秀珍菇母种优质培养基配方筛选
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摘要 为了筛选出秀珍菇母种优质培养基配方,以马铃薯、胡萝卜、大豆、芋头、麸皮、红薯等为主料,制作母种培养基,接入秀p-1号菌种,并存放入6 ℃恒温箱培养,进行母种培养基配方筛选试验。结果表明,效果最好的配方是马铃薯和麸皮为主料的混合配方,菌丝洁白,浓密,粗壮,萌发快,生长速度也快,生长旺盛,爬壁力强。
关键词 秀珍菇;母种培养基;配方筛选
中图分类号 S646.14 文献标识码 A
秀珍菇学名为环柄侧耳、白环柄侧耳。秀珍菇营养丰富,质地细嫩,味道鲜美,含纤维量少,被人们称为保健食品、安全食品。秀珍菇在市场上畅销不衰。目前,国内有相当的省(市、地区)已形成利用科技大棚栽培秀珍菇的生产规模,需要大量优质菌种,而优质菌种需要优质培养基配方,特别是优质母种培养基配方,以促进菌丝浓白、健壮和快速生长,提高菌种质量,缩短制种时间,对提高产量、质量起到重要作用[1-3]。因此,笔者开展了秀珍菇母种优质培养基配方筛选試验,为生产实践提供参考。
1 材料与方法
1.1 供试材料
1.1.1 供试菌株。秀p-1号,从广西农业科学院微生物研究所引进,经广西玉林市微生物研究所进行转管保存。
1.1.2 供试培养基。主料为马铃薯、大豆、红薯、芋头、胡萝卜、麸皮;辅料为葡萄糖、琼脂、磷酸二氢钾、硫酸镁。
1.2 试验设计
本试验共设计了7个母种培养基配方:①(常规配方,CK)马铃薯200 g,葡萄糖10 g,琼脂10 g,磷酸二氢钾2 g,硫酸镁1.5 g;②胡萝卜200 g,葡萄糖10 g,琼脂10 g,磷酸二氢钾2 g,硫酸镁1.5 g;③大豆100 g,胡萝卜100 g,葡萄糖10 g,琼脂10 g,磷酸二氢钾2 g,硫酸镁1.5 g;④芋头100 g,胡萝卜100 g,葡萄糖10 g,琼脂10 g,磷酸二氢钾2 g,硫酸镁1.5 g;⑤马铃薯100 g,麸皮100 g,葡萄糖10 g,琼脂10 g,磷酸二氢钾2 g,硫酸镁1.5 g;⑥大豆100 g,红薯100 g,葡萄糖10 g,琼脂10 g,磷酸二氢钾2 g,硫酸镁1.5 g;⑦红薯100 g,芋头100 g,葡萄糖10 g,琼脂10 g,磷酸二氢钾2 g,硫酸镁1.5 g。
1.3 试验方法
1.3.1 配制培养液。配方①将马铃薯用水洗净,去皮后取200 g,切片置于锅中加水1 000 mL,煮至马铃薯熟而不烂;配方②将胡萝卜用水洗净,去皮后取200 g,切片置于锅中加水1 000 mL,煮至胡萝卜熟而不烂;配方③先将大豆100 g用粉碎机粉碎成颗粒状,置于锅中加水1 000 mL先煮15 min,然后将胡萝卜去皮用水洗净,切片取100 g下锅一起煮至胡萝卜熟而不烂;配方④先将芋头去皮洗净切粒取100 g,胡萝卜去皮洗净切片取100 g一起置于锅中加水1 000 mL,煮至芋头、胡萝卜熟而不烂;配方⑤将马铃薯去皮洗净切片取100 g,麸皮取100 g一起置于锅中加水1 000 mL,煮至马铃薯熟而不烂;配方⑥将大豆100 g用粉碎机粉碎成颗粒状置于锅中加水1 000 mL先煮15 min,然后将红薯去皮洗净切粒,下锅一起煮至红薯熟而不烂;配方⑦将红薯、芋头去皮洗净切粒,各取100 g置于锅中加水1 000 mL,煮至红薯、芋头熟而不烂。然后各配方均用4层纱布过滤取汁加葡萄糖(或白糖)10 g、琼脂10 g、磷酸二氢钾2 g硫酸镁1.5 g,一起回锅煮,边煮边用木棒搅拌,使琼脂充分溶解,后使用分装前已经用75%酒精或高锰酸钾溶液泡浸消毒好的试管分装制好的培养液,装液至占试管1/5长度之部位,然后在试管口上塞上棉塞,10支试管为1扎,用牛皮纸把试管棉塞包住,用绳子捆绑,放在高压灭菌锅灭菌50 min,冷却15~20 min后,取出摆斜面,然后置于接种室的接种箱内,经紫外线灯照射灭菌30 min后供接种培养。
1.3.2 接种培养。将上述置于接种箱内经紫外线灯照射灭菌30 min后的每个配方的10支试管,经无菌操作接种后置于温度6 ℃的恒温箱内培养。
1.4 测定内容与方法
每个配方分装10支试管(做好标记),每支试管接入相同量的菌种,置于6 ℃恒温培养箱中培养,当菌丝开始萌发时,观测菌丝生长情况,比较菌丝在不同培养基上的生长形态、长势、速度和浓密度、菌丝粗壮度、爬壁力。培养1 d后开始定时观察,每10 d测量1次菌丝长速(测量菌丝生长长度)[4-6],并在菌管外壁上划线标记,直至菌丝长满斜面,以配方①(常规配方)马铃薯配方作为对照(CK),进行差异显著性对比分析,进而确定最优母种培养基配方。
2 结果与分析
通过配方筛选试验,得出试验结果,具体情况见表1。
从表1可以看出,菌丝生长速度最快、洁白、浓密、生长旺盛、粗壮、爬壁力强,菌丝生长最好的培养基是配方⑤;其次是配方⑥;再次是配方①(常规配方,CK);菌丝生长比较稀疏纤细并且菌丝生长比较慢的是配方②。菌丝长势从好到差依次排列为配方⑤、配方⑥、配方①、配方⑦、配方④、(下转第50页)
配方③、配方②。究其原因,配方⑤是以马铃薯、麸皮为主料,富含氮源,因而菌丝长势最好。
3 结论与讨论
优选秀珍菇母种(一级种)培养基至关重要,将会影响秀珍菇二、三级种的培育质量乃至秀珍菇的生产栽培。本试验结果表明,秀p-1号品种在温度为6 ℃的恒温箱环境下能正常萌发生长。其中生长最好的配方是马铃薯100 g、麸皮100 g、葡萄糖10 g、琼脂10 g、磷酸二氢钾2 g、硫酸镁1.5 g,秀p-1号(秀珍菇)在该配方培养基上,菌丝萌发最快,生长旺盛,菌丝洁白、浓密、粗壮、爬壁力强;其次为配方大豆100 g、红薯100 g、葡萄糖10 g、琼脂10 g、磷酸二氢钾2 g、硫酸镁1.5 g;再次是常规配方马铃薯200 g、葡萄糖10 g、琼脂10 g、磷酸二氢钾2 g、硫酸镁1.5 g。
4 参考文献
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