矾根‘葡萄苏打’的组织培养快繁技术研究
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摘要:以矶根‘葡萄苏打’带有腋芽的茎段为外植体,研究了不同处理条件下的植株再生,试验结果表明,不定芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 0.4mg/L+NAA0.05mg/L,最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.3mg/L,生根率达98%。生根苗经过适应性锻炼移栽,可在太原市园林绿化中推广应用。
关键词:矶根;‘葡萄苏打’;组织培养;快繁
矾根(Heuchera micrantha)为虎耳草科矶根属植物,原产美洲中部,为多年生耐寒性草本,叶基生,品种繁多,各品种叶色不同,喜温凉,厌炎热,是少有的彩叶阴生地被植物[1]。在冬季温暖地区,叶子四季不凋,覆盖力强,花叶兼美,适合做花镜、花坛、地被材料或庭院绿化材料[2]。彩叶植物因其色彩富于变化,彩叶期长,观赏价值较高,能够豐富景观色彩,烘托园林气氛,弥补园林绿化中淡花期色彩单调的问题,所以彩叶植物在城市绿化建设中发挥着越来越重要的作用,并日益受到园林工作者的喜爱[3]。矾根因品种不同,有种子繁殖的,但种子发芽慢且不整齐;有分株繁殖的,但无法获得大量矾根苗满足市场需求[4]。通过植物组织培养技术对矾根‘葡萄苏打’进行了快速繁殖,为规模化生产提供依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试验于2017~1018年在太原植物园进行,供试材料为矾根‘葡萄苏打’。4月初取带腋芽的幼嫩茎段作为外植体。
1.2 试验方法
1.2.1 无菌外植体的获得。在盆栽的矾根‘葡萄苏打’上剪取带腋芽的茎段,用洗衣粉浸泡10min,并在流水下冲洗1h,在超净工作台上用滤纸吸干茎段上的水分,75%酒精消毒20s,0.1%的氯化汞溶液洗涤1-3min,无菌水冲洗5-6次,无菌滤纸吸干茎段表面水分,接种到初代培养基上进行培养。
1.2.2 培养基和培养条件。基本培养基:MS培养基,均加蔗糖30g/L,琼脂6g/L,pH值5.8~6.2。培养条件:温度控制在25±2℃,光照时间为12h/d,光照强度为2000Lx。
1.2.3 诱导培养基的筛选。以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA 0.1~1mq/L和NAA 0.01~0.05mq/L的芽诱导培养基上,观察生长和诱导情况,确定最适合矾根‘葡萄苏打’的初始培养基。
1.2.4 增殖培养基的筛选。在诱导芽的初代培养基上,通过调节植物激素6-BA与NAA的浓度,筛选最佳增殖培养基,25d为1个继代周期。
1.2.5 生根培养基的筛选。基本培养基为1/2MS,琼脂6g/L,蔗糖15g/L,添加不同浓度的NAA,观察矶根‘葡萄苏打’试管苗生根的情况,30d后统计生根率。
1.2.6 炼苗移栽。生根的试管苗具有5条以上的正常根即可进行移栽。先在炼苗室放置3d,然后在温室打开瓶盖炼苗2d,以培养基不染菌为宜。用镊子取出组培苗,将其基部的培养基洗干净,移入珍珠岩:泥炭土=1:1的穴盘中,放入小拱棚,移栽7d内进行50%~70%遮荫,保证温度在25℃左右,湿度在85%左右。
2 结果与分析
2.1 无菌苗的获得
矾根作为一种多年生草本植物茎段比较嫩,不同消毒时间对矶根试管苗培养有一定的影响。在试验过程中发现氯化汞消毒时间为1min时,外植体不会受到损伤,但污染严重,污染率达90%。当消毒时间为3min时,外植体的污染率较低,但外植体受损严重,在培养过程中出现褐化等现象,大多数外植体死亡,导致试管苗的获得率降低。试验表明矾根‘葡萄苏打’用75%9精20s,0.1%的氯化汞消毒2min效果最佳,污染率达30%。
2.2 外源激素对矾根‘葡萄苏打’初期诱导的影响
矾根‘葡萄苏打’腋芽在MS+6-BA 1.0mg/L+NAA0.1mg/L培养基上20d左右均可产生愈伤组织,30d诱导出大量不定芽,芽嫩,芽高整齐,丛状,诱导率可达100%。
2.3 增殖培养基的筛选
选取粗壮且长势相同的矶根‘葡萄苏打’诱导苗接种到增殖培养基中继代培养。随着继代次数的增加,丛生芽会出现玻璃化现象,降低激素使用浓度,减少玻璃化程度,在MS+6-BA 0.4mg/L+NAA 0.05mg/L培养基中,芽玻璃化现象较低,芽增殖率最高,可达82%,有效芽较多,且生长周期短。
2.4 生根及试管苗移栽成活情况
选取高度2cm的壮苗接种于1/2MS+NAA0.3mg/L的生根培养基上,30d后苗生根率为98%,根长2~3cm,生根5~8条,苗高4~6cm。经炼苗移栽,成活率可达100%,经过大田栽植能够安全越冬。
3 小结
该研究发现矾根‘葡萄苏打’在MS+6-BA0.4mg/L+NAA 0.05mg/L培养基中增殖率能够达到最高,分化出的苗可直接转人1/2MS+NAA 0.3mg/L生根培养基中进行生根,且生根效果较好,每个外植体能够生根5条以上,这样可以缩短培养周期,降低生产成本,满足工厂化生产的需求。生根苗经锻炼5d后移栽到珍珠岩:泥炭土=1:1的基质中,成活率可达98%以上。(收稿:2019-07-30)
参考文献:
[1]高燕,宋垚,等.矾根欧布西迪昂组培快繁技术[J].浙江农业科学,2015,56(06):895-898.
[2]张德祥,张君艳.新优观叶花卉矾根的栽培管理技术[J].林业实用技术,2014(04):62-63.
[3]袁丽丽,王瑞.新优彩叶植物引种栽培及其园林应用[J].黑龙江农业科学,2016(10):95-97.
[4]陈宏,唐莹,等.矾根的组织培养与快速繁殖[J].上海农业学报,2011,27(04):80-82.
作者简介:赵玉琳(1989-),女,山西灵石人,助理工程师,主要从事园林绿化研究。
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