浅析地表水叶绿素a的测定

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　　摘 要：本文以对马鹿山公园湖水、三门江大桥断面水中的叶绿素a的含量测定，并行了空白试验、检出限、精密度、加标回收等各项特性指标试验。结果表明：方法的空白为0.2～0.6ug/L，检出限为1.6ug/L，测定下限为6.3ug/L，精密度为2.1%～4.5%，实际样品加标回收率为80.6%。
　　关键词：叶绿素a;地表水;特性指标
　　叶绿素a存在于所有的浮游植物中，大约占有机干重的1%～2%。叶绿素a本身对环境没有危害，但它是估算浮游植物生物量的重要指标，可以通过测定水中浮游植物叶绿素a的含量，掌握水体的初级生产力情况和富营养化水平，在环境监测中，叶绿素a含量是评价水体富营养化的指标之一。
　　1 实验部分
　　1.1 方法原理
　　选用分光光度法测定水质叶绿素 a 的含量，将水样用玻璃纤维滤膜过滤，以 90%丙酮为提取液，研磨提取地表水中的叶绿素 a，研磨后浸泡、离心后测定其 750nm、664nm、647nm、630nm 波长下的吸光度值，计算叶绿素 a 的含量。
　　1.2 试剂和材料
　　①叶绿素a纯品（AS 479-61-8，5mg），江莱生物;②丙酮（CH3COCH3），分析纯;③碳酸镁（MgCO3），分析纯。
　　2 结果与分析
　　2.1 实验室空白
　　以去离子水代替水样，按照样品分析的全部步骤分析（抽滤、研磨、浸泡、离心、针式过滤、比色），测定空白样品。测定结果0.2～0.6ug/L低于方法检出限。
　　2.2 检出测定下限
　　方法检出限：按照HJ 168-2010方法确定检出限，按照样品分析的全部步骤，对浓度值为估计方法检出限值2～5倍的样品进行7次平行测定，计算測定结果的标准偏差。
　　本方法采用10mm比色皿，取样体积为200mL，提取体积为10mL时，测定叶绿素a的检出限为1.6ug/L，测定下限为6.3ug/L，方法满足地表水营养状态评价分级标准限值的要求。
　　3 密度和准确度
　　3.1 精密度
　　对河水、人民广场湖水、柳侯公园湖水地表水样品进行6次测定，测定结果的相对标准偏差分别为2.1%、4.5%、3.6%，符合方法9.1精密度范围，测定结果详见表2。
　　3.2 准确度
　　对人民广场湖水实际水样进行加标测定，加标回收率80.6%测定结果符合方法9.2准确度的范围，测定结果详见表3。
　　4 实际样品的测定
　　4.1 2018年6月12日，对柳州市马鹿山公园湖水、柳州市三门江大桥断面水中的叶绿素a进行监测
　　4.2 样品制备
　　4.2.1 过滤
　　用量筒分别量取马鹿山公园湖水水样200mL、三门江大桥断面水水样200mL进行过滤，最后用少量蒸馏水冲洗滤器壁。过滤时负压不超过50kPa，抽滤结束，用镊子将滤膜取出，将样品的一面对折，用滤纸吸干滤膜水分。
　　4.2.2 研磨
　　将过滤好的样品滤膜分别放置于研磨装置中，加入3mL～4mL90%丙酮溶液，研磨至糊状。补加3mL～4mL90%丙酮溶液，继续研磨，并重复1～2次，保证充分研磨5min以上。将完全破碎后的细胞提取液转移至玻璃刻度离心管中，用90%丙酮冲洗研钵体及研磨杵，一并转入离心管中，定容至10mL。
　　4.2.3 浸泡提取
　　将离心管中的研磨提取液充分振荡混匀后，用铝箔包好，放置于4℃避光浸泡提取2h以上，不超过24h。在浸泡过程中要颠倒摇匀2～3次。
　　4.3监测结果
　　
　　5 结论
　　本文以对鹿山公园湖水、三门江大桥断面叶绿素 a 的含量测定，各项特性指标试验结果良好，能够满足环境水质监测的地表水叶绿素a的分析要求。该方法准确可靠，具有普遍适用性，易于推广使用。
　　参考文献：
　　[1] HJ 897-2017.水质叶绿素a的测定分光光度法[s].北京：环境保护局，2018.
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