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病理技术HE染色在病理诊断中的应用效果分析

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  【摘要】 目的 研究病理技术苏木素-伊红(HE)染色在病理诊断中的价值, 并分析提高其应用效果的方法。方法 8000例进行病理诊断的患者作为研究对象, 对其样本均采用HE染色进行病理诊断, 统计样本合格率和不合格率, 并分析样品不合格的主要原因。结果 在本次研究中, 样本合格率为99.00%(7920/8000), 样本不合格率为1.00%(80/8000)。样本不合格的主要原因包括:组织切片脱落26.25%(21/80)、染色不均匀21.25%(17/80)、染色模糊16.25%(13/80)、切片污染18.75%(15/80)、染色困难17.50%(14/80)。结论 病理技术HE染色在病理诊断中应用效果较好, 其样品合格率较高, 但是在进行染色的过程中, 需要进行更加细致的操作, 针对影响样本合格的各种因素进行有效规避, 以降低样本被污染的几率, 防止出现不合格样本, 进而提高诊断效率。通过上述保障, 病理技术HE染色值得在临床病理诊断中推广。
  【关键词】 苏木素-伊红染色;病理技术;应用价值;操作方法
  DOI:10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.27.036
  HE染色是目前最常见的一种病理学染色技术, 该技术能够为主治医生在治疗过程中提供具有针对性的诊断, 从而提高临床的治疗效率。但是, 就目前而言, 在利用HE染色病理技术进行诊断的过程中, 仍然存在小部分染色效果不佳的情况发生, 导致诊断结果错误等情况发生, 在探究过程中发现染色效果不佳的原因, 主要与检验过程中的操作有
  关[1], 因此, 为了能够有效避免诊断误差或者错误出现, 本文主要针对在本科室进行HE染色的病理诊断进行分析, 同时对如何提高HE染色的方法进行研究, 具体报告如下。
  1 资料与方法
  1. 1 一般资料
  选取2018年1月~2019年1月本科室8000例进行病理诊断的患者作为研究对象, 其中男5312例, 女2688例, 平均年龄(40.23±3.45)岁。样本来源占比分别为手术切除62.50%(5000/8000)、纖维内窥镜25.00%(2000/8000)、穿刺取材12.50%(1000/8000), 各类样本占比分别为子宫内膜样本13.75%(1100/8000)、脂肪组织样本7.50%(600/8000)、骨组织样本5.00%(400/8000)、腹腔脏器样本73.75%(5900/8000)。纳入标准:①均取得相关伦理研究协会的同意。②样本涉及的患者及其家属均签署知情同意书。
  1. 2 方法 在本次研究中, 对入选的8000例患者样本进行HE染色, 根据选取样本的部位, 对其进行不同的处理, 其中包括固定样本、对样本进行脱水处理、对切片进行染色等几个步骤。其中, HE的染色过程主要包括:采用二甲苯进行2次去蜡处理, 再利用不同浓度的无水乙醇将切片洗净, 同时采用蒸馏水再次清洗切片, 并将洗净的切片采用苏木素进行染色, 染色时间≤5 min, 并用流水浸洗, 直到切片的细胞核变为蓝色为止。然后使用伊红进行染色, 并采用浓度为95%的乙醇进行冲洗, 使用苯酚二甲苯、二甲苯对切片进行处理, 将其利用DPX封片剂进行封存, 最后将处理好的样本贴上标签。
  1. 3 观察指标 统计样本合格率和不合格率, 并分析样品不合格的主要原因。
  2 结果
  在本次研究中, 样本合格率为99.00%(7920/8000), 样本不合格率为1.00%(80/8000)。样本不合格的主要原因包括:组织切片脱落26.25%(21/80)、染色不均匀21.25%(17/80)、染色模糊16.25%(13/80)、切片污染18.75%(15/80)、染色困难17.50%(14/80)。
