东方百合离体快繁技术
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摘要：介绍了东方百合的离体快繁技术包括外植体的选择及培养、培养基的选配、生根苗的移栽及驯化和大田栽培及管理等。
关键词：东方百合；离体快繁；外植体；驯化；栽培
中图分类号：S681 文献标识码：A 文章编号：1002-2910(2011)02-0057-02
百合(Lilium，spp)是世界著名的观赏花卉，有“百年好合”之意，乃吉祥如意之花。东方百合花大而艳丽，叶片青翠娟秀，作为鲜切花更是深受消费者喜爱，是最主要的切花品种之一。东方百合种球以进口为主，价格昂贵，常规的分球繁殖系数较低，单株百合年产1～3个小鳞茎，不能满足市场的需求，并且长期营养繁殖易感染病毒，造成种性退化，影响其品质。利用离体快繁技术不但能脱除病毒，恢复其品质，而且能快速大量繁育出优质种球，满足市场需求。具有很高的经济价值和开发潜力。笔者对东方百合的离体快繁技术进行了深入的研究，取得成功并应用于生产，现将东方百合离体快繁技术介绍如下。
1 材料与方法
1.1 外植体的选择与消毒
百合的很多器官都可以用作启动外植体，如鳞片、叶片、花茎、根和子房等，但利用鳞片、子房作为外植体更容易建立无菌繁育体系。百合的外层鳞片分化能力最强，同一鳞片下部的分化能力强。取鳞片或子房用流水冲洗30分钟左右，然后用0.2％～0.5％的洗洁精稀释液洗4～6次，最后用清水清洗后晾干备用。在无菌操作台上，将鳞片或子房放入70％酒精中浸泡20～30秒钟，取出迅速放入0.3％的升汞溶液中浸泡2～3分钟，最后用无菌水冲洗4～6次。取出晾干后，用剪刀将切口剪去，分成3段接种到诱导分化培养基中。接种时将鳞片内侧向上平放，有利于鳞片的诱导分化。
1.2 培养基和培养条件
诱导分化和增殖培养基用MS做基本培养基。诱导分化培养基中添加6-BAl.2mg/L，2.4～D0.5mg/L，NAA0.2mg/L,3％蔗糖(可用绵白糖或白砂糖代替)和0.6％琼脂；不定芽增殖培养基中添加6-BAlmg/L，NAA0，1mg/L，3％蔗糖和0.6％琼脂。生根培养基用1/2MS做基本培养基，添加NAA0.2mg/L，IBA0.5mg/L，2％蔗糖和0.7％琼脂。培养条件为pH值5.5左右，光照强度1500～2000LX左右，生根阶段可调高至3000LX左右，光照时间12小时左右，温度控制在21～25℃。
1.3 注意事项
外植体培养初期先进行暗培养5～7天，有利于愈伤组织的形成。在增殖培养过程中，由于分生速度较快，一些分化苗过于细弱，不利于继续增殖培养或生根培养，此时需要进行培壮培养，在增殖培养基中加入0.5～1mg/L多效唑(MET)可使细弱、生长过快的小苗生长缓慢而矮壮，叶片浓绿而厚。
1.4 培养效果
百合鳞片或子房暗培养一周后，切口附近开始膨大，有愈伤组织形成。15天左右幼小鳞茎形成，35天左右鳞茎周径长到2～5mm，叶长3～5cm。将诱导小鳞茎分切接种到增殖培养基中，月增殖率5倍以上。将鳞茎周径在3mm以上的种球接种到生根培养基中，剪去叶片2/3左右，7天左右即有根形成，35天左右平均根数3～5条，叶长3～8cm，生根率80％以上。
2 生根苗的驯化移栽
离体培养的百合再生植株长期在营养丰富的无菌条件下生长，根系活力低，幼嫩的叶片保护组织极弱，直接移入土壤中成活率很低，应使组培苗由异养条件逐渐过渡到大田环境。
2.1 炼苗
将生根试管苗移人驯化温室，温室具备遮阳、保湿系统。不开封口炼苗5～7天，接受自然光照。打开封口膜炼苗3～4天，炼苗时间不宜过长，否则培养基会滋生杂菌，感染试管苗。
2.2 配制培养土
生根试管苗移栽前3～4天，将河沙、蛭石和珍珠岩以3:5:2的比例混合，用0.3％的高锰酸钾和多菌灵500倍液喷洒基质，拌匀后盖膜消毒培养土。移栽时将培养土盛入培养穴盘中待用。
2.3 移栽
将生根试管苗从培养瓶中用镊子轻轻取出，用水将根部培养基洗净，放人盛有1000倍多菌灵溶液中浸泡3～5分钟，取出栽入穴盘中，浇水定植即可。
2.4 驯化管理
驯化期间，温室采用50％遮阳网遮荫，电子喷雾设施间隔喷雾水保湿。百合的根属于肉质根，吸收水分能力强，喷雾水不宜过勤。移植成活后及时喷施0.5％的过磷酸钙和0.1％的尿素营养液促进幼苗生长；减少喷雾次数，减少遮阴面积，促使组培苗长壮。
3 田间管理
东方百合组培苗驯化成功后，定植于大田中，尽快培育出适合于生产用的种球。东方百合对土壤要求不严，但粘重的土壤不宜栽培。定植株行距以5cm×10cm为宜。加强肥水管理，除草一定要精细，防止损伤幼苗。
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