测量富硒花生中硒蛋白含量的研究

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　　摘要：硒是人体必需的微量元素Z一，花生是我国重要的油料作物，被称作“长寿果”，富硒效果好。本文以黑花生作为研究对象，通过叶面喷硒对黑花生籽粒中的不同形态的硒进行分析以及蛋白硒含量的测定，利用考马斯亮蓝法微波消解一氢化物发生一原子荧光光谱法分别测定样品中蛋白硒、总硒的含量。
　　一、硒及其生物效应
　　硒是生态环境中的重要微量元素，1973年，世界卫生组织宣布“硒是人体必需的微量元素之一”。我国食品营养学会提出成人补硒标准是每天摄入50-200μg，然而我国六成以上的人口出现不同程度的微量元素摄入不足的现象，特别是硒摄入量不足，这是由于我国大部分地区土壤等环境中的硒含量不足，导致人们主要摄入硒的方式（富硒植物的食用）存在缺陷。
　　由于无机硒对人体的作用不大且会对人体造成毒害作用，所以我们常采用土壤基施硒或农作物叶面喷硒，使无机硒转化为有机硒供人体吸收利用。
　　二、富硒花生的国内外研究进展
　　花生是我国重要的油料作物和经济作物，被民间被誉为“长生果”，可种植区域大且产量高，备受人们喜爱。与一般的粮食作物相比，花生的生物功能性更高，特别是其营养价值，花生含有大量的蛋白质和脂肪，对于降低人体的胆固醇有很大效用，可以延缓衰老、预防过早衰老。使用花生作为富硒载体是可行的，这不仅是因为其分布广、产量大，更重要的是花生可以将七成以上的无机硒转化为有机硒。花生对于环境的适应能力强，對硒元素的富集能力也很强，并且有利于大范围推广，开发前景很好。根据李娟等人研究，硒在花生籽粒中的主要存在形式是蛋白质结合硒，脂肪态结合硒含量较少。
　　三、硒的分析检测技术
　　总硒含量的测定。为了确定样品中的硒含量，必须选择合适的预处理方法，以保证样品中硒含量的准确性、严谨性。样品的消化过程是预处理步骤，也是测定无机硒的必要环节，在样品消化过程中，样品中的无机硒必须全部转化为可用于测定的形式，而且不能造成硒的损耗。对植物中硒含量的测定，最常用的消化方法是湿法消化法。作为目前较广泛的元素消解方法，微波消解法是利用微波将温度提升到一定程度，将密闭中的样品进行消解，其操作简单且能够同时控制温度和压力。
　　目前痕量元素硒的测定方法主要有光学分析法、电化学分析法、色谱法以及其他的联用技术。光学分析法主要包括分光光度法、原子荧光光谱法（AFS）和原子吸收光谱法（AAS）;电化学分析法主要包括电位滴定法和极谱法等;色谱法主要包括高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱法（GC）;目前各种联用技术日益受到人们的重视和关注，如电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）。
　　四、可溶性蛋白质的测定方法
　　考马斯亮蓝染料G250在酸性溶液中，主要是与蛋白质中的碱性氨基酸以及芳香族氨基酸的残基，通过疏水力来结合，从而让染料的最大吸收峰（lmax）由波长465 nm提高到波长595 nm，溶液的颜色从棕红色变为蓝色。在一定蛋白质浓度范围内（1 - 1000μg/mL），溶液在波长595 nm处的吸光度与蛋白质浓度会呈线性相关的关系。考马斯亮蓝在游离状态下呈现红色，而当其与蛋白质结合的时候就会呈现出蓝色，颜色深浅与蛋白质的含量成正比。使用考马斯亮蓝法测量水溶液中的蛋白质含量，灵敏度高、操作简便、效果明显。
　　五、富硒花生的研究意义
　　人体每天都需要摄入硒，以维持体内机制的正常运转，有效的抗癌、免疫系统免疫能力的提升、解毒排毒、防止心脑血管疾病等都要求体内保持适量的硒。人类的主要摄硒方式是通过植物获得，而植物大体上经过两种途径吸收硒，一是通过叶面吸收，二是通过土壤吸收，然而我国绝大部分地区属于贫硒地带，无法从环境中获得适量的硒。因此，富硒产品的开发有着非常重要的意义。
　　花生的产品形态多样，如花生油、花生粒、生花生以及可用作牲畜饲料的花生秧，有利于硒通过多种途径进入人体，有效地提高硒的利用率，这对于一个贫硒国家来说具有重大意义。
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