野生达氏鳇人工繁殖要点

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　　摘 要：本文就野生达氏鳇人工繁殖中所涉及到的亲鱼暂养、运输、鉴选、催产、人工授精和受精卵的孵化等各个重要技术环节进行了详细阐述，从而为野生达氏鳇的人工繁育和增殖放流提供可靠的技术支撑。
　　关键词：达氏鳇;野生亲鱼;人工繁殖;增殖放流
　　达氏鳇（Huso dauricus），又称鳇鱼、黑龙江鳇鱼。属于硬骨鱼纲（Osteichthyes）、鲟形目（Acipenseriformes）、鲟科（Acipenseridae）、鳇属（Huso），是世界仅存的两种鳇鱼中的一种。在我国主要分布在黑龙江干流，在松花江、乌苏里江及兴凯湖也有少量栖息。因达氏鳇个体大，有记载的最大体重可达1000kg，性成熟晚，雌鱼初次性成熟年龄为16～20A。世代周期长，群体结构复杂，自然增殖速度缓慢。其资源一旦遭到破坏就很难恢复。近年来，达氏鳇自然资源状况总体说种群数量越来越少，起捕规格越来越小，产量越来越低。现在我国捕捞产量最高的是黑龙江的抚远江段，其次是绥滨和同江江段，其它江段，如上游的呼玛江段、黑河江段及中游的萝北和嘉荫江段产量很低，已不能形成经济产量。1977年在津巴布韦召开国际濒危动植物种贸易公约（CTTES）大会，将鲟鱼所有物种列入保护物种，我国已将达氏鳇列入《中国濒危动物红皮书》。为保护及恢复这一濒临灭绝的自然资源，从上世纪80年代开始，黑龙江省每年在黑龙江干流的逊克、萝北、同江、抚远等江段开展了颇具规模的鲟、鳇苗种放流活动，达氏鳇占有一定比例，放流苗种均为自然野生种的F1代。黑龙江省水生动物资源养护中心的技术人员，每年在达氏鳇的繁殖季节开展人工繁殖工作。文章就野生达氏鳇人工繁殖要点进行了具体阐述。
　　1 亲鱼来源
　　人工繁殖所需达氏鳇亲鱼全部采捕于黑龙江中游干流的抚远和同江江段。达氏鳇和大多数鱼类一样，在春季产卵，五月上旬就开始有亲鱼游向产卵场，5月中下旬繁殖群体变多，6月初开始产卵，6～7月份是繁殖盛期。产卵水温在15℃～19℃之间。亲鱼捕获后，应马上用活鱼车运输到催产车间，雌鱼需立即催产，雄鱼可进行短时间暂养。如亲鱼不能马上运走，可把亲鱼放到江边的深水区暂养，或放到低温水池中暂养，然后再运回车间。为防止亲鱼退化，禁止长时间离水操作，或长时间暂养于水温较高的浅水区。
　　2 亲鱼选择
　　达氏鳇亲鱼因个体大，捕捞操作时鱼体容易受伤，繁殖期间不停食，有时从外观上难于区别雌雄，加之洄游群体发育成熟度不同，因此要对捕获的亲鱼进行严格的鉴选，才能确保人工繁殖的顺利进行。
　　2.1 捕捞时间
　　每年5月初就可捕获达氏鳇亲鱼，但早期的洄游个体大多成熟度不够，直接进行人工催产成功率很低，如果进行长时间的暂养，又会因鱼体受伤及暂养环境和江里自然环境相差太大，容易引起亲鱼退化，导致催产失败。因此，根据自然状态下野生达氏鳇的繁殖特点，为确保人工繁殖的顺利进行，宜选择洄游后期的繁殖群体，即5月下旬至6月初的亲鱼。此时的亲鱼成熟度已达到催产要求，用于人工繁殖可极大地提高催产的成功率。
　　2.2 亲鱼规格
　　达氏鳇是世界上最大个体的淡水鱼类之一。现在黑龙江流域捕捞的成熟个体多数在60～250kg之间，选择用作人工繁殖亲鱼宜小不宜大，最好不超过100kg。个体太大，捕捞时多受伤严重，不易顺产，操作也困难，产后存活率低。相反，小个体的亲鱼一般身体无伤，或受伤较轻，操作方便，催产容易成功，产后容易存活。
　　2.3 雌雄鉴别
