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EB病毒感染儿童的临床特征与实验室检查结果分析

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   【摘要】 目的:分析EB病毒與其他病原体感染患儿后引起的血常规与生化检验指标的变化特点,探讨各项指标对诊断EB病毒感染的重要意义。方法:收集2017年7月-2019年6月在本院住院部诊治的、临床出现发热、咽炎、淋巴结肿大的798例患儿,进行EB病毒核酸、血常规以及生化项目的检测,并将结果进行统计学分析。结果:与EBV-DHA阴性患儿相比,EBV-DHA阳性患儿红细胞总数、淋巴细胞绝对值、单核细胞绝对值、嗜碱性细胞绝对值、淋巴细胞百分比、嗜碱性细胞百分比均较高,而嗜酸性粒细胞绝对值、嗜酸性粒细胞百分比、单核细胞百分比均较低,差异均有统计学意义(sig<0.05)。与EBV-DHA阴性患儿比较,EBV-DHA阳性患儿L-乳酸脱氢酶、α-羟丁酸脱氢酶和腺苷脱氨酶数值较高,肌酸激酶较低,差异均有统计学意义(sig<0.05)。EBV-DNA载量与ADA分泌水平呈正相关(sig<0.01)。ADA以23.25 U/L为最佳临界值时,其诊断儿童感染EBV的灵敏度和特异度分别为0.654、0.860。结论:EB病毒感染引起的血常规和生化指标的变化有别于其他病原体,腺苷脱氨酶可能是有效判断EB病毒感染的早期指标。
   【关键词】 EB病毒 血常规 生化指标
   Analysis of Clinical Characteristics and Laboratory Results of Epstein-Barr Virus Infection in Children/HUANG Lu. //Medical Innovation of China, 2020, 17(15): -152
   [Abstract] Objective: To analyze the characteristics of complete blood count and biochemical test in children infected with EBV or other pathogens, and to explore the significance of these indexes in diagnosing EBV infection. Method: A total of 798 children with fever, pharyngitis and lymph nodes treated in our hospital from July 2017 to June 2019 were selected and detected for EBV nucleic acid, complete blood count and biochemical test, and the results were statistically analyzed. Result: Compared with EBV-DNA negative children, the red blood counts, the absolute value of lymphocytes, the absolute value of monocytes, the absolute value of basophils, the percentage of lymphocytes and the percentage of basophils in EBV-DNA positive children were higher, while the absolute value of eosinophils, the percentage of eosinophils and the percentage of monocytes in EBV-DNA positive children were lower, there were statistical significance (sig<0.05). For biochemical test indexes, the values of L-lactate dehydrogenase, α-hydroxybutyrate dehydrogenase and adenosine deaminase in EBV-DNA positive children were higher, while the values of creatine kinase were lower, the differences were statistically significant (sig<0.05). The load of EBV-DNA presented a positive correlation with ADA secretion (sig<0.01). While the best cut-off value of ADA was 23.25 U/L, the sensitivity and specificity of diagnosing EBV infection in children were 0.654 and 0.860 respectively. Conclusion: The changes of complete blood count and biochemical test indexes caused by EBV infection are different from other pathogens. Adenosine deaminase may be an effective early index to diagnose EBV infection.
