冬虫夏草氨基酸成分的药理作用分析
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摘要：目的：对冬虫夏草氨基酸成分的药理作用进行分析。方法：常规处理冬虫夏草取药粉，将100只健康雄性运动能力差异性不大的小鼠为研究对象，分为模型组、空白对照组、高、中、低剂量氨基组五组。每组实施针对性的实验方法，对小鼠力竭游泳时间、血乳酸水平、脾脏指数、胸腺指数、鼠白细胞介素、肿瘤坏死因子α进行比较，探究氨基酸成分的免疫功能和抗疲劳功能。结果：氨基酸组小鼠的抗疲劳能力显著增强，力竭游泳时间明显延长，且血清乳酸水平有了明显下降，小鼠的脾脏指数、胸腺指数、IL-2、TNF-α水平改善明显。五组小鼠比较力竭游泳时间、血乳酸水平、脾脏指数、胸腺指数、鼠白细胞介素、肿瘤坏死因子α差异显著，（P<0.05）有统计学意义。此外，高、中、低剂量氨基组指标呈梯度变化的特点，与空白组较为接近，（P<0.05）有统计学意义。结论：冬虫夏草氨基酸成分在免疫功能和抗疲劳能力上作用显著。
关键词：冬虫夏草;氨基酸成分;药理作用
冬虫夏草属于中药材的一种，具有较大的滋补价值。该药材属于一种复合体，由蝙蝠蛾幼虫和菌种结合而成[1]。其中冬虫夏草中具有多种活性成分，几年来对该药材的研究以氨基酸组分居多。本文主要针对冬虫夏草氨基酸成分的药理作用进行分析。内容如下。
1材料与方法
1.1材料与实验动物
选取人工养殖的冬虫夏草，经去泥去腐质等处理，自然风干后装入玻璃器皿中存放。健康雄性运动能力差異性不大的100只小鼠为实验动物。所有小鼠均未7周龄，体制量平均在（20.1±1.1）g，采用常规基础饲料饲养方法。饲养温度维持在23-25℃，饲养湿度维持在45%-55%。对饲养的小鼠进行一周的行为学指标训练，将体育和运动能力与平均水平较大的小鼠淘汰。对小鼠进行每隔两周的游泳训练，每次在半小时，水温在29-31℃，水深在30cm。
1.2实验试剂和仪器
实验仪器：恒温水浴锅、旋涡振荡器、中药粉碎机、超声清洗器、高速低温、和台式离心机、全自动绘图酶标仪、微量移液器等。实验试剂：，尿素氮、血乳酸、小鼠相关酶联免疫分析等试剂盒，肝素钠、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸等分析纯等。
1.3实验方法
（1）分析提取氨基酸：在试管中放入20mg样本，将6mol/L的15ml盐酸加入。将试管内的样本混合均匀，做真空处理，十分钟后封管。在烘烤温度为110℃的恒温环境下水解22h。冷却到室温摇匀。将11ml滤液放入烧杯。在恒温水浴60℃环境下蒸干，行稀释处理。称取样品800mg，塑料离心管规格10ml，15ml4%黄基水杨酸溶液加入摇匀，22000r/min，15min，取1ml上清液，4倍滤膜过滤。检查仪器采用全自动氨基酸分析仪。结果显示：在0.5%～3.5%之间的为天冬氨酸、丝氨酸。含量最高的为谷氨酸，之后是精氨酸、组氨酸、天冬氨酸。蛋氨酸最少[2]。（2）分组实验：①抗疲劳实验：模型组、空白对照组、高、中、低剂量氨基组五组小鼠，每组20只。对模型组外行每次0.4ml，灌胃给药4w。采用生理盐水的为空白对照组。高、中、低剂量氨基组给与不同剂量的氨基酸，分别为0.4、0.2、0.1ml。连续给药4周后称重，缠小鼠重量10%的铅丝行游泳训练，计算力竭时间。铅丝取出，经针对性处理后摘眼球采血0.1ml，行全血乳酸含量检测。②免疫功能检查：行造模处理除空白对照组外，按照50mg/kg剂量注射环磷酰胺，1次/d，连续2d。灌胃2周后末次给药20min，称重，摘除眼球取血。初处死小鼠对胸腺、脾脏称重，计算脏器指数，对IL-2、TNF-α检验[3]。
1.4统计学方法
数据记录采用WPS表格，统计学计算采用SPSS20.0软件，计数资料采用（%）表示，使用X2检验;计量资料采用（）表示，使用t检验，P<0.05代表有统计学意义。
2结果
2.1抗疲劳实验
力竭游泳时间和血乳酸水平比较，差异显著，（P<0.05），且氨基酸组力竭游泳时间按照氨基酸含量的不同呈现梯度变化的特点，表现为力竭游泳时间，高剂量氨基酸组>中剂量氨基酸组>低剂量氨基酸组，（P<0.05）有统计学意义。
2.2免疫功能实验
小鼠脾脏指数、胸腺指数、IL-2、TNF-α水平差异明显（P<0.05）有统计学意义。脾脏指数、胸腺指数、IL-2、TNF-α水平具体表现为高剂量氨基酸组>中剂量氨基酸组>低剂量氨基酸组，（P<0.05）有统计学意义。
3讨论
氨基酸成分是冬虫夏草中的重要活性组分，其中在0.5%～3.5%之间的为天冬氨酸、丝氨酸。含量最高的为谷氨酸，之后是精氨酸、组氨酸、天冬氨酸。蛋氨酸最少。本次实验显示小鼠的抗疲劳能力和氨基酸的含量呈正相关的关系，在小鼠力竭游泳时间延长的过程中，血清乳酸水平下降明显，小鼠的脾脏指数、胸腺指数、IL-2、TNF-α水平改善也明显。高、中、低剂量氨基组小鼠的脾脏指数、胸腺指数、IL-2、TNF-α水平呈梯度变化的特点，与空白组较为接近，说明冬虫夏草氨基酸成分在免疫功能和抗疲劳能力上作用显著。
参考文献：
[1]陈丽云，祁真.冬虫夏草氨基酸成分的药理作用分析[J].中国卫生工程学，2018，17（5）：675-677.
[2]郑方毅.冬虫夏草中含化学成分的种类及药理作用研究进展[J].东方食疗与保健，2015，（4）：16-17.
[3]王林萍，余意，冯成强.冬虫夏草活性成分及药理作用研究进展[J].中国中医药信息杂志，2014，（7）：132-136.
第一作者：奚家龙 男 1987-8 本科 助理工程师
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