蜗牛药材质量标准提升研究

作者:未知

  【摘要】目的:建立鉴别、检查、含量测定方法,完善蜗牛质量控制方法。方法:参照2015年版《中华人民共和国药典》附录相关方法进行鉴别检查及对重金属酸不溶性限度;采用乙二胺四醋酸二钠配位滴定法对其碳酸钙(CaCO3)的含量进行测定。结果:碳酸钙回归方程为y=197.53x+0.4664,r=0.9999,表明碳酸钙的取样量在0.1~0.2g范围内,与乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)的消耗体积具有良好的线性关系。平均回收率为100.51%,RSD为0.20%(n=9)。测定结果为7批蜗牛碳酸钙的平均百分含量为92.07%,总灰分为96.73%,酸不溶灰分为7.51%。结论:该实验所采用的测定方法结果准确、可靠,可用于样品测定,可用于蜗牛的质量控制。
  【关键词】蜗牛;鉴别;检查;含量测定;配位滴定法
  【中图分类号】R282【文献标志码】A【文章编号】1007-8517(2019)1-0039-06
  Abstract:ObjectiveToestablishanidentification,inspectionandcontentdeterminationmethodandimprovethequalitycontrolmethodofsnails.MethodsThecontentofcalciumcarbonate(CaCO3)wasdeterminedbycoordinationtitrationwithEDTA.GeneralinspectionandinsolublelimitofheavymetalacidwasdeterminedbyChinesePharmacopoeia2015edition.ResultsTheregressionequationofcalciumcarbonateisy=197.53x+0.4664,r=0.9999,whichindicatesthatthesampledamountofcalciumcarbonateisintherangeof0.1~0.2g,andthedisodiumedetate(0.05mol/L)Theconsumptionvolumehasagoodlinearrelationship.Theaveragerecoverywas100.51%,RSD=0.20%(n=9).Theresultsshowedthattheaveragepercentageofcalciumcarbonatein7batchesofsnailswas92.07%,thetotalashcontentwas96.73%,andtheacidinsolubleashcontentwas7.51%.ConclusionTheresultsoftheassayusedinthisexperimentareaccurateandreliable.heycanbeusedforsampledeterminationandcanbeusedforqualitycontrolofsnails.
  Keywords:Snial;Identification;Inspection;ContentDetermination;CoordinationTitration
  蝸牛为巴蜗牛科动物同型巴蜗牛BradybaenasimiLarisFerussac的贝壳。夏、秋二季捕捉,置沸水中略煮,去肉,洗净,晒干。蜗牛,蒙古文名音译“布热-好日海”[1],别名音译“东日阿”。《无误蒙药鉴》记:“‘东日阿’…《晶鬘》中云:‘从状如盾、扁而旋绕的壳中出,硬壳驮于背后。尿液中炮制用。”《医典》中云:‘蜗牛杀虫,利水肿’”[2]。蒙古文别名“东日阿”意译为像似海螺,系前人依据动物形状命名。性咸、凉,味甘。具有消水肿,利尿,杀虫,清瘟疫功效。用于水肿,肾热,膀胱热,尿闭,尿路结石,协日疫,黄水疮,肠寄生虫。本品1986年载入《内蒙古蒙药材标准》[1],该标准仅就其【性状】做了规定外,缺少其它有效的质量控制方法及指标。通过实验研究,为蜗牛建立稳定、可靠、准确的检查、含量测定方法,填补该药材质量标准项下空白项。合理控制质量,保证其用药安全及疗效提供可靠的依据。
  1实验材料
  1.1药材蜗牛来源:X1(批号:160626,河北安国);X2(批号:20161106,山东);X3(批号:170101,广西);X4(批号:170102,安徽);X5(批号:20170208,山东);X6(批号:20170307,河北保定);X7(批号:20170219,湖南),经鉴定为同型巴蜗BradybaenasimiLarisFerussac的贝壳。见图1。
