不同干燥条件对冬虫夏草蛋白质成分的影响

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　　摘要：目的：探究不同干燥条件对冬虫夏草蛋白质成分的影响情况。方法：选取60例冬虫夏草，根据随机分组原则分为鲜冬虫夏草组（20例）、37℃晒干组（20例）和60℃烘干组（20例）。比较三组冬虫夏草蛋白质成分情况。结果：与37℃晒干组和60℃烘干组相比，鲜冬虫夏草组的蛋白质含量（4.502±0.23）mg/g和蛋白分子量（52.6±5.1）kDa均较高（P<0.05）。结论：不同干燥条件对冬虫夏草蛋白质成分的影响较显著，其中鲜冬虫夏草具有最高的蛋白质含量。
　　关键词：不同干燥条件;冬虫夏草;蛋白质成分;影响
　　冬虫夏草属于一种菌虫复合体，它为传统的中药材，其药用历史十分悠久。同时冬虫夏草具有止血化痰，治疗肺部疾病的作用[1]。从现代药理学角度来讲，冬虫夏草存在抗氧化、抗肿瘤及免疫调节的功效，它的活性成分有蛋白、多糖及核苷等。在冬虫夏草药材中，蛋白类成分属于一种十分关键的活性成分，其主要功能包括降压、抗菌及抗肿瘤。在干燥过程中，蛋白类成分会发生结构和理化性质方面的改变，使其功效和品质受到严重影响[2]。遂本文主要探究不同干燥条件对冬虫夏草蛋白质成分的影响情况。
　　1资料与方法
　　1.1一般资料
　　选取60例冬虫夏草，根据随机分组原则分为鲜冬虫夏草组、37℃晒干组和60℃烘干组，每组分别包含20例冬虫夏草样本。
　　1.2方法
　　提出冬虫夏草粗蛋白的方法为：通过料理机匀浆以后，将鲜冬虫夏草在-20℃环境下保存。37℃晒干组的冬虫夏草是在温度为37℃的环境下将鲜冬虫夏草晒干12小时后获得;60℃烘干组的冬虫夏草是在温度为60℃的恒温烘箱中将鲜冬虫夏草晒干12小时获得。通过研磨机将冬虫夏草样品粉碎。对冬虫夏草样品粉末称取0.2g，将其放置于研钵中，将6ml蛋白提取液加入，在冰盒上进行30分钟的研磨，使其成为匀浆，同时向离心管中转移，离心温度为4℃，离心时间为15分钟。将上清液100uL向新的离心管中转移，将0.07%DTT和预冷丙酮1.5ml加入后，将其摇匀，然后放置在-20℃环境中进行6小时的沉淀处理，将上清液弃掉，然后进行挥干处理就可以将粗蛋白样品获得，然后按照Bradford方法对蛋白含量进行准确测定。
　　1.3SDS-PAGE蛋白分析
　　在离心管中加入粗蛋白溶液100uL，将0.07%DTT和预冷丙酮1.5ml加入后，将其摇匀，然后放置在-20℃环境中2小时。将上清液弃掉，然后进行挥干处理，然后将20uL纯水溶解蛋白加入，按照说明书对蛋白进行纯化。在12%的SDS-PAGE上样孔中将2uL Marker和20uL蛋白质样品加入，然后进行电泳处理，首先进行低电压60V的设置，然后逐渐调节至120V。取出凝胶以后，对其进行固定、显色等相关处理，最后通过相关软件对凝胶图谱实行有效处理。
　　1.4观察项目
　　比较三组冬虫夏草蛋白质成分情况。
　　1.5統计学分析
　　运用SPSS22.0统计学软件对计量资料进行分析，表示方法为“（均数±标准差）”、检验方法为“t”，用P<0.05表示结果有差异。
　　2结果
　　2.1比较三组冬虫夏草蛋白质成分情况
　　鲜冬虫夏草组冬虫夏草含量为（4.502±0.23）mg/g，37℃晒干组冬虫夏草含量为（2.506±0.31）mg/g，60℃烘干组冬虫夏草含量为（1.142±0.21）mg/g。相比于37℃晒干组和60℃烘干组，鲜冬虫夏草组存在较高的蛋白质含量（P<0.05）。
　　2.2比较三组冬虫夏草蛋白质分子量情况
　　鲜冬虫夏草组蛋白质分子量（52.6±5.1）kDa明显高于37℃晒干组（34.1±4.3）kDa和60℃烘干组（21.1±4.1）kDa（P<0.05）。
　　3讨论
　　冬虫夏草具有较多的功效，虫草素是其主要的活性成分，美白除黑、益气养血、止血化痰、补肺益肾、抗疲劳、抗肿瘤及调节免疫系统功能等是冬虫夏草的主要作用功效，此外，冬虫夏草还能够发挥保健的作用[3]。但在不同的环境影响下，冬虫夏草的蛋白质成分会有所变化。相关研究显示，对冬虫夏草干燥温度的升高会减少其蛋白质含量，同时干燥条件的不同也会改变其蛋白质分子量[4]。
　　本文通过探究不同干燥条件对冬虫夏草蛋白质成分的影响情况，相关数据显示，与37℃晒干组和60℃烘干组相比，鲜冬虫夏草组的蛋白质含量（4.502±0.23）mg/g和蛋白分子量（52.6±5.1）kDa均较高（P<0.05），主要原因可能在于如果干燥温度较高，可能会使冬虫夏草蛋白质发生变化。综上所述，不同干燥条件对冬虫夏草蛋白质成分的影响较明显，其中鲜冬虫夏草具有最高的蛋白质含量，随着环境温度的升高，会明显减少冬虫夏草蛋白质含量和蛋白质分子量，可见干燥方法的不同对药材蛋白存在不同的影响，上述研究结果的发现有利于促进冬虫夏草相关干燥工艺的发展。
　　参考文献：
　　[1]钱正明，李春红，李文庆等.冬虫夏草蛋白图谱及干燥条件对超氧化物歧化酶活性影响[J].菌物学报，2016，35（4）：424-432.
　　[2]梅雪艳，李媛媛，沈于兰等.冬虫夏草、虫草菌丝体及蛹虫草中核苷类成分的测定[J].药学与临床研究，2015，23（1）：27-29.
　　[3]李展平，真田则明，孙素琴等.冬虫夏草中甘露醇和虫草素的TOF-SIMS分析[J].光谱学与光谱分析，2016，36（4）：1230-1234.
　　[4]胡抗远，王全兴，鲍蕾蕾等.复方冬虫夏草口服液对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响[J].中国药房，2018，29（14）：1912-1916.
　　作者简介：丁佳骏 男 1991-6 本科 助理工程师
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