利用pH梯度萃取法提取中药大黄中的游离蒽醌组分

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　　摘 要：目的：利用课堂教材上的经典提取方法-pH梯度萃取法，提取中药大黄中的游离蒽醌组分（大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚），并计算其含量，考察课堂教学实验中提取大黄游离蒽醌中各组分总含量是否符合中国药典规定。方法：利用pH梯度萃取法提取并计算各组分含量。结果：大黄酸0.018%、大黄素0.48%、芦荟大黄素0.38%、大黄酚0.76%、大黄素甲醚0.38%，结论：大黄游离蒽醌组分的总含量为2.02%，符合中国药典不低于1.5%的规定。
　　关键词：大黄;pH梯度萃取法;游离蒽醌;大黄酸;大黄素
　　大黄为蓼科植物掌叶大黄Rheum palmatum L.、唐古特大黄Rheum tanguticum Maxim.ex Balf.或药用大黄Rheum officinale Baill.的干燥根及根茎。具有泻下攻积，清热泻火，凉血解毒，逐淤通经，利湿退黄等功效。大黄中含有多种游离羟基蒽醌组分及其苷类成分，已知的游离羟基蒽醌主要有大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚和大黄酚。pH梯度萃取法是提取中药大黄中游离蒽醌的经典方法，也是学校实验室中常用方法，其原理是改变溶剂系统pH，进而改变组分的存在状态，也就是改变了组分在溶剂系统中的分配系数。根据蒽醌中各组分酸性的大小，使用不同pH值的碱液依次从有机溶剂中萃取出蒽醌类组分，再分别酸化碱液，蒽醌类成分即可析出沉淀。本实验旨在考察课堂实验中的中药大黄提取产物中的游离蒽醌总量是否符合中国药典的规定。本次实验由本校三年制中专学生来完成，中专学生有如下特点：知识基础相对薄弱，掌握的知识点不牢固;思维敏捷，动手能力强，愿意完成实验类项目的“挑战”;愿意接受新事物、新现象，寻求创新。
　　1 实验仪器
　　水浴锅、抽滤瓶、布氏漏斗、真空泵、烧杯、玻璃棒、三角瓶、试管、pH试纸、毛细管、色谱柱。
　　2 实验材料
　　大黄粗粉、20%硫酸水溶液、氯仿、5%氢氧化钠溶液、浓盐酸、pH为8的缓冲溶液（自制）、pH9.9的缓冲溶液（自制）、5%碳酸钠-5%氢氧化钠（9：1）缓冲溶液（自制）、5%氢氧化钠溶液（自制）、蒸馏水（校实训车间提供）。
　　3 实验方法
　　3.1 缓冲液的配制
　　（1）pH8緩冲溶液的配制。精密称取Na2HPO4·12H2O（0.2 mol/L）35.3200 g，加入到500 ml蒸馏水中，使之溶解，得到溶液①。精密称取枸橼酸·1 H2O（0.1 mol/L）10.5050 g，加入到500 ml蒸馏水中，使之溶解，得到溶液②。精密量取溶液①389 ml，精密量取溶液②11 ml，混匀即得到pH8缓冲溶液。
　　（2）pH9.9缓冲溶液的配制。称取Na2CO3 2.12 g，加入到200 ml蒸馏水中，使之溶解，得到溶液①。称取NaHCO3 1.68 g，加入到200 ml蒸馏水中，使之溶解，得到溶液②。溶液①和溶液②直接混合，即得到pH99缓冲溶液。
　　3.2 提取工艺流程图
　　pH梯度萃取法提取中药大黄中的游离蒽醌组分流程图
　　3.3 大黄酚和大黄素甲醚的柱层析分离
　　5 讨论
　　从表2中可以看出，实验课堂中的3个小组在大黄酸、大黄素提取上的平行性不好，有可能是因为萃取时乳化层混入，而在芦荟大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的提取上差异较小，组2中的大黄酸未提取成功，可能是因为在做第一步萃取的过程中，缓冲液配制未完全溶解，致使大黄酸提取的量为痕量。大黄游离蒽醌中的大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚和大黄酚五个组分的总量为2.02%，符合中国药典中不低于1.50%的规定。下次带其他班级再做大黄游离蒽醌组分分离的时候，要注意以下几点：其一，要充分考虑到如何在萃取时消除乳化层;其二，缓冲液的配制要现用现配，防止有沉淀析出，有沉淀析出后会导致缓冲液的pH值不准确，给后续实验带来影响。
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