结核性淋巴结炎的“结节病”样变型
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【中图分类号】R522.02【文献标识码】B【文章编号】1005-2720-(2010)04-0157-01【摘要】目的:对12例经专家会诊认定的淋巴结“结节病”石蜡包埋组织,应用结合杆菌DNA特异性序列片段的聚合酶链反应(M.TB-PCR)技术、BCG免疫组化(BCG-IHC)技术和抗酸染色(AF)进行分支杆菌/结核杆菌检测。结果:1 2例病例中:一例呈BCG-IHC和M.TB-PCR两项阳性;另一例呈AF、BCG-IHCH和M.TB-PCR三项阳性。提示①某些结核性淋巴结炎可呈结节病样病变;②淋巴结结节病可能与分支杆菌/结核杆菌感染有关。
【关键词】淋巴结;结核;结节病;免疫组化在淋巴结病理诊断工作中,经常会遇到无干酪样坏死的增殖型结核病与结节病的鉴别问题。结节病与分支杆菌/结核杆菌感染的关系早有推测,但无定论。因此,我们对根据HE染色切片诊断为淋巴结“结节病”的组织进行石蜡包埋,应用结核杆菌DNA特异性序列片段的聚合酶链反应技术、BCG免疫组化技术和抗酸染色进行了分支杆菌/结核杆菌检测。
1材料和方法
1.1按结节病的病理组织学诊断标准,选择了我科2000年至2008年间的12例人淋巴结HE切片,经专家会诊确认为结节病的组织,应用以下三种方法检测了这12例淋巴结病变中是否存在分支杆菌/结核杆菌。
1.2分支杆菌的抗酸染色(AF)检测:12例呈现“结节病”病变的人淋巴结石蜡包埋组织(实验组),已知感染了结核杆菌的石蜡包埋组织(阳性对照组,其中5例为人结核性淋巴结炎、1例为大鼠实验性感染的肺)和7例已知未感染分支杆菌/结核杆菌的石蜡包埋组织(阴性对照组,其中6例为成年大鼠胸腺,2例为成人淋巴结内的转移性腺癌),均被制成5um厚的切片,用改良的Kinyuan法行抗酸染色。在1000倍油镜下观察:将在蓝色背景中长3um左右、红染而不折光、纤细而微弯的杆状物确定为分支杆菌,将红染不折光的点状物视为可疑分支杆菌。
1.3分支杆菌卡介苗(BCG)抗原免疫组化(BCG-IHC)检测:实验组和阴性对照组的检测标本皆与抗酸染色者相同,另设染色时不加BCG抗体的空白对照组。各例5um厚的石蜡切片均行ABC法染色,以DAB显色。一抗为兔抗体BCG抗体(1∶200),二抗为羊抗兔IgG抗体(1∶100),三抗为ABC复合物(1∶100)。所用试剂均为DAKO公司产品。
1.4结核杆菌DNA特异性序列片段的聚合酶反应(M.TB-PCR):①实验组:与抗酸染色者相同。②阳性对照组:3例人结核性淋巴结炎的石蜡包埋组织。BCG(成都生物制品研究所产品)的1∶2000稀释液5ul。③阴性对照组:1例非结核病的大鼠胸腺石蜡包埋组织。④空白对照组:双蒸水10ul。用于扩增的PCR试剂盒为华美公司产品。结核杆菌PCR检测阳性结果的判断:PCR扩增产物电泳带定位于标准参照物123bp带水平处;该电泳带处的扩增产物经酶切后再电泳,显示为定位于123bp参照带之前的两条小片段。
2结果
在12例考虑为结节病的病例中,有一例呈现BCG-IHC阳性和M.TB-PCR阳性;另有一例呈现AF阳性、BCG-IHC阳性和M.TB-PCR阳性。检出率为1 6.7%(2/12例)。
3讨论
以PCR技术、BCG免疫组化技术结合抗酸染色,对12例考虑结节病的淋巴结石蜡包埋组织进行分支杆菌/结核杆菌检测,其中的各别病例呈现了阳性结果。从病理组织学变化上被一致确认为结节病的5例中,有一例呈现BCG-IHC阳性和M.TB-PCR阳性;该例为35岁女性,左颈部淋巴结肿大,X线显示纵隔结节状阴影。从病理组织学变化上被考虑为结节病的7例中,也有一例呈现AF阳性、BCG-IHC阳性和M.TB-IHC阳性;该例为27岁女性,除颈部淋巴结肿大外无明显症状。该两例的病原学检测结果表明,淋巴结病变皆与结核杆菌感染有关。显然该两例结核性淋巴结炎呈现了结节病样的病变。据此,推测这应是淋巴结增生型结核病的一种变型病变,有的结核性淋巴结炎可以呈现结节病样病变。因此,对于淋巴结的这种结节病样病变宜行分支杆菌/结核杆菌检测,以明确其是否为结节病。若该两例的淋巴结病变诊断为结节病,则提示:有的淋巴结结节病很可能与结核杆菌感染有关。结节病的病因未明,关于结节病与分支杆菌/结核杆菌的关系早有争论。近年来又有文献报道:用PCR和DNA探针杂交方法,在结节病患者的肺、纵隔淋巴结及脾脏的病灶中,均检出结核杆菌DNA特异性序列片段。这些资料和本文的实验结果都提示,分支杆菌/结核杆菌在结节病的发生上具有一定的病因学意义。也有学者对该问题持不同意见。因此,结节病与结核杆菌感染关系的问题值得进一步探讨。
参考文献
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作者单位:726000陕西省商洛市中心医院病理科
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