50%双环磺草酮悬浮剂的HPLC分析
来源:用户上传
作者:饶镭 李保同
摘要：采用Zorbax Eclipse XDB-C18反相色谱柱建立一种利用HPLC测定50%双环磺草酮悬浮剂中有效成分的分析方法，以乙腈+水（体积比60 ∶ 40）为流动相，在检测波长323 nm条件下测定待测试样中双环磺草酮的含量。双环磺草酮的线性相关系数（r2）为0.999 9，标准偏差为0.480，变异系数为0.954%，平均回收率为99.95%。该分析方法具有操作简便、分离效果好、精密度和准确度较高、线性相关性好的优点，可用于双环磺草酮悬浮剂的定量分析。
关键词：双环磺草酮;悬浮剂;高效液相色谱;分析
Abstract：An analytical method for the determination of active ingredients in 50% bicyclosulfone suspension by HPLC using Zorbax Eclipse XDB-C18 reversed phase column was developed，using a mixture solution of acetonitrile and water （60 ∶ 40，by vol） as the mobile phase under a detection wavelength of 323 nm. The linear correlation coefficient was 0.999 9，the standard deviation was 0.480，the coefficient of variation was 0.954%，and the average recovery rate was 99.95%. The analytical method has the advantages of simple operation，good separating effect，high precision and accuracy，and a good linear relationship. It can be used for the quantitative analysis of dicyclosulfone suspension agents.
Key words：benzobicyclon; SC; HPLC; analysis
1 材料与方法
1.1 试剂和溶液
双环磺草酮标准品（≥98.0%，江西农业大学理学院），50%双环磺草酮悬浮剂（日本SDS生物公司），乙腈（色谱纯），超纯水。
1.2 仪器
Agilent 1260高效液相色谱仪，带全波长紫外检测器（DAD检测器）和自动控温进样器;色谱柱：Zorbax Eclipse XDB-C18色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）不锈钢柱;紫外分光光度计（德国Eppendorf公司）;万分之一天平（日本岛津公司）;SB-5200DT超声波清洗器;0.22 μm有机滤膜。
1.3 色谱条件
流动相：乙腈-水（体积比60 ∶ 40）;流速 0.8 mL/min;检测波长323 nm;柱温30 ℃;进样量10 μL;双环磺草酮的保留时间为4.577 min。典型的双环磺草酮标准品高效液相色谱图见图2。
1.4 测定步骤
1.4.1 标准品溶液的配制 称取0.010 5 g双环磺草酮标准品（精确至0.000 2 g）于50 mL容量瓶中，加入适量乙腈溶解，超声波水浴助溶 10 min，冷却至室温，乙腈定容，配制成200 mg/L母液，摇匀备用。
1.4.2 试样溶液的配制 称取50%双环磺草酮悬浮剂0.020 0 g（精确至0.000 2 g）于50 mL容量瓶中，适量乙腈溶解，超聲波水浴助溶，冷却至室温，乙腈定容，摇匀，上清液过0.22 μm有机滤膜，备用。
1.4.3 测定 在上述色谱条件下，待仪器泵的压力和基线稳定后，连续注入数针标样溶液，当相邻2针峰面积变化小于1.5%时，按照标准品溶液、试样溶液、试样溶液、标准品溶液的顺序进样，进行分离与测定。
1.4.4 计算 根据标准品和试样溶液中双环磺草酮的峰面积，采用外标法定量，根据公式计算试样溶液中双环磺草酮的含量W2（%），计算公式如下：
W2（%）=A2×m1×W1A2×m2。
式中：A1为标准品溶液中双环磺草酮峰面积的平均值，A2为试样溶液中双环磺草酮的峰面积平均值，m1为双环磺草酮标准品的质量（g），m2为双环磺草酮试样的质量（g），W1为双环磺草酮标准品的质量分数（%）。
2 结果与分析
2.1 检测波长的选择
采用紫外可见分光光度计对配制的双环磺草酮标准品溶液进行光谱扫描，得到紫外吸收光谱（图3）。从图3可以看出，双环磺草酮在323 nm附近吸收波长最大，各种杂质对组分测定不干扰，因此确定323 nm为检测波长。
2.2 流动相的确定
采用Zorbax Eclipse XDB-C18反相色谱柱反复测试不同比例的乙腈-水、甲醇-水体系作为流动相，发现使用乙腈-水为流动相（体积比 60 ∶ 40）、流速为0.8 mL/min、柱温30 ℃时，双环磺草酮能与杂质能较好地分离，基线平稳，峰形对称，分离时间适中，可满足分析的需要。
2.3 线性相关性的测定
用乙腈将双环磺草酮标准品溶液进行再稀释，逐步配制成质量浓度分别为50.00、10.00、5.00、1.00、0.50、0.10、0.05、0.01 mg/L的标准溶液，在上述色谱检测条件下，用外标法（峰面积）进行定量分析。以双环磺草酮的质量浓度作为横坐标，以色谱峰的峰面积作为纵坐标作标准曲线图。双环磺草酮检测方法的线性回归方程为y=14.534 0x+4.247 5，r2=0.999 9（图4）。结果表明，在质量浓度为0.01～50.00 mg/L时，峰面积与质量浓度线性关系良好。表明该方法可用于双环磺草酮的分析和检测。
2.4 精密度测定
按照上述色谱条件，从同一双环磺草酮悬浮剂中称取5份样品测定双环磺草酮的质量分数，得到标准偏差和变异系数（表1）。该方法的标准偏差为0.480，变异系数为0.954%，变异系数满足国际农药分析协作委员会（CIPAC）的要求（<1.71%）。
2.5 准确度测定
称取5份已知质量分数的50%双环磺草酮悬浮剂于 50 mL 容量瓶中，分别加入一定量的双环磺草酮标准品，在上述色谱条件下进行测定，根据理论添加量与实际测得量计算其回收率，结果表明双环磺草酮的回收率在99.37%～100.80%之间，平均回收率为99.95%（表2）。
3 结论
本研究以C18反相色谱柱为分离柱，乙腈+水（体积比60 ∶ 40）为流动相， 323 nm为检测波长，建立了50%双环磺草酮悬浮剂的高效液相色谱定量分析方法。该方法操作简便，分离效果好，线性相关性良好，精密度和准确度较高，适用于双环磺草酮悬浮剂的质量检测。
参考文献：
[1]张一宾. 除草剂双环磺草酮的研究开发[J]. 世界农药，2006（2）：9-14.
[2]黄 薇. 25%双环磺草酮SC防除水稻田一年生阔叶杂草效果示范试验分析[J]. 农业与技术，2017，37（5）：29-31.
[3]齐 萌，王亚楠，康占海，等. 25%双环磺草酮悬浮剂防除水稻移栽田杂草的效果与安全性[J]. 杂草科学，2014，32（1）：120-123.
[4]张永凯. 25%双环磺草酮悬浮剂防除水稻移栽田一年生杂草药效试验[J]. 北方水稻，2013，43（5）：60-62.
[5]毕亚玲，王曹阳，谷 刚，等. 双环磺草酮除草活性及对水稻的安全性研究[J]. 农药学学报，2018，20（1）：18-24.
[6]黄成田，王 娇，蒋培宇，等. 双环磺草酮原药的反相高效液相色谱分析[J]. 农药，2016，55（12）：901-902.
转载注明来源:https://www.xzbu.com/1/view-15184033.htm