  3 讨论
  HE染色, 就是利用苏木素和伊红进行染色, 在临床医学中作为一项重要的病理诊断, 但是由于在染色过程中步骤较为复杂, 导致染色结果存在一定的误差, 为了能够有效确保每例样本的准确率, 在进行HE染色的时候, 对其操作方法进行仔细研究[2]。
  HE染色法是石蜡切片技术中的一种常见的染色方法, 其中, 苏木素的染液主要呈现出碱性, 通过染色以后, 切片中的细胞核会被染上紫蓝色, 伊红是一种酸性染料, 能够使切片的细胞质、细胞外的物质染成红色。在实验中, 对苏木素和伊红进行染色的时候, 步骤较为复杂, 尤其是在本次研究中, 通过实验结果可以发现, 8000例样本中, 仍然有1.00%的样本存在不合格的情况, 通过对导致样品不合格的原因进行详细分析以后, 发现导致样本不合格的主要原因包括:组织切片脱落26.25%(21/80)、染色不均匀21.25%(17/80)、染色模糊16.25%(13/80)、切片污染18.75%(15/80)、染色困难17.50%(14/80)。因此, 为了能够提高HE染色效率, 就要对实验室的相关染色技术进行不断的提高, 从而有效满足医院病理诊断的需要。
  在本次研究中, 导致样品不合格的主要原因之一是切片染色不均匀, 造成切片染色不均匀的主要原因包括:技术人员在对样本进行取材和固定的时候, 由于固定的位置不恰当、样本的脱水时间太短, 切片的厚度不均匀、切片上存在横纹、染色过程中处理不恰当等, 导致染色效果不佳。同时, 由于切片组织的取材较大, 切片较厚, 固定样本时采用的固定液浓度较大, 导致组织不能完全被固定好, 从而影响了中间组织的着色效果, 造成着色模糊等现象发生, 另外, 脱水时间较短, 从而导致切片中存在水分, 导致切片的透明度较低, 影响最终的着色效果[3-5]。
  导致样品不合格的另一个重要原因为染色模糊, 切片染色模糊主要是因为在检验过程中, 工作人员在取材的时候, 操作不当导致的, 例如在取材过程中, 标本出现自溶情况, 在固定样本的时候不及时, 从而引起组织结构模糊的现象发生。另外, 在采用固定剂进行固定的时候, 也是非常重要的, 如果固定不良, 就会导致切片染色模糊的现象发生, 另外, 在使用乙醇进行标本固定的时候, 也有可能导致染色出现模糊的现象发生。在取材过程中, 如果选取了淋巴组织, 会导致切片发灰, 这是由于淋巴细胞较为密集、其结构较为复杂, 同时, 在制作样本的时候, 温度过高、染料质量较差、细胞分化太严重等, 也会导致染色模糊[6-8]。   而染色中组织切片脱落主要是与组织自身有关, 同时也与工作人员在处理样本时, 处理不当等原因有关。切片污染和染色困难主要是因为样本中的组织被污染, 是染液、试剂等不干净导致的[9-12]。
  综上所述, 病理技术HE染色在病理诊断中应用效果较好, 其样品合格率较高, 但是在进行染色的过程中, 需要进行更加细致的操作, 针对组织切片脱落、染色不均匀、染色模糊、切片污染、染色困难等影响样本合格的因素进行有效规避, 以降低样本被污染的几率, 防止出现不合格样本, 进而提高诊断效率。通过上述保障, 病理技术HE染色值得在临床病理诊断中推广。
  参考文献
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  [2] 徐加誉, 廖子龙, 张培荣. 病理技术HE染色在病理診断中的应用效果评价. 黑龙江中医药, 2018, 47(5):137-138.
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  [12] 马峰, 刘仲祥. 病理技术HE染色用于病理诊断中的价值分析. 中国实验诊断学, 2015(12):2103-2104.
  [收稿日期:2019-02-14]
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