   [Key words] Epstein-Barr virus Complete blood count Biochemical test index    First-author’s address: Jiangmen Maternity and Child Health Care Hospital, Jiangmen 529000, China
   doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2020.15.038
   Epstein-Barr Virus(EBV)属于人类γ疱疹病毒,是第一种被发现具有致癌能力的病毒,每年大约有20万的肿瘤发生与EBV有关。发展中国家EBV相关肿瘤的发生率比发达国家要更高[1]。EBV可长期潜伏于人体内,世界上大约有95%的成人携带EBV,多数表现为无症状的长期感染,这种持续性感染跟EBV与B细胞的独特作用有关[2]。EBV可以导致多种疾病的发生,如传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis,IM)、慢性活动性EBV感染(chronic active EBV infection,CAEBV)、EBV相关噬血细胞性淋巴组织细胞增生症(EBV-associated haemophagocytic lymphohistiocytosis,EBV-HLH)、移植后淋巴增生性障碍疾病(posttransplant lymphoproliferative disorders,PTLD)、Burkitt巴瘤、Hodgkin’s淋巴瘤、非Hodgkin’s淋巴瘤。EBV也能引起上皮肿瘤的发生,包括鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)与EBV相关胃癌(gastric carcinoma,GC)等[3]。
   EBV的原发感染可以引起IM的发生,IM的临床“三联征”为发热、咽炎和颈淋巴结肿大,可合并肝脾肿大和肝功能异常,部分病例出现皮疹、眼睑水肿等临床症状,病程较长,治愈过程较痛苦。实验室检查是否感染EBV主要通过血常规、嗜异凝集抗体、肝功能、EBV相关抗体和核酸检测等方法来进行[4],近几年核酸检测成为诊断EBV感染的重要指标。
   对于血常规检查,过往国内的研究一般围绕血常规中的红细胞、白细胞和血小板这几个指标进行对比,并没有深入地对各项血液成分进行分析。本研究对2017年7月-2019年6月本院疑似EBV感染患者的临床资料以及实验室检查结果进行回顾性分析,系统地分析EB病毒感染对血常规多项指标的影响、EB病毒感染所引起的血液成分变化的趋势以及EB病毒感染对部分生化指标的影响。并将探讨常规检查中是否存在判断EB病毒感染的相關有效指标,在此基础上,研究EB病毒与其他病原体所引起的血常规与生化指标变化的区别,为下一步研究EB病毒感染以及在淋巴细胞中复制的作用靶点及机制提供基础与方向。现报道如下。
  1 资料与方法
  1.1 一般资料 收集2017年7月-2019年6月在本院住院部诊治的798例患儿的资料。纳入标准:临床出现发热、咽炎、淋巴结肿大、肝脾肿大或不明原因皮疹的12岁以下患儿。排除标准:具有基础性疾病或其他器官功能性疾病。本研究已经伦理学委员会批准同意。
  1.2 方法 收集患儿临床资料,包括临床特征和实验室检查结果。EBV核酸检测试剂盒(荧光定量PCR法)来自西安天隆科技有限公司,采用美国BIO-RAD公司荧光定量PCR仪进行检测,以拷贝数>500拷贝/mL计为阳性。血常规检验试剂来自希森美康(日本),仪器为XN-2800。谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、L-乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)、和腺苷脱氨酶(ADA)试剂购于北京利德曼有限公司,检测仪器为TBA-2000FR(日本东芝)。
  1.3 统计学处理 采用SPSS 17.0软件对所得数据进行统计分析,计量资料用M(P25,P75)表示,两组比较采用秩和检验(Mann-Whitney U检验);计数资料以率(%)表示。以P<0.05为差异有统计学意义。
  2 结果
  2.1 EB病毒感染情况 798例疑似EB病毒感染患儿,年龄13 d~12岁;其中男患儿447例(56.0%),婴儿(0~12个月)93例,幼儿(1~3岁)243例,学龄前儿童(4~6岁)87例,学龄儿童(6岁以上)24例。女患儿351例(44.0%),婴儿(0~12个月)71例,幼儿(1~3岁)184例,学龄前儿童(4~6岁)71例,学龄儿童(6岁以上)25例。EBV-DNA阳性158例,阳性率为19.8%,其中男93例(占男性患儿的20.8%),女65例(占女性患儿的18.5%)。EBV感染多发生在幼儿、学龄前儿童中和学龄儿童,很少发生在婴儿(阳性率为2.4%)。798例患儿年龄分布,见表1。
  2.2 临床症状 EBV感染患儿在临床上主要表现为发热(153例,占96.84%)、咽峡炎(94例,占59.49%)、淋巴结肿大(64例,占40.51%),另外部分患儿表现为眼睑水肿(19例,占12.03%)、肝脾肿大(12例,占7.59%)和皮疹(7例,4.43%)。其中44例患儿感染EBV后发展为IM,其余多表现为上呼吸道感染。
  2.3 EBV-DNA阳性和阴性患儿血常规检查结果比较 与EBV-DNA阴性患儿比较,EBV-DNA阳性患儿红细胞总数、淋巴细胞绝对值、单核细胞绝对值、嗜碱性粒细胞绝对值、淋巴细胞百分比、嗜碱性粒细胞百分比均较高,差异均有统计学意义(sig<0.05);而嗜酸性粒细胞绝对值、嗜酸性粒细胞百分比、单核细胞百分比均较低,差异均有统计学意义(sig<0.05);但两者血小板总数、白细胞总数、中性粒细胞绝对值、中性粒细胞百分比比较,差异均无统计学意义(sig>0.05)。见表2。