　　成熟的达氏鳇雌鱼，腹部饱满膨胀、柔软、富有弹性、腹皮薄，生殖孔红肿外凸。雄鱼腹部较瘦，呈轻微的凹槽状。成熟好的雄鱼个体，轻压腹部，生殖孔有淡白色的精液流出。但因达氏鳇在生殖洄游时不停食，有时刚刚捕捞个体腹内充满食物，从外观上很难辨别雌雄和雌鱼怀卵量的高低及鱼卵成熟情况，因此为确保准确无误，可以通过腹侧穿刺法用取卵器取出性腺来鉴别雌雄和雌鱼的成熟度。所选的雌鱼必须无伤或轻伤，性腺发育到Ⅳ期中以上，卵粒大小均匀、形状规则、色素圈明显、极斑明亮，这样的亲鱼方可用于人工催产。雄鱼要求能取出乳白的精巢为准。
　　3 人工催产
　　3.1 催产条件
　　催产池以圆形或八角池为佳。因达氏鳇个体大，催产池面积宜大不宜小。圆形池一般要求直径5～6m，八角池25㎡以上，注水深度60cm～80cm。水温控制在15℃～18℃之间。亲鱼入池以后要经常加注新水，确保水质清新，同时池水要施以一定的流速，以利于亲鱼顺利产出。
　　3.2 催产剂及注射
　　催產药物为LRH-A2和DOM合剂，雌鱼剂量为每kg鱼5～10ugLRH-A2+2～5mgDOM，雄鱼减半。催产药物用0.9%的生理盐水配制，胸鳍基部注射。雌鱼两针注射，第一针注射总量的10%～25%，第二针注射余量，两针间距12h左右。应注意每尾鱼配制注射的药量不能超过10mL。雄鱼一针注射，可以随雌鱼的第一针或第二针同时进行，每次催产要使用雄鱼两尾以上。
　　3.3 催产时机
　　捕获的雌鱼在运到催产车间后应马上进行催产，避免因暂养导致亲鱼退化，使亲鱼难产或不产，或者，即使全部产出，受精卵质量也会明显下降，从而影响以后的鱼苗培育和人工放流工作。雄鱼最好使用最新捕捞的个体，如果没有，短期暂养个体也可使用。
　　4 采卵和授精
　　4.1 精液采集
　　精液的采集在采卵之前进行，在雄鱼药物注射十余小时以后就可以进行精液采集。采集用挤压法或导管法，具体方法是先将鱼体抬出水面，用清洁的毛巾把鱼腹部和泄殖孔周围的水擦干，然后用力挤压雄鱼后腹两侧，精液即可流出到预先准备好的容器或保鲜袋内，或用导管插入雄鱼生殖孔中，将精液收集到保鲜袋中。镜检后，将优质的精液充上氧气，放入冰箱的冷藏室备用，保存期间温度控制在0℃～4℃。
　　4.2 活体取卵 　　在雌鱼第二次注射10h后，接近效应时间时，雌鱼反应激烈，顶流沿池壁不断游动，吻部经常露出水面，尾部不停扭动，用抄网在池中可以捞出游离的卵粒，仔细观察，随着鱼的游动，不停的有游离的卵粒从生殖孔成股流出，这时即可断定雌鱼卵已全部游离，可以进行采卵工作，从见到卵粒到取卵，因雌鱼卵游离快慢差别很大，快的只有40min，慢的要3h以上，因此要准确掌握采卵时机。采卵时要将雌鱼抬出催产池，固定到手术台上，鱼体太大的，要先进行麻醉，再固定到手术台上，用毛巾擦干雌鱼腹部和生殖孔，在手术开始前，先用手在雌鱼的腹部两侧由头部到尾部方向挤压，这时输卵管的卵就从生殖孔大量排出，反复几次操作，就将输卵管大部分的卵挤出，挤出的卵放入接卵盆内，待人工授精。接下来进行手术取卵，用手术刀在生殖孔前5cm～10cm左右于腹中线切开一个3cm～5cm的刀口，然后继续挤压雌鱼腹部两侧，开口处就会有大量的卵粒流出，反复挤压几次，当卵粒流出很少时，从开口处往鱼腹腔内加注生理盐水2L～4L，堵住生殖孔和刀口，来回晃动鱼腹两侧几次，使腹腔和卵巢中的卵粒和生理盐水混合到一起，然后继续如前挤卵操作，连续冲洗3～4次，把雌鱼腹腔内剩余的部分卵粒挤净，之后马上进行刀口缝合。整个采卵过程要动作精准，操作迅速，力度适中，不能用力过猛，防止鱼体受伤。为防止亲鱼缺氧，手术中要有专人不停往亲鱼鳃上淋洒池水，直到手术结束。
