病理技术HE染色在病理诊断中的应用效果分析

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　　【摘要】 目的 研究病理技术苏木素-伊红（HE）染色在病理诊断中的价值， 并分析提高其应用效果的方法。方法 8000例进行病理诊断的患者作为研究对象， 对其样本均采用HE染色进行病理诊断， 统计样本合格率和不合格率， 并分析样品不合格的主要原因。结果 在本次研究中， 样本合格率为99.00%（7920/8000）， 样本不合格率为1.00%（80/8000）。样本不合格的主要原因包括：组织切片脱落26.25%（21/80）、染色不均匀21.25%（17/80）、染色模糊16.25%（13/80）、切片污染18.75%（15/80）、染色困难17.50%（14/80）。结论 病理技术HE染色在病理诊断中应用效果较好， 其样品合格率较高， 但是在进行染色的过程中， 需要进行更加细致的操作， 针对影响样本合格的各种因素进行有效规避， 以降低样本被污染的几率， 防止出现不合格样本， 进而提高诊断效率。通过上述保障， 病理技术HE染色值得在临床病理诊断中推广。
　　【关键词】 苏木素-伊红染色;病理技术;应用价值;操作方法
　　DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.27.036
　　HE染色是目前最常见的一种病理学染色技术， 该技术能够为主治医生在治疗过程中提供具有针对性的诊断， 从而提高临床的治疗效率。但是， 就目前而言， 在利用HE染色病理技术进行诊断的过程中， 仍然存在小部分染色效果不佳的情况发生， 导致诊断结果错误等情况发生， 在探究过程中发现染色效果不佳的原因， 主要与检验过程中的操作有
　　关[1]， 因此， 为了能够有效避免诊断误差或者错误出现， 本文主要针对在本科室进行HE染色的病理诊断进行分析， 同时对如何提高HE染色的方法进行研究， 具体报告如下。
　　1 资料与方法
　　1. 1 一般资料
　　选取2018年1月～2019年1月本科室8000例进行病理诊断的患者作为研究对象， 其中男5312例， 女2688例， 平均年龄（40.23±3.45）岁。样本来源占比分别为手术切除62.50%（5000/8000）、纖维内窥镜25.00%（2000/8000）、穿刺取材12.50%（1000/8000）， 各类样本占比分别为子宫内膜样本13.75%（1100/8000）、脂肪组织样本7.50%（600/8000）、骨组织样本5.00%（400/8000）、腹腔脏器样本73.75%（5900/8000）。纳入标准：①均取得相关伦理研究协会的同意。②样本涉及的患者及其家属均签署知情同意书。
　　1. 2 方法 在本次研究中， 对入选的8000例患者样本进行HE染色， 根据选取样本的部位， 对其进行不同的处理， 其中包括固定样本、对样本进行脱水处理、对切片进行染色等几个步骤。其中， HE的染色过程主要包括：采用二甲苯进行2次去蜡处理， 再利用不同浓度的无水乙醇将切片洗净， 同时采用蒸馏水再次清洗切片， 并将洗净的切片采用苏木素进行染色， 染色时间≤5 min， 并用流水浸洗， 直到切片的细胞核变为蓝色为止。然后使用伊红进行染色， 并采用浓度为95%的乙醇进行冲洗， 使用苯酚二甲苯、二甲苯对切片进行处理， 将其利用DPX封片剂进行封存， 最后将处理好的样本贴上标签。
　　1. 3 观察指标 统计样本合格率和不合格率， 并分析样品不合格的主要原因。
　　2 结果
　　在本次研究中， 样本合格率为99.00%（7920/8000）， 样本不合格率为1.00%（80/8000）。样本不合格的主要原因包括：组织切片脱落26.25%（21/80）、染色不均匀21.25%（17/80）、染色模糊16.25%（13/80）、切片污染18.75%（15/80）、染色困难17.50%（14/80）。
　　3 讨论
　　HE染色， 就是利用苏木素和伊红进行染色， 在临床医学中作为一项重要的病理诊断， 但是由于在染色过程中步骤较为复杂， 导致染色结果存在一定的误差， 为了能够有效确保每例样本的准确率， 在进行HE染色的时候， 对其操作方法进行仔细研究[2]。
　　HE染色法是石蜡切片技术中的一种常见的染色方法， 其中， 苏木素的染液主要呈现出碱性， 通过染色以后， 切片中的细胞核会被染上紫蓝色， 伊红是一种酸性染料， 能够使切片的细胞质、细胞外的物质染成红色。在实验中， 对苏木素和伊红进行染色的时候， 步骤较为复杂， 尤其是在本次研究中， 通过实验结果可以发现， 8000例样本中， 仍然有1.00%的样本存在不合格的情况， 通过对导致样品不合格的原因进行详细分析以后， 发现导致样本不合格的主要原因包括：组织切片脱落26.25%（21/80）、染色不均匀21.25%（17/80）、染色模糊16.25%（13/80）、切片污染18.75%（15/80）、染色困难17.50%（14/80）。因此， 为了能够提高HE染色效率， 就要对实验室的相关染色技术进行不断的提高， 从而有效满足医院病理诊断的需要。
　　在本次研究中， 导致样品不合格的主要原因之一是切片染色不均匀， 造成切片染色不均匀的主要原因包括：技术人员在对样本进行取材和固定的时候， 由于固定的位置不恰当、样本的脱水时间太短， 切片的厚度不均匀、切片上存在横纹、染色过程中处理不恰当等， 导致染色效果不佳。同时， 由于切片组织的取材较大， 切片较厚， 固定样本时采用的固定液浓度较大， 导致组织不能完全被固定好， 从而影响了中间组织的着色效果， 造成着色模糊等现象发生， 另外， 脱水时间较短， 从而导致切片中存在水分， 导致切片的透明度较低， 影响最终的着色效果[3-5]。
　　导致样品不合格的另一个重要原因为染色模糊， 切片染色模糊主要是因为在检验过程中， 工作人员在取材的时候， 操作不当导致的， 例如在取材过程中， 标本出现自溶情况， 在固定样本的时候不及时， 从而引起组织结构模糊的现象发生。另外， 在采用固定剂进行固定的时候， 也是非常重要的， 如果固定不良， 就会导致切片染色模糊的现象发生， 另外， 在使用乙醇进行标本固定的时候， 也有可能导致染色出现模糊的现象发生。在取材过程中， 如果选取了淋巴组织， 会导致切片发灰， 这是由于淋巴细胞较为密集、其结构较为复杂， 同时， 在制作样本的时候， 温度过高、染料质量较差、细胞分化太严重等， 也会导致染色模糊[6-8]。 　　而染色中组织切片脱落主要是与组织自身有关， 同时也与工作人员在处理样本时， 处理不当等原因有关。切片污染和染色困难主要是因为样本中的组织被污染， 是染液、试剂等不干净导致的[9-12]。
　　综上所述， 病理技术HE染色在病理诊断中应用效果较好， 其样品合格率较高， 但是在进行染色的过程中， 需要进行更加细致的操作， 针对组织切片脱落、染色不均匀、染色模糊、切片污染、染色困难等影响样本合格的因素进行有效规避， 以降低样本被污染的几率， 防止出现不合格样本， 进而提高诊断效率。通过上述保障， 病理技术HE染色值得在临床病理诊断中推广。
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　　[收稿日期：2019-02-14]
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