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不同干燥条件对冬虫夏草蛋白质成分的影响

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  摘要:目的:探究不同干燥条件对冬虫夏草蛋白质成分的影响情况。方法:选取60例冬虫夏草,根据随机分组原则分为鲜冬虫夏草组(20例)、37℃晒干组(20例)和60℃烘干组(20例)。比较三组冬虫夏草蛋白质成分情况。结果:与37℃晒干组和60℃烘干组相比,鲜冬虫夏草组的蛋白质含量(4.502±0.23)mg/g和蛋白分子量(52.6±5.1)kDa均较高(P<0.05)。结论:不同干燥条件对冬虫夏草蛋白质成分的影响较显著,其中鲜冬虫夏草具有最高的蛋白质含量。
  关键词:不同干燥条件;冬虫夏草;蛋白质成分;影响
  冬虫夏草属于一种菌虫复合体,它为传统的中药材,其药用历史十分悠久。同时冬虫夏草具有止血化痰,治疗肺部疾病的作用[1]。从现代药理学角度来讲,冬虫夏草存在抗氧化、抗肿瘤及免疫调节的功效,它的活性成分有蛋白、多糖及核苷等。在冬虫夏草药材中,蛋白类成分属于一种十分关键的活性成分,其主要功能包括降压、抗菌及抗肿瘤。在干燥过程中,蛋白类成分会发生结构和理化性质方面的改变,使其功效和品质受到严重影响[2]。遂本文主要探究不同干燥条件对冬虫夏草蛋白质成分的影响情况。
  1资料与方法
  1.1一般资料
  选取60例冬虫夏草,根据随机分组原则分为鲜冬虫夏草组、37℃晒干组和60℃烘干组,每组分别包含20例冬虫夏草样本。
  1.2方法
  提出冬虫夏草粗蛋白的方法为:通过料理机匀浆以后,将鲜冬虫夏草在-20℃环境下保存。37℃晒干组的冬虫夏草是在温度为37℃的环境下将鲜冬虫夏草晒干12小时后获得;60℃烘干组的冬虫夏草是在温度为60℃的恒温烘箱中将鲜冬虫夏草晒干12小时获得。通过研磨机将冬虫夏草样品粉碎。对冬虫夏草样品粉末称取0.2g,将其放置于研钵中,将6ml蛋白提取液加入,在冰盒上进行30分钟的研磨,使其成为匀浆,同时向离心管中转移,离心温度为4℃,离心时间为15分钟。将上清液100uL向新的离心管中转移,将0.07%DTT和预冷丙酮1.5ml加入后,将其摇匀,然后放置在-20℃环境中进行6小时的沉淀处理,将上清液弃掉,然后进行挥干处理就可以将粗蛋白样品获得,然后按照Bradford方法对蛋白含量进行准确测定。
  1.3SDS-PAGE蛋白分析
  在离心管中加入粗蛋白溶液100uL,将0.07%DTT和预冷丙酮1.5ml加入后,将其摇匀,然后放置在-20℃环境中2小时。将上清液弃掉,然后进行挥干处理,然后将20uL纯水溶解蛋白加入,按照说明书对蛋白进行纯化。在12%的SDS-PAGE上样孔中将2uL Marker和20uL蛋白质样品加入,然后进行电泳处理,首先进行低电压60V的设置,然后逐渐调节至120V。取出凝胶以后,对其进行固定、显色等相关处理,最后通过相关软件对凝胶图谱实行有效处理。
  1.4观察项目
  比较三组冬虫夏草蛋白质成分情况。
  1.5統计学分析
  运用SPSS22.0统计学软件对计量资料进行分析,表示方法为“(均数±标准差)”、检验方法为“t”,用P<0.05表示结果有差异。
  2结果
  2.1比较三组冬虫夏草蛋白质成分情况
  鲜冬虫夏草组冬虫夏草含量为(4.502±0.23)mg/g,37℃晒干组冬虫夏草含量为(2.506±0.31)mg/g,60℃烘干组冬虫夏草含量为(1.142±0.21)mg/g。相比于37℃晒干组和60℃烘干组,鲜冬虫夏草组存在较高的蛋白质含量(P<0.05)。
  2.2比较三组冬虫夏草蛋白质分子量情况
  鲜冬虫夏草组蛋白质分子量(52.6±5.1)kDa明显高于37℃晒干组(34.1±4.3)kDa和60℃烘干组(21.1±4.1)kDa(P<0.05)。
  3讨论
  冬虫夏草具有较多的功效,虫草素是其主要的活性成分,美白除黑、益气养血、止血化痰、补肺益肾、抗疲劳、抗肿瘤及调节免疫系统功能等是冬虫夏草的主要作用功效,此外,冬虫夏草还能够发挥保健的作用[3]。但在不同的环境影响下,冬虫夏草的蛋白质成分会有所变化。相关研究显示,对冬虫夏草干燥温度的升高会减少其蛋白质含量,同时干燥条件的不同也会改变其蛋白质分子量[4]。
  本文通过探究不同干燥条件对冬虫夏草蛋白质成分的影响情况,相关数据显示,与37℃晒干组和60℃烘干组相比,鲜冬虫夏草组的蛋白质含量(4.502±0.23)mg/g和蛋白分子量(52.6±5.1)kDa均较高(P<0.05),主要原因可能在于如果干燥温度较高,可能会使冬虫夏草蛋白质发生变化。综上所述,不同干燥条件对冬虫夏草蛋白质成分的影响较明显,其中鲜冬虫夏草具有最高的蛋白质含量,随着环境温度的升高,会明显减少冬虫夏草蛋白质含量和蛋白质分子量,可见干燥方法的不同对药材蛋白存在不同的影响,上述研究结果的发现有利于促进冬虫夏草相关干燥工艺的发展。
  参考文献:
  [1]钱正明,李春红,李文庆等.冬虫夏草蛋白图谱及干燥条件对超氧化物歧化酶活性影响[J].菌物学报,2016,35(4):424-432.
  [2]梅雪艳,李媛媛,沈于兰等.冬虫夏草、虫草菌丝体及蛹虫草中核苷类成分的测定[J].药学与临床研究,2015,23(1):27-29.
  [3]李展平,真田则明,孙素琴等.冬虫夏草中甘露醇和虫草素的TOF-SIMS分析[J].光谱学与光谱分析,2016,36(4):1230-1234.
  [4]胡抗远,王全兴,鲍蕾蕾等.复方冬虫夏草口服液对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响[J].中国药房,2018,29(14):1912-1916.
  作者简介:丁佳骏 男 1991-6 本科 助理工程师
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