　　4.3 人工授精和脱粘
　　人工授精有干法和半干法和湿法三种，生产上常使用干法授精，授精时首先要将盛卵盆内体腔液和生理盐水倒掉，以免影响受精，之后按每kg鱼卵用10ml的精液的比例，将经过镜检的质佳精液直接倒入鱼卵中，用手或羽毛快速均匀搅拌，使卵和精液充分接触，然后加入少量清水激活精子，继续搅拌时间1min左右，使精卵充分结合，再用清水冲洗受精卵2～3次，除去过量的精液和卵皮，将卵洗净后加入20%的滑石粉溶液进行脱粘，脱粘时一直用手搅动受精卵，防止受精卵沉入盆底和相互粘连，时间经45～50min.，当全部卵粒呈分散状，静止不在结块后，即可放到孵化设备中孵化，整个过程要避免阳光直射。
　　5 人工孵化
　　用尤先科孵化器和麦氏孵化瓶进行流水孵化，规格为380cm×65cm×30cm的尤先科孵化器，有四个盛卵箱，一次可孵化受精卵40万粒;麦氏孵化瓶，每瓶可装受精卵2～3万粒。孵化过程中要保持水质清新，有条件的最好使用一次性用水，采用循环用水的，要时刻关注水质变化，定期加注新水，每次换掉部分或大部分老水，发现水质下降，应马上换水。换水不勤可导致水质下降，严重的会使受精卵第一层膜提前脱落，如不再及时换水，会使孵化水质快速恶化，导致受精卵发育异常，孵化率下降。孵化期间要确保水温稳定，水温稳定在15℃～20℃之内，避免水温剧烈变动，尤其是加注新水和换水时，前后温差不能过大。每天早晚定时测定水温，计算平均水温和积温。整个孵化期间要避免阳光直射，孵化器上要有遮光设施，孵化期间要有专人值班，随时检查孵化设备的运行情况，发现问题及时解决。孵化过程中及时检出死卵，及时采取消毒措施，防止水霉滋生。
　　孵化期和水温有关，水温低时孵化期长，水温高，孵化期短。在15℃～20℃的水温条件下，受精卵经4～6d孵出仔鱼，出膜持续时间可达1d～2d，出苗后应及时将水花放到准备好的玻璃钢盆中进行暂养。
　　6 亲鱼的产后护理
　　亲鱼手术缝合以后，在亲鱼入池以前，要给亲鱼注射适量的抗生素，并用紫药涂抹鱼体擦伤部位和缝合处，暂放时间2～3min.后，再将亲鱼放入亲鱼恢复池中。亲鱼入池后，要给以一定的流水刺激，使术后及麻醉缺氧的亲鱼快速恢复，亲鱼游动正常后，可减小水流速度，降低鱼体消耗。在手术的第2d开始，每天检查亲鱼输卵管内是否堵有残存卵粒，发现残卵必须挤出，直到没有为止。如果输卵管被堵塞住，亲鱼就无法将体内未排净的卵粒排到体外，如不予以人工挤出，这些残存在体内的卵粒很快就会腐烂变质，引起亲鱼感染，最后导致死亡，因此，术后定期检查，挤出残留卵粒，是亲鱼术后护理最重要的环节之一。在整个产后护理阶段，一定要保持池水水质清洁，溶氧充足。亲鱼在术后入池后，每天最少换水两次，每次尽量换净老水，排掉污物，水源以低温的深井水为好，低温可减少鱼的活动和代谢，利于鱼体恢复和伤口愈合。护理期间每7d给亲鱼注射抗生素一次，同时检查亲鱼刀口愈合情况，如发现缝合处开线，应重新缝合。亲鱼护理阶段，要保持环境安静，野生亲鱼在短期内难以适应人工环境，不摄食人工投喂的饵料，因此不需投喂。当鱼体刀口愈合后，就可以将达氏鳇亲鱼重新放归到黑龙江或放到亲鱼培育池中进行饲养。
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　　（责任编辑：常 顺）
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