固本祛瘀方对多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠卵巢功能影响
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【摘要】目的：旨在通过研究固本祛瘀方对PCOS模型大鼠卵巢功能的影响，明确其可能作用机制。方法：应用双氢睾酮（dihydrotestosterone，DHT）诱导复制的PCOS大鼠模型，采用放射免疫法研究性激素（E2、T、P、LH、FSH）水平表达的变化。结果：固本祛瘀方能降低PCOS大鼠血清T、LH水平，降低LH/FSH比值，升高血清E2水平，对血清P及FSH无明显影响。结论：固本祛瘀方能改善PCOS模型大鼠卵巢性周期紊乱、高雄激素血症、LH/FSH比值升高等病理改变。
【关键词】多囊卵巢综合征（PCOS）；固本祛瘀方、卵巢、双氢睾酮
PCOS是一种极为复杂的内分泌和代谢疾病，其发病率在生育期妇女高达5%-10%，占无排卵性不孕症的70%左右[1]。本实验旨在研究固本祛瘀方对PCOS大鼠卵巢功能的影响，探讨其可能作用机制。
1 材料
1.1实验动物雌性Wistar新生幼鼠，与母鼠一起购买。饲养于12h光照/12h黑暗的环境中，母鼠自由摄食和饮水。动物的处理符合国际实验动物使用准则。
1.2主要试剂及仪器双氢睾酮缓释片剂、性激素放射免疫免疫检测Kit、石蜡切片机。
2方法
2.1实验动物分组幼鼠21日龄时，断奶与母鼠分离。随机分为4组，每组12只， ①正常对照组；②模型对照组；③西药对照组；④固本祛瘀组。模型对照组、西药对照组和固本祛瘀组大鼠颈部埋植双氢睾酮缓释片剂制备PCOS大鼠模型。造模后大鼠置于12小时日照/12小时黑暗自由摄食和饮水。3组造模大鼠与正常对照组大鼠在相同条件下喂养，每日观察阴门是否开启及动情周期的变化，定期观察体重和摄食情况。西药对照组与固本祛瘀组大鼠于造模后6周，即大鼠64日龄起，开始分别灌胃给药，连续治疗4周。
2.2药物剂量与方法固本祛瘀方由菟丝子等12味中药组成，由本院制剂室按特定工艺流程煎制、浓缩，制成浓缩液。2-8℃条件下保存备用。通过人与大鼠体表面积比率换算法计算出给药量为35.5g/kg/ml。西药阳性对照药物为氟他胺（上海复旦复华药业有限公司，国药准字H10950220，规格250mg/片），相当于250mg/kg/ml比例于灌胃前配制成溶液。固本祛瘀组与西药对照组大鼠每日灌胃给药，每次1ml，早晚各1次/d，连续4周。
2.3阴道脱落细胞学检查从大鼠给药开始，每天上午进行1次阴道脱落细胞学观察。用光滑吸管吸取少量生理盐水，冲入大鼠阴道内，吸取少量阴道液，涂布于玻片上，直接光镜观察或HE染色。
2.4血清收集及RIA测定性激素浓度各组大鼠静脉取血。4000rpm离心，血清分离后于-80℃保存备用。血E2、T、P、LH和FSH的测定采用特异性的RIA试剂盒，按试剂盒说明书操作。
2.5统计方法各组数据均以均数±标准差（X±S）表示。多组间数据统计采用单因素方差分析（one-way ANOVA）进行比较，继以Student-Newman-Keuls检验。数据用SPSS19软件处理。
3结果
3.1固本祛瘀方对PCOS大鼠动情周期变化规律的影响
表3.1 各组大鼠阴门开启时间(X±S )
**P<0.01 vs正常对照组
如表3.1所见，固本祛瘀组、西药对照组和模型对照组大鼠阴门开启时间与正常对照组比较均有非常显著性差异（P<0.0１），3组造模大鼠阴门开启时间明显迟于正常对照组。
3.2固本祛瘀方对PCOS大鼠血清E2、T及P水平的影响
表3.2各组大鼠血清E2、T及P水平 (X±S )
*P<0.05，**P<0.01 vs 正常对照组，#P<0.05，##P<0.01 vs 模型对照组
如表3.2所见，固本祛瘀组大鼠血清E2水平与模型对照组比较有显著性差异(P<0.05)，固本祛瘀组大鼠血清E2水平明显高于模型对照组。
固本祛瘀组大鼠血清P水平与各对照组比较无统计学差异（P＞0.05），各组大鼠血清P水平相当。
3.3固本祛瘀方对PCOS大鼠血清促性腺激素LH及FSH水平的影响固本祛瘀组、西药对照组大鼠血清LH水平与模型对照组比较均有非常显著性差异(P<0.01)，固本祛瘀组、西药对照组大鼠血清LH水平明显低于模型对照组。而模型对照组大鼠血清LH水平与正常对照组比较有非常显著性差异(P<0.01)，模型对照组大鼠血清LH水平明显高于正常对照组。
固本祛瘀组、西药对照组大鼠LH/FSH比值与模型对照组比较分别有非常显著性、显著性差异(P<0.01、P<0.05)，固本祛瘀组、西药对照组大鼠LH/FSH比值明显低于模型对照组。而模型对照组大鼠LH/FSH比值与正常对照组比较有非常显著性差异(P<0.0１)，模型对照组大鼠LH/FSH比值明显高于正常对照组。
4结论
固本祛瘀方能改善PCOS模型大鼠卵巢性周期紊乱、高雄激素血症、LH/FSH比值升高等病理改变。固本祛瘀方对血清性激素的调节作用可能是通过调节HPOA及改善卵巢局部病理改变而起效。
参考文献
[1]Diamanti K E, Kouli C R, Bergiele A T, et al. A survey of the polycystic ovary syndrome in the Greek island of Lesbos: hormonal and metabolic profile[J].J Clin Endocrinol Metab,1999,84:4006-4011.
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