核酸检测在献血者标本内乙肝病毒检测中的应用价值分析

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　　【摘要】 目的 探究核酸检测（NAT）在献血者标本内乙型肝炎（乙肝）病毒（HBV）检测中的应用价值。方法 51份献血者乙肝检验可疑标本， 所有标本均分别施以电化学发光免疫分析（ECLIA）、酶联免疫吸附测定法（ELISA）以及NAT检测。以ECLIA检测结果作为金标准， 对比其余两种检测方法对HBV检测的准确率、灵敏度和特异度。结果 ECLIA检测结果显示， 51份獻血者乙肝检验可疑标本中HBV检测阳性17例， 阴性34例， HBV阳性检出率为33.33%。NAT对HBV检测的准确率、灵敏度、特异度依次为98.04%、100.00%、97.06%， ELISA对HBV检测的准确率、灵敏度、特异性依次为76.47%、70.59%、79.41%， NAT对HBV检测的准确率、灵敏度、特异度均明显高于ELISA， 差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 乙肝患者HBV检测中采用NAT可有效提高检测特异度、敏感度和准确率， 减少窗口期， 提高检测安全性， 值得临床信赖和进一步推广。
　　【关键词】 核酸检测;酶联免疫吸附测定法;乙型肝炎;乙型肝炎表面抗原
　　DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.14.021
　　乙肝是一种由病毒引发的传染病， 临床表现为食欲减退、恶心、上腹部不适、肝区痛、乏力， 患者肝功能明显下降， 该疾病若不能被有效控制可能导致多种肝脏疾病如肝硬化等[1]。截止2018年， 全球约有乙肝感染者2.57亿， 我国约有乙肝感染者9000万， 对于该疾病的快速诊断和治疗已成为全球性公共卫生问
　　题[2]。HBV为一种反转录病毒及DNA病毒， 乙肝表面抗原（HBsAg）为HBV感染的诊断标志， 对其精准判断可以对乙肝进行快速诊断[3]。HBV可经血及血液制品传播， 对输血安全构成威胁， 同时HBV感染是社会上一个比较敏感的问题， 感染者在学习、生活和工作中， 尤其是一些特殊的岗位以及行业会受到限制。
　　因而， 准确诊断是否感染HBV具有重要的临床意义。我国现行的献血法明确规定， HBsAg阳性血液不得用于临床输血。乙肝检测存在一个窗口期的难题， 为了减少受血者通过输血感染病毒的风险， 保证临床用血的安全。ELISA作为一种较早的检测方法， NAT与其存在一定的差异， 为探究NAT应用于献血工作中HBV检测中的价值， 现以本中心2018年1月～2019年3月收集的51份献血者乙肝检验可疑标本作为研究对象， 对比ELISA和NAT对HBV检测的准确率、灵敏度和特异度， 现报告如下。
　　1 资料与方法
　　1. 1 一般资料 选取2018年1月～2019年3月本中心收集的51份献血者乙肝检验可疑标本， 所有献血者均符合现行的卫生部（现卫健委）发布的《献血者健康检查要求》（GB18467-2001）。献血者年龄18～50岁， 平均年龄（29.32±6.90）岁;男24例， 女27例。
　　1. 2 方法 所有标本均分别施以ECLIA、ELISA以及NAT检测。所有献血者标本均分别取3份静脉血， 各5 ml， 分别置于EDTA-K2抗凝管和核酸专用管中， 分别进行血清学检查和相应的诊断检测[4]。
　　1. 3 仪器与相关试剂 检测仪器：离心机， 酶标仪， 罗氏全自动电化学发光免疫分析仪， 罗氏Roches201核酸检测仪器， 酶联免疫检测分析仪（瑞士Hamilton FAME24/30）， 自动酶联免疫检测加样仪（瑞士Hamilton， STAR）。所用试剂为北京万泰生物药业股份有限公司提供的HBsAg血清学标志物检测试剂盒、罗氏全自动电化学发光免疫分析仪配套试剂、罗氏ROCHEs201核酸检测试剂。
　　1. 4 观察指标 以ECLIA检测结果为金标准， 对比两种检测方法对HBV检测的准确率、灵敏度和特异度。
　　1. 5 统计学方法 采用SPSS20.0统计学软件对数据进行统计分析。计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。
　　2 结果
　　ECLIA检测结果显示， 51份献血者乙肝检验可疑标本中HBV检测阳性17例， 阴性34例， HBV阳性检出率为33.33%。NAT对HBV检测的准确率、灵敏度、特异度均明显高于ELISA， 差异具有统计学意义（P<0.05）。见表1， 表2， 表3。
　　3 讨论
　　HBV由禽嗜肝DNA病毒属、正嗜肝DNA病毒属组成， 正嗜肝DNA病毒是引起乙肝的主要菌属[5]。近年来， 随着我国医疗科技、基因检测技术的不断发展， 基因诊断在疾病的治疗中发挥着重要作用， 提取核酸是基因诊断成功的关键所在。乙肝的血清学检查是检查肝炎病毒的金标准， 主要针对病毒表面抗原的检测[6]。HBsAg、乙肝表面抗体（抗-HBs）、乙肝e抗原（HBeAg）、乙肝e抗体（抗-HBe）、乙肝核心抗体（抗-HBc）被称为是乙肝五项， 是HBV感染常用的检测指标[7]。如在乙肝者血液检查中检测出HBV的HBsAg、HBeAg、抗-HBc为阳性， 在临床上称为“大三阳”;在其血液中检测出HBV的HBsAg、抗-HBe、抗-HBc为阳性， 在临床上称为“小三阳”[8]。HBV的主要传播途径是血液传播， 包括血制品和输血两方面， 其次是母婴传播， 即在分娩前后， 母体携带HBV， 并将HBV传染给新生儿， 母乳喂养也会传播HBV[9]。
　　ELISA是临床检测HBV常用方法之一， 方便、快捷、简单、准确率较高， 但ELISA的检查存在一定的窗口期， 患病初期可能因病毒水平低而引起假阴性结果， 漏诊率较高。NAT是近几年逐渐推广的诊断技术， 可从基因水平进行病毒DNA检测， 准确率高， 可有效缩短窗口期， 有效弥补了ELISA的不足， 同时降低病毒经血液传播的风险， 安全性更高[10]。NAT是直接检测病毒核酸， 视为降低血清学窗口期漏检风险最直接、最可靠的方法， 降低输血感染的风险， 同时减少血液浪费。ECLIA为HBV检查的常用方法， 通过三联吡啶钌与蛋白质、半抗原激素、核酸等各种化合物结合， 对HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc进行检查。ECLIA在免疫检验期间没有外来光源介入， 消除检验中的光散射问题， 消除噪音信号干扰， 提高HBV标志物检验灵敏度。
　　综上所述， 乙肝患者HBV检测中采用NAT可有效提高检测特异度、敏感度和准确率， 减少窗口期， 提高检测安全性， 值得信赖， 并进一步在血站推广， 提高用血安全。
　　参考文献
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　　[收稿日期：2020-02-12]
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