  2.4 EBV-DNA阳性患儿和阴性患儿生化检查结果比较 EBV-DNA阳性患儿中157例、EBV-DNA阴性患儿中623例进行了ALT、AST、α-HBDH、LDH和CK的检测;EBV-DNA阳性患儿52例、EBV-DNA阴性患儿121例进行ADA的检测。两者ALT和AST比较,差异均无统计学意义(sig>0.05)。而EBV-DNA阳性患儿LDH、α-HBDH和ADA均较EBV阴性患儿高,差异均有统计学意义(sig<0.05)。EBV-DNA阳性患儿CK较EBV-DNA阴性患儿低,差异有统计学意义(sig<0.05)。见表3。将EBV-DNA拷贝数取对数值,与对应的患儿ADA水平做线性回归分析,结果显示EBV-DNA载量与ADA分泌水平呈正相关(相关系数r=0.543,sig<0.01),见图1。对ADA进行受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析,其曲线面积为0.743,取ADA判断EBV感染的最佳临界值(23.25 U/L),诊断灵敏度和特异度分别为0.654、0.860。见图2。   3 讨论
   儿童早期原发感染EBV后,多表现为无明显症状或者表现为轻微的上呼吸道感染症状,但有部分患儿症状较严重,发展为IM。现在多用EBV特异性抗体和EBV-DNA载量检测诊断EBV的感染情况[5]。近年来文献[6-7]报道检测全血的EBV-DNA载量对于诊断儿童EBV感染有重要意义,全血中的EBV-DNA对鼻咽癌患者的预后分析有重要意义[8]。本研究利用荧光定量PCR法检测患儿全血中的EBV-DNA载量,并分析EBV-DNA与血常规及生化各项指标的关系。
   血常规是临床最常用的检测项目之一,通过对血液中的不同成分,包括红细胞、白细胞、血小板等数量及形态的变化,对感染性疾病的诊断和治疗效果有重要的临床指导意义。有研究表明血常规对分析肺癌患者有重要作用[9]。EB病毒可感染淋巴细胞[10],对比其他病原体,EB病毒感染可能对淋巴细胞或其他的血液成分有特殊的影响。而血常规又是医生临床诊断最快捷有效的方法之一,因此分析EB病毒与其他病原体对血常规指标影响的异同有重要意义。
   目前国内有多项研究表明,CRP联合血常规检验可以作为判定细菌或病毒感染的一种有效方法[11-12],然而研究一般只对血常规中的红细胞、白细胞和血小板这几个指标进行对比,并没有深入地对各项血液成分进行分析,亦无法判断患者感染的具体病原体种类。本研究系统地分析EB病毒感染对血常规多项指标的影响,探讨血常规检验结果中是否存在判断EB病毒感染的相关有效指标,加快临床诊断EB病毒感染的速度。
   人体中正常成熟的白细胞可以分为五类:中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞。比较EBV-DNA阳性和阴性患儿的血常规结果,两者白细胞总数比较,差异无统计学意义(sig>0.05);但EBV-DNA阳性患儿淋巴细胞和单核细胞百分比和绝对值均比EBV-DNA阴性患儿高(sig<0.05),而中性粒细胞数绝对值和百分比比较差异均无统计学意义(sig>0.05)。嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞虽然都在正常范围内,但EBV-DNA阳性患儿嗜碱性粒细胞绝对值和百分比均较EBV-DNA阴性患儿高,而嗜酸性粒细胞则呈相反結果。嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞是免疫反应和过敏反应过程中极为重要的细胞[13-14]。同属人类疱疹病毒的HSV-2感染小鼠生殖道后,阴道和子宫的嗜酸性粒细胞有增高现象,可能与其引起的变态反应有关[15]。而目前关于EBV与嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞关系的研究还比较少,本研究结果显示,EBV感染对这两项指标的影响具有特异性,但其中的机制还不清楚,推测与EBV引起的免疫反应相关。可见EBV与其他病原体引起的血液成分的变化不一,因此研究血常规各项指标对EBV感染有重要意义。
   EB病毒感染会引起多种临床症状,如发热、咽炎、颈淋巴结肿大、肝脾肿大、肝肾功能异常等[16-17]。EB病毒感染可引起肝功能指标AST明显升高,表示EB病毒感染会导致肝功能异常。不过,与其他病原体感染患儿相比,EBV-DNA阳性患儿和阴性患儿ALT、AST比较,差异均无统计学意义(sig>0.05)。但是,对于ADA这个指标,EBV-DNA阳性患儿明显高于EBV-DNA阴性患儿,且ADA数值与EBV-DNA载量成正相关线性关系,说明ADA可作为区别EB病毒与其他病原体感染的早期有效指标,ROC曲线分析结果也符合这一推论。
   ADA是参与嘌呤代谢的重要酶类,广泛分布于人体各个组织中,以胸腺、脾和淋巴组织中含量最高,与机体细胞免疫活性有关。ADA主要存在于红细胞、淋巴细胞和粒细胞中,参与淋巴细胞的增殖、分化和成熟,其活性是反映肝功能损伤的敏感指标[18-19]。临床研究表明,ADA在诊断和评估IM患者疗效有重要意义[20],但是目前对于EB病毒感染与ADA关系的研究还很少。国外有研究提出EBV编码的RNA可能与调节ADA蛋白翻译相关[21],高水平的ADA分泌可抑制EB病毒感染引起的免疫反应,从而促进EB病毒的潜伏和裂解感染。因此,ADA可能是EBV调控宿主免疫的有效靶点,EBV通过增加ADA的表达水平抑制机体免疫反应,有助于病毒自身的感染和复制。但EBV对ADA的作用以及相关机制仍有待研究。
   综上所述,EBV感染引起的血液成分变化与其他病原体不同,可能与其引起的免疫反应有关。EB病毒感染可引起ADA的明显升高,ADA可能是有效判断EB病毒感染的早期指标。
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  (收稿日期:2010-03-09) (本文编辑:程旭然)
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