分纯处理，再对其进行观察和分析，链的长短能够直接收环境的影响和细菌种类的影响，液体培养过程中容易形成较长的链，相反，固体培养基中链的长度较短。
②实验报告，对血平板上的菌落进行分析，当期呈现灰白色菌落，呈现半透明状态，表面较为光滑，呈现圆形或者卵圆形，通过链的方式以此排列，并且在周围伴有溶血环[7]，这时能够通过实验得出样品有溶血性链球菌。
3.4 真菌檢测方法
①将1：10的稀释液通过灭菌吸管吸取2 mL，将其分别放置在灭菌平皿中，每个灭菌平皿中放置1 mL，同时，另外吸取1 mL放置在9 mL的灭菌盐水中，用新的灭菌吸管对其吸取5次，这时，匀液为1：100稀释液，然后在根据上述顺序以同样的方式做10倍递增稀释液，每次换一只吸管，结合样品中的污染情况进行分析，并选3个合理的稀释度，等到溶液冷却到45℃左右时，放进灭菌平皿中，等到其凝固之后，将其放置在25～28℃的温箱中，放置3 d后对其进行观察，以一周为周期进行培养和观察分析。
②菌落计数，在这些实验中，通常选择5～50 CFU平皿展开计数，通过两个灭菌平皿中的菌落平均数乘以稀释倍数;若两个稀释度菌落数都在规定范围内或3个稀释度都不在范围内，可以通过菌落总数的计算方法对其进行计数。
4 检测结果
通过对公共场所公共用品的检测，能够得出市内90%的卫生用品微生物指标检测合格，其中真菌检测率较高，达到9%。
5 结论
综上所述，通过该次监测可以看出，该市公共场所公共用品的微生物指标合格率较高，其中大型公共场所消毒效果较好，小公共场所合格率较低，因此需要相关部门加强卫生监督和宣传工作，定期对公共场所的公共用品进行微生物检测。
[参考文献]
[1] 王惠平，高全山，杨丽君，等.公共场所公共用品的卫生状况分析[J].中国卫生检验杂志，2017（10）：178.
[2] 祝艳云，曹萍.公共场所公共用品的微生物检测分析[J].中国卫生产业，2015，263（36）：124-126.
[3] 尹小燕，陈宏宇.公共场所公共用品的微生物检测分析[J].中国农村卫生，2017（10）：37.
[4] 李继强.公共场所住宿业公共用品消毒方式的探讨[J].中国公共卫生管理，2016（4）：119-121.
[5] 马玉霞，丽娜.哈密地区公共场所公共用品卫生监测[J].中国消毒学杂志，2019（6）：121-122.
[6] 朴亨东.2008～2010年图们市公共场所公共用品消毒监测[J].中国实用医药，2017（32）：266-267.
[7] 刘柳萍.公共场所公共用品消毒效果监测[J].中国消毒学杂志，2016（1）：13.
（收稿日期：2019-10-09）
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