健儿粉水提工艺研究
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摘 要
目的：优化健儿粉中总皂苷的水提工艺。方法：以料液比、提取次数、提取时间为考察因素，以总皂苷含量为评价指标，采用正交试验法优化提取工艺。结果：最佳水提工艺为料液比1∶8，提取次数3次，提取时间90min。结论：优选的提取工艺操作简单、成本低廉，易于工业化生产。
关键词
健儿粉;总皂苷：水提工艺;正交试验
中图分类号： TQ461 文献标识码： A
DOI：10.19694/j.cnki.issn2095-2457 . 2020 . 06 . 68
健儿粉是由山药、茯苓、山楂、炒麦芽、白扁豆、莲子、薏苡仁、鸡内金、陈皮九味药食同源药材组方经水提取后通过喷雾干燥制得的提取物，具有補气健脾，渗湿止泻之功效，适宜儿童脾虚所致食积、腹胀、泄泻等证。
皂苷（saponin）又称皂素或皂甙，是苷元为三萜或螺旋甾烷类化合物的一类糖苷，具有抗氧化、抗菌、抗癌以及调节肠道菌群等有价值的生物活性[1-5]，主要分布于陆地高等植物中，也少量存在于海星和海参等海洋生物中，山药、茯苓、白扁豆等均含有皂苷成分。为了更好地控制其质量，为制备工艺提供科学性依据，本文以总皂苷含量为指标，采用正交试验法对水提工艺进行系统考察，以筛选出最佳提取工艺条件。
1 仪器与试药
紫外可见分光光度计（PE Lambda 25）;赛多利斯224-1CN电子天平;泰斯特98-1-B调温电热套;DK-S26电热恒温水浴锅;玻璃层析柱（200mm*30mm）;人参皂苷Re标准品（批号110754-201827，供含量测定用，购自中国食品药品检定研究院）;Amberlite-XAD-2大孔吸附树脂D101（BR，上海伊卡生物技术有限公司）;无水乙醇（AR，天津欧博凯化工有限公司）;中性氧化铝（AR，100-200目，天津市科密欧化学试剂有限公司）;Amberlite-XAD-2大孔树脂（BR，上海伊卡生物技术有限公司）;香草醛（AR，天津市永大化学试剂有限公司）;冰乙酸（AR，天津市永大化学试剂有限公司）;高氯酸（AR，天津鑫源化工有限公司）;处方药材（河北蘭氏盛泰药业有限公司）
2 方法与结果
2.1 正交试验设计
选取提取次数（A）、提取时间（B）、料液比（C）为考察因素，（D）设为空列，以总皂苷含量为指标，选用L9 （34）正交试验设计表，进行优化试验以确定最佳水提工艺条件。
2.2 试验方法
2.2.1 试样处理
按照健儿粉水提工艺正交试验设计因素水平表对健儿药粉处方内的药材进行水提，将提取好的溶液浓缩、过滤并定容至500mL，吸取定容摇匀后的试样1.0mL（假如浓度高、或颜色深，需稀释一定体积后再取1.0mL）进行柱层析[12]。
2.2.2 柱层析
玻璃层析柱内装Amberlite-XAD-2大孔树脂，上加1cm中性氧化铝。先用25mL70%乙醇洗柱，弃去洗脱液，再用25mL水洗柱，弃去洗脱液，精确加入1.0mL已处理好的试样溶液（见2.2.1），用25mL水洗柱，弃去洗脱液，用25mL70%乙醇洗脱人参皂苷，收集洗脱液于称量瓶中，置于60℃水浴挥干，以此作显色用。
2.2.3 显色
向上述已挥干的称量瓶中准确加入0.2mL 5%香草醛冰乙酸溶液，转动称量瓶，使残渣都溶解，再加入0.8mL高氯酸，混匀后置于60℃水浴加热10min，取出，冰浴冷却后，准确加入冰乙酸5.0mL，摇匀后，以1cm比色池于560nm波长处与标准管一起进行比色测定。
2.2.4 标准管
玻璃层析柱内装Amberlite-XAD-2大孔树脂，上加1cm中性氧化铝。先用25mL 70%乙醇洗柱，弃去洗脱液，再用25mL水洗柱，弃去洗脱液，精确加入100μL人参皂苷Re标准溶液，用25mL水洗柱，弃去洗脱液，用25mL 70%乙醇洗脱人参皂苷，收集洗脱液于称量瓶中，与试样一起置于60℃水浴挥干，以此作显色用。
2.2.5 计算
2.3 结果
2.3.1 正交试验结果
对总皂苷含量的影响结果见表2、表3。
由表2及表3可知，A因素（提取次数）对结果影响显著（p<0.05），B因素（提取时间）、C因素（料液比）对结果影响不显著（p>0.05），三个因素对总皂苷含量影响的主次顺序为：A>B>C，即：提取次数>提取时间>料液比。由此得出的最佳水提工艺参数为：A3B3C2，即：提取次数3次，提取时间120min，料液比1∶8。为验证工艺条件的稳定性，结合实际生产成本及可能存在的试验误差，暂定水提工艺参数为A3B2C2，即：提取次数3次，提取时间90min，料液比1∶8。
2.3.2 验证试验
分别按照最佳工艺A3B3C2的组合条件和选定工艺A3B2C2的组合条件进行验证试验，重复三次，验证试验结果见表4。
由表4验证试验结果表明，最佳工艺和选定工艺的总皂苷含量差距较小，而选定的工艺提取时间较短，节约能源，有利于降低成本，减少损耗，故采用选定工艺。
3 讨论
该组方是由山药、茯苓、山楂、炒麦芽、白扁豆、莲子、薏苡仁、鸡内金、陈皮九味药食同源药材组成。方中山药甘平为君，益气健脾[13]。茯苓、薏苡仁为臣，健脾补中，渗湿止泻。白扁豆甘温补脾有健脾养胃之功，莲子可补益脾气，涩肠止泻[17]，两者佐助君臣使脾气健运，泄泻得止。山楂擅长消肉食积滞所致的脘腹胀满、嗳气吞酸、腹痛泄泻;炒麦芽可行气消食，健脾开胃，三者合用，可消各种饮食积滞，再以陈皮行气化滞以配合，使全方补而不滞，改善腹胀症状。纵观全方，以补气健脾为主，消补兼施，补重于消，药味多以甘平为主，药量轻，药性平和，适宜儿童脾虚所致食积、消化不良、腹胀腹泻，或体力下降，具有健脾消食，渗湿止泻之功效。本文通过试验优选出最佳提取工艺，本工艺中所用提取溶剂廉价易得，应用广泛，且工艺方法简便，实用性强，以期为工业化生产提供理论依据。
参考文献
[1] Kim Wei Chan， Nicholas M H ， Khong， et al. Isolation and antioxidative properties of phenolics-saponins rich fraction from defatted rice bran[J].Journal of Cereal Science，2013，57（3）：480-485.
[2] Hassan S M ， Haq A U， Byrd J A， et al. Haemolytic and antimicrobial activities of saponin-rich extracts from guar meal[J].Food Chemistry，2009，119（2）：600-605.
[3] 王领，倪敏，江滨.人参皂苷抗结直肠癌作用机制的研究进展[J].中国肿瘤外科杂志，2019，11（05）：370-373.
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[5] 黄生辉，李妍怡，金华，等.中药有效成分皂苷对肠道微生态免疫相关作用研究进展[J].中华中医药杂志，2017，32（08）：3606-3609.
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