  1.2仪器滴定管(50mL),磁力搅拌器,BS224S型电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司),T-1200N型马弗炉(郑州天纵),DL-1型电炉(北京市永光明医疗仪器有限公司)。
  1.3试药乙二胺四醋酸二钠;碳酸钙;盐酸;氢氧化钾;氨溶液;氯化铵以上均为分析纯;基准氧化锌;甲基红;钙黄绿素;铬黑T。
  2方法与结果
  2.1鉴别本品属动物壳类药材,主含碳酸钙。故照《中国药典》2015年版四部(通则0301)[3]相关方法对其进行了一般鉴别试验。
  2.1.1钙盐鉴别取铂丝用盐酸湿润后,蘸取供试品,在无色火焰中燃烧,火焰即显砖红色。结果见图2,7批药材钙盐的火焰鉴别反应,均呈阳性。
  2.1.2沉淀鉴别取本品粉末0.5g,加稀盐酸5mL,即产生大量气泡,滤过,滤液加甲基红指示液2滴,用氨试液中和,再滴加盐酸至恰呈酸性,加草酸铵试液,即生成白色沉淀;分离,沉淀不溶于醋酸,但可溶于稀盐酸。结果见图3~7。7批药材钙盐的沉淀鉴别反应,均呈阳性。   2.1.3碳酸盐鉴别取本品粉末0.5g,加稀盐酸5mL即泡沸,产生二氧化碳气体,导入氢氧化钙试液5mL中,即生成白色沉淀。结果见图8,7批药材的碳酸盐鉴别反应,均呈阳性。
  2.2灰分检查照《中国药典》2015年版四部(通则2302)[3]灰分测定法,对7批样品的总灰分及酸不溶性灰分进行了考察测定。
  2.2.1总灰分测定取供试品2g,置炽灼至恒重的坩埚中,称定重量(精准至0.01g),缓缓炽热,至完全碳化时,逐渐升高温度至500~600℃,使完全灰化并至恒重。根据残渣重量,计算供试品总灰分的含量(%)。结果见表3。本品含碳酸钙达90%以上,此炽灼条件下不分解,故测定结果减失重量均较少。该项检查不收入标准草案正文。
  2.2.2酸不溶性灰分测定取上项所得的灰分,在坩埚中小心加入稀盐酸約20mL、用表面皿覆盖坩埚,置水浴上加热10min,表面皿用热水5mL冲洗,洗液并入坩埚中,用无灰滤纸滤过,坩埚内的残渣用水洗于滤纸上,并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。滤渣连同滤纸移同一坩埚中,干燥,炽灼至恒重。根据残渣重量,计算供试品酸不溶性灰分的含量(%)。注意避免燃烧。结果见表1。本品壳内易聚集泥沙,影响药材质量,故应控制其酸不溶性灰分。蜗牛酸不溶性灰分测定结果表明,7批样品中酸不溶性灰分平均值为7.51%,6批样品酸不溶性灰分均低于9.0%,测定值中仅有一例大于9.0%,故本品酸不溶性灰分不得过9.0%。
  2.3重金属照重金属检查法《中国药典》2015年版四部(通则0821第一法)[3]对本品进行了检查。
  2.3.1标准铅溶液的制备称取硝酸铅0.1599g,置1000mL量瓶中,加硝酸5mL与水50mL溶解后,用水稀释至刻度,摇匀,作为贮备液。精密量取贮备液10mL,置100mL量瓶中加水稀释至刻度,摇匀,即得(每1mL相当于10μg的Pb)。本液现用现配。
  2.3.2供试品溶液的制备取本品0.50g,2份,分别置25mL纳氏比色管中,一份(乙管)加水5mL,混合均匀,加稀盐酸4mL,煮沸5min,放冷,滤过,滤器用少量水洗涤,合并洗液与滤液,加酚酞指示液1滴,并滴加适量的氨试液至溶液显淡红色,加稀醋酸2mL与水制成25mL,加维生素C0.5g,溶解后既得;另一份(丙管)加水5mL,混合均匀,加稀盐酸4mL,煮沸5min,放冷,滤过,滤器用少量水洗涤,合并洗液与滤液,加酚酞指示液1滴,并滴加适量的氨试液至溶液显淡红色,加稀醋酸2mL,标准铅溶液2.00mL(20ug)与醋酸盐缓冲液(pH3.5)2mL后,加水制成25mL,加维生素C0.5g,溶解后既得。
  2.3.3检查方法取25mL纳氏比色管一支(甲管),加标准铅溶液2mL与醋酸盐缓冲液(pH3.5)2mL后,加水稀释成25mL,加维生素C0.5g。作为对照品溶液。取甲管对照品溶液与供试品溶液乙管,丙管,分别加硫代乙酰胺试液各2mL,摇匀,放置2min,照《中国药典》2015年版四部(通则0821第一法)[4]依法操作,比较检查,结果见表2。7批供试品溶液的颜色都浅于10μg标准铅溶液的颜色,重金属含量均少于百万分之二十。本品重金属含量不过20mg/kg。
  2.4含量测定
