蔬菜农药残留快速检测技术及常见问题与对策
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摘要:蔬菜农药残留快速检测法因其操作简单、成本较低、快速方便等优点,被企业、批发市场、农产品检测部门广泛使用。阐述蔬菜农药残留快速检测的原理、优缺点、抑制率异常情况的原因分析和应对办法,分析检测过程中易出现的问题,并针对这些问题提出相应对策,以减少误差,提高检测结果的准确性。
关键词:蔬菜农药残留快速检测;原理;影响因素;对策
中图分类号:S481.8 文献标识码:A 文章编号:1674-1161(2019)05-0064-02
农药是防治蔬菜病虫害、提高产量及实现农业机械化的主要手段。由于农药的特性、使用方式和安全间隔期,蔬菜上或多或少都存在一些农药残留。当农药使用过量或未达到安全间隔期就进入销售环节,就会造成中毒事件,严重危害百姓的身体健康。因此,加强对蔬菜农药残留的监管已迫在眉睫,而蔬菜农药残留快速检测技术是对蔬菜农药残留监管的一个重要手段。
蔬菜农药残留快速检测技术是一种最为简单和普遍的生化检测法,蔬菜农药残留快速检测法根据乙酰胆碱酯酶被抑制的程度(抑制率)来检测蔬菜上的有机磷和氨基甲酸酯类这两类农药的残留,具有方便快捷、成本低、操作简单等优点,可用于半定量测定和现场定性检测,适合在蔬菜生产基地、大型蔬菜交易市场及政府检测部门开展快速检测工作。这种快速检测方法可以对含有有机磷和氨基甲酸酯这两类农药的蔬菜进行筛选,将食用蔬菜中农药残留超标的产品控制在交易之前,避免流入百姓的餐桌。
1 蔬菜农药残留快速检测技术的原理
目前,国内食用蔬菜中毒主要是由有机磷和氨基甲酸酯这两类农药引起的。这两类农药会使人体中枢和周围神经系统中的乙酰胆碱酯酶活性降低,造成神经传导介质乙酰胆碱非正常积累,导致急性中毒。
农药残留速测法利用有机磷和氨基甲酸酯类农药对动物体内乙酰胆碱酶具有抑制作用这一昆虫毒理学原理,在乙酰胆碱酯酶及其底物(乙酰胆碱)的共存体系中加入农产品样品提取液(样品中含有水)。如果样品中不含有机磷或氨基甲酸酯类农药,酶就会正常与其他试剂发生反应,乙酰胆碱被酶水解,水解产物与加入的显色剂产生反应出现颜色变化;如果试样提取液中含有的有机磷或氨基甲酸酯类农药超标,酶的活性就会降低,试样中加入的底物就不能被酶水解,顏色也就不会发生变化。用农残速测仪测定吸光度值,3 min后速测仪自动计算出抑制率,当抑制率小于70%时为合格,反之判定为不合格,以此判断食用蔬菜中农药残留是否超标。
2 蔬菜农药残留快速检测方法的优缺点
1) 蔬菜农药残留快速检测方法的优点是:农残速测仪体积小、便于携带,原理通俗易懂,操作简单上手快,运行成本低廉,整个检测过程只需3 min左右,可作为传统仪器分析方法的有益补充,适用于现场定性检测,特别适合针对未进入交易环节的生产基地、批发市场开展快速检测工作,同时也是农产品检测部门对蔬菜农药残留是否超标的一种快速判定方法。该方法可对含有有机磷和氨基甲酸酯这两类农药残留的蔬菜进行快速粗筛,将一部分农药残留超标的蔬菜控制在流通之前,保证上市蔬菜的相对安全性,避免农药超标的蔬菜流入百姓的餐桌。
2) 蔬菜农药残留快速检测方法的缺点是:只能检测氨基甲酸酯和有机磷这两类农药,不能检测其他类农药;酶试剂的活性容易降低,导致反应不稳定;人员操作上不严谨导致检测结果误差较大,重复性不好;存在检测盲区,不适合检测葱蒜类、香菜、韭菜、食用菌类农产品,易出现假阳性结果。
3 检测结果异常情况分析与对策
农药残留速测仪检测方法是利用分光光度计测定样品吸光值随时间变化而变化的情况,通过酶试剂被抑制的程度(即抑制率)来判定农药残留是否超标。抑制率的正常范围是-10%~110%,对照组样本的吸光值在3 min后与3 min前的差值(ΔAc/ΔAs)范围是0.4~0.8。
1) 抑制率偏小。出现抑制率值偏小的原因:一是由于不适当的储存使酶在参加反应前就已经失去活性。酶这种生物催化剂容易失去活性、比较脆弱,一般要在常温、常压、接近中性酸碱度的环境中才能发挥正常的作用。酶在恒温箱中的最适温度是37.5~38.5 ℃,提取液的pH值控制在8.0。粉状的酶应储存在冷冻室内(约-18 ℃),用时用提取剂溶解,溶解后的酶液分成若干个小瓶,暂时不用的储存在冷冻室内,用时解冻;用后的酶液储存在冷藏室内(0~5 ℃),在一周内用完。酶液反复解冻最多不能超过2次,在试验过程中,酶液可暂时置于室内的冰盒上。二是操作不当导致底物与酶未反应完全。应熟练掌握操作流程,取底物时用移液枪快速直接加到比色皿内,不要溅到比色皿壁上,加完底物后立即震荡片刻,再放入农残速测仪中,否则将影响判定结果。
