金黄色葡萄球菌增菌培养基增菌效果的比较与分析

来源:用户上传      作者:

　　【摘要】 目的 通过选择好的培养基,以提高金黄色葡萄球菌(以下简称金葡萄)的检出率。方法 用一定数量的大肠埃希氏菌与不同数量的金葡菌混合培养,观察不同增菌液的增菌效果。结果 从SCDLP增菌液中[1]中,金葡菌划分离到Baird-parker(以下简称B-P)平板、高盐甘露醇平板、普通琼脂平板上不生长,5个血平板上仅有1个生长;从7.5%氯化钠增菌液[2]中,金葡菌划线分离道上述平板均生长。结论 自配的7.5%氯化钠增菌效果较好。
　　【关键词】金黄色葡萄球菌;增菌效果;SCDLP增菌液
　　
　　【Abstract】 Objective To choose a better commercial enrichment medium that can improve the detecting rate of Staphylococcus anurans. Methods E coil and Staphylococcus anurans were cultured together with different culturing media. Then the enriching erect of each enrichment medium was determined. Results In SCDLP enriching medium, Staphylococcus anurans rules and separates B-P plat, the salt man nit plat, Ordinary agar plats, it doesn’t grow. But only one Staphylococcus anurans grow in 5 blood plats. In 7.5% Sodium chloride enrichment medium, Staphylococcus anurans rules and separates above-mentioned plat grow. Conclusion The effect of the 7.5% Sodium chloride enrichment medium is good.
　　【Key words】 Staphylococcus anurans Enriching effectSoya casein digest lecithin polysorbate broth 7.5% sodium chloride enrichment medium
　　
　　金黄色葡萄球菌是污染食品和引起食物中毒的主要病原菌,也是引起化脓性炎性反应、败血症及脓毒血症的病原菌,同时也是检测医院消毒效果和医源性感染的一个重要指标。本试验立足于我国消毒技术规范和食品卫生国家标准,选择不同增菌液对金葡菌进行增菌分离培养,观察增菌效果。现将结果报告如下。
　　1 材料与方法
　　1.1 实验菌株 河南省CDC消毒实验室提供。
　　1.2 实验材料 SCDLP液体培养基、 B-P培养基、营养琼脂培养基均购于北京陆桥技术有限责任公司。血平板郑州博赛生物实属研究所提供。甘露醇发酵管、葡萄糖发酵管、乳糖发酵管、触酶试剂均购于广东环凯微生物科技有限公司。新生霉素药敏纸片、新鲜血浆由安阳市第一人民医院细菌检验室惠赠。
　　1.3 培养基 7.5%氯化钠肉汤:蛋白胨10 g、牛肉膏3 g、氯化钠7.5 g、蒸馏水1000 ml调pH7.4,121℃高压灭菌15 min,备用。
　　1.4 高盐甘露醇平板 蛋白胨10 g,牛肉膏1 g,氯化钠25 g,琼脂粉20 g,0.1%酚红溶液 25 ml 蒸馏水1000 ml 甘露醇10 g、调pH7.4,121℃高压灭菌15 min,备用。
　　1.5 试验方法:
　　1.5.1 增菌及分离培养 以无菌操作取试验菌株,分别转种至SCDLP和7.5%氯化钠肉汤中,(36±1)℃培养24 h。分别从上述两种增菌液中取一环划线转种至血平板、高盐甘露醇平板、B-P平板和营养琼脂平板,(36±1)℃培养24 h,观察结果。结果见表:
　　表1
　　金葡菌增菌后在各种培养基上生长情况比较
　　液体增菌液固体培养基SCDLP7.5%氯化钠肉汤
　　(1)(2)(3)(4)(1)(2)(3)(4)
　　1 ---- +- + +
　　2 ---- + + + +
　　3 + --- + + + +
　　4 ---- + + -+
　　5 ---- + + + +
　　注:(1)血平板;(2)高盐甘露醇平板;(3)B-P平板;(4)营养琼脂平板
　　1.5.2 革兰染色及生化反应 从(1)(2)(3)(4)平板上,挑取菌落,分纯培养。从已分纯的营养琼脂平板上挑取菌落,革兰染色为G+球菌,呈葡萄状排列。生化反应:分解甘露醇,分解葡萄糖,分解乳糖,触酶试验阳性,血浆凝固酶试验阳性,对新生酶素敏感。
　　2 结果与讨论
　　2.1 在日常细菌检验工作中,选择合适的增菌液和培养基,对于是否能检出目的菌是否至关重要的。如果致命菌漏检,往往会影响对样品作出正确评价。在消毒技术规范中,金葡菌所用的增菌液是SCDLP,对于样品中混有大量大肠埃希菌,而金葡菌含量又极少的情况,此增菌液对大肠埃希菌却无抑制作用,既使用高盐甘露醇平板、B-P平板这些选择性培养基也不能分离到金葡菌。根据金葡菌耐高盐的特性,先用7.5%氯化钠肉汤增菌,高盐抑制了大部分G-杆菌生长和非致病性球菌的生长,同时,再用金葡菌选择性平板分离,金葡菌生长情况良好。
　　2.2 曾有文献报道,用于沙门氏菌增菌的培养基,市场上销售的SC、MM和TTB与实验室自配增菌液的灵敏度有一定差距[3],市售的商品干燥管培养基除了进口培养基(如Difo.Dxoid.E.Merxk公司的产品)质量比较稳定,国内有些厂家生产的干燥培养基容易出现这样或那样的问题[4]。因此,选择号的培养基,对于细菌检验工作来说市非常重要的。
　　
　　参考文献
　　[1] 消毒技术规范,2002,11:204-205.
　　[2] 中华人民共和国国家标准.金黄色葡萄球菌检验.GB478910-2003,67-69.
　　[3] 熊国强,杨红,应艳,等.南昌市西湖区从业人员携带的沙门菌血清学分型及药敏试验.中国卫生检验杂志,2004,4,14(2):159-160.
　　[4] 王钦升,周正明,高屹,等.实用医学培养基手册.北京.人民军医出版社,1999,3,28.

转载注明来源:https://www.xzbu.com/2/view-647980.htm