  2.4.1滴定液的制备取乙二胺四醋酸二钠19g,加适量的水使溶解成1000mL,摇匀。取于约800℃灼烧至恒重的基准氧化锌0.1220g,精密称定,加稀盐酸3mL使溶解,加水25mL,加0.025%甲基红的乙醇溶液1滴,滴加氨试液至溶液显微黄色,加水25mL与氨-氯化铵缓冲液(pH10.0)10mL,再加铬黑T指示剂少量,用本液滴定至溶液由紫色变为纯蓝色,并将滴定的结果用空白试验校正(空白消耗量为0.05mL)。每1mL乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05moL/L)相当于4.069mg的氧化锌。根据本液的消耗量与氧化锌的取用量,算出本液的浓度,即得。本试验用乙二胺四醋酸二钠滴定液的浓度为0.0501moL/L。其校正因子F为1.002。
  2.4.2测定方法取本品细粉约0.15g,精密称定,置锥形瓶中,加稀盐酸10mL,加热使溶解,加水20mL与甲基红指示液1滴,滴加10%氢氧化钾溶液至溶液显黄色,继续多加10mL,加钙黄绿素指示剂少量,用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05moL/L)滴定至溶液黄绿色荧光消失而显橙色。每1mL乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05moL/L)相当于5.004mg的碳酸钙(CaCO3)。
  2.4.3线性与范围取碳酸钙0.100g、0.125g、0.150g、0.175g、0.200g,精密称定,分别置锥形瓶中,照“2.4.2测定方法”项下方法,自“加稀盐酸10mL”起依法操作,以样品量(x)对乙二胺四醋酸二钠滴定液(EDTA0.05moL/L)的消耗体积(y)进行线性回归,得标准曲线回归方程为:y=197.53x+0.4664,相关系数r=0.9999。表明碳酸钙的取样量在0.1~0.2g范围内,与乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05moL/L)的消耗体积具有良好的线性关系。
  2.4.4精密度试验取碳酸钙0.15g,精密称定,置锥形瓶中,照“2.4.2测定方法”项下方法,自“加稀盐酸10mL”起依法操作,连续测定6次,并计算含碳酸钙测得率。碳酸钙的测得率为100.92%,RSD为0.18%。结果表明该试验精密度良好。
  2.4.5稳定性试验精密称取样品X4(批号170102)0.15g,照“2.4.2测定方法”分别于0h、2h、4h、8h、12h、24h时间段依法测定,其结果平均含量为91.36%、RSD为0.21%。表明该方法稳定性良好。   2.4.6重复性试验称取样品X4(安徽,批号170102)0.15g,6份,精密称定,分别照“2.4.2测定方法”依法测定,其结果重复性良好,平均含量为92.22%、RSD为0.16%。
  2.4.7回收率试验取已知含量的样品X4(安徽,批号170102)0.075g,9份,精密称定,各置錐形瓶中,分三组按标准品加入量-样品中含量0.5∶1、1∶1、1.5∶1的要求分别依次精密加入碳酸钙,照“2.4.2测定方法”项下方法,自“加稀盐酸10mL”起依法操作,平行测定3次,其CaCO3的总平均回收率为100.51%、RSD为0.20%。结果见表3。
  2.4.8样品测定取蜗牛样品细粉0.15g,精密称定,各置锥形瓶中,照“2.4.2测定方法”,自“加稀盐酸10mL”起依法操作,测定并计算含量。蜗牛平均含量为92.07%,RSD为0.31%。结果见表4。
  3讨论
  蜗牛主含碳酸钙,所以参照《中国药典》2015年版一部载石决明【含量测定】项下方法,研究建立了采用乙二胺四醋酸二钠配位滴定法对其碳酸钙(CaCO3)含量进行测定的方法。
  蜗牛7批样品碳酸钙的平均含量约为92.07%,其含量范围为91.69%~92.45%,各批间含量较接近(RSD=0.31%)。故取其下限,暂定蜗牛含碳酸钙(CaCO3)不得少于90.0%。
  制蜗牛7批样品碳酸钙的平均含量约为95.44%,其含量范围为95.04%~95.84%。各批间含量较接近(RSD=0.40%)。故取其下限,暂定制蜗牛含碳酸钙(CaCO3)不得少于94.0%。
  参考文献
  [1]内蒙古自治区卫生厅.内蒙古蒙药材标准[S].赤峰:内蒙古科学技术出版社,1986:506.
  [2]占布拉道尔吉.无误蒙药鉴[M].呼和浩特:内蒙古人民出版社,1988:366.
  [3]国家药典委员会.中华人民共和国药典(四部)[S].北京:中国医药科技出版社,2015:137.
  [4]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准(蒙药分册)[S].北京:人民卫生出版社,1998.
  (收稿日期:2018-10-31编辑:刘斌)
转载注明来源:https://www.xzbu.com/1/view-14868746.htm

服务推荐