2) 抑制率偏大。出现抑制率值偏大的原因:主要是由于检测人员操作不当,导致在上机比色前酶就已经与底物发生反应。应熟练快速地完成样品培养及上机比色,尽可能在1 min内完成。培养时间要固定,不能超过30 min。认真清洗比色皿,保持比色皿洁净,使比色皿有较好的透光性。
4 蔬菜农药残留快速检测结果出现误判的常见原因与对策
蔬菜农药残留快速检测法对生化反应条件要求比较严格。由于在蔬菜农药残留快速检测过程中会出现一些环境因素和人为因素的影响,导致同一批次蔬菜样品的检测结果不同或出现较大的误差,需要采取相应的办法加以解决。
1) 检测室内要配备空调、恒温箱等设备,以确保试剂保存在最适宜的环境中。尤其是酶试剂及底物要在特定的温度条件下保存,保持乙酰胆碱酯酶的活性。
2) 配置药品时要严格按照药剂说明书的比例配置。要使用蒸馏水或纯净水,不可使用矿物质水或自来水,以免造成检测结果不准确。
3) 速测仪分光光度计要定期进行较准调试,以确保仪器的测试准确度。保持比色皿洁净是减少判定结果出现误差的一个重要因素,可在热水浸泡后用洗涤剂清洗比色皿。 4) 不能使用同一個移液器吸取不同的试剂,要确保一个移液器配一种试剂,避免试剂发生交叉,影响判定结果。坚持“只吸不进”的原则,防止试剂污染。定量加液器的加液量误差较大,建议使用量筒来称量提取试剂。
5) 蔬菜自身的影响。葱蒜类、香菜、韭菜、食用菌类、花椒等农产品的汁液中含有的物质会对判定结果产生影响,出现假阳性。处理这类样品时,可采用整株或大块蔬菜浸出提取液的方法。
6) 对蔬菜样品进行前处理时,要正确使用合适的采样工具,控制好取样时间、取样位置、取样量。注意不要将样品捣烂而使得提取液中蔬菜色素过多,以免影响分光光度计的测定结果。
参考文献
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Rapid Detection Technology, Common Problems and Countermeasures
of Pesticide Residues in Vegetables
FENG Liandi
(Liaoning Agricultural Products Processing and Circulation Promotion Center, Shenyang 110001, China)
Abstract: The rapid detection of pesticide residues in vegetables is widely used by enterprises, wholesale markets and agricultural products detection departments because of its advantages of simple operation, low cost, rapid convenience and so on. This paper expounds the principle, advantages and disadvantages of rapid detection of pesticide residues in vegetables and analyzation of the causes and countermeasures of abnormal inhibition rate, analyzes the problems that are easy to occur in the detection process, and puts forward corresponding countermeasures to reduce errors and improve the accuracy of detection results.
Key words: rapid detection of pesticides residues in vegetables; principles; influencing factors; countermeasures
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