乙型肝炎病毒DNA与血清标志物的关系
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作者: 胡玲
【摘要】 目的 分析研究乙型肝炎病毒（HBV）脱氧核糖核酸（DNA）与血清标志物（HBV-M）的关系。方法 HBV感染患者血清中HBV-DNA含量采用实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）检测， HBV血清标志物采用酶联免疫吸附法测定。结果 乙型肝炎e抗原（HbeAg）（+）标本HBV-DNA阳性率为100.0%， 明显高于（HbeAg）（-）， 比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论 患者的HBV-DNA阳性率与HBV-M之间存在相关性， 采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测HBV-DNA， 可清晰准确显示患者体内病毒复制情况， 之后为临床预防治疗提供可参考的依据。
【关键词】 乙型肝炎病毒；脱氧核糖核酸；血清标志物
DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.22.023
乙型肝炎为一种严重危及人们生命健康的传染性疾病， 随着慢性乙肝疾病的发展， 会逐步恶化为肝硬化， 甚至形成肝癌[1]。因此， 及时诊断乙肝疾病， 提供及时有效的预后治疗， 对于提高患者生命质量， 效果显著。本次研究中， 分析研究乙型肝炎病毒DNA和血清标志物之间的关系， 对之后临床诊断治疗提供可参考的依据， 总结如下。
1 材料与方法
1. 1 实验材料 选取本院2013年1～12月住院以及门诊收治的500份乙肝患者的血清标本， 男200例， 女300例， 年龄10～72岁， 平均年龄（41.1±8.0）岁。
1. 2 试剂 HBV-DNA检测所需的试剂以及HBV-M所需的试剂盒， 均由江苏默乐生物科技有限公司所提供。
1. 3 仪器 本次检测中所需使用的仪器为实时荧光PCR扩增仪， DNA29620洗衣板， DNM29602GM酶标仪。
1. 4 检测方法 HBV-DNA含量采用实时荧光定量PCR检测， HBV-M采用酶联免疫吸附法测定。
1. 5 统计学方法 采用SPSS18.0统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 实施t检验；计数资料以率（%）表示， 实施χ2检验。P<0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
乙型肝炎e抗原（HbeAg）（+）标本（第1～2组）共190例， HBV-DNA阳性率为100.0%， HbeAg（-）标本（第3～13组）共310例， HBV-DNA阳性率为22.9%。HBsAg（+）标本（第1～6组）共329例， HBV-DNA阳性率为79.3%， HBsAg（-）标本（第7～13组）共171例， HBV-DNA阳性率为0。
HBeAg（+）标本与HBeAg（-）标本对比， 差异有统计学意义（P<0.05）， 两者HBV-DNA平均含量比较差异有统计学意义（P<0.05）。HBsAg（+）标本与HBsAg（-）标本对比， 差异有统计学意义（P<0.05）， 两者的HBV-DNA平均含量对比差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。
3 讨论
乙型肝炎病毒感染为一种世界范围流行的疾病， 我国是HBV的高发地区， 目前该疾病已成为一个严重的社会安全问题。临床及时明确诊断患者疾病， 对于提高临床预后治疗效果显著。HBV感染的病原学诊断依据是根据免疫血清学方法检测HBV-M以及分子生物学方法检查HBV-DNA。HBV-M主要用于评价HBV免疫情况， 而HBV-DNA则为最直接和可靠的病毒复制标志， 也可作为直接判断HBV感染的重要依据[2]。
HBsAg为临床诊断HBV感染最常用的、敏感性最高的血清学标志物。HBV-DNA与HbeAg具有较高的相关性， 为判定HBV复制的一个有效指标， 其中HBV-DNA检出率最高， 检出率为100.0%， 且具有较高的测定均值。HBV-DNA与HBeAg之间呈正相关性， 表明病毒复制活跃， 具有较强的传染性， 同时也表明HBeAg为HBC复制活跃的一个重要标志[3]。小三阳组患者的HBeAg虽为阴性， 但病毒未停止复制， 仅表现为复制有所减少或部分患者有病毒基因变异发生。这样出现的感染对患者造成的伤害更为严重， 甚至会恶化为肝癌或肝硬化。HBsAg阳性而HBcAb阳性的HBV感染患者中， 分析HBV-DNA检出阳性， 可能是因HBV前C信号肽裂解位点发生变异后会HBeAg的翻译产生影响后加重， 导致细胞中蓄积大量的HBeAg前体， 分析这可能是HBV感染患者血清HBeAg显示为阴性的主要原因[4]。第5组中， HBsAg以及HBsAb显示阳性的5例患者中， 1例HBV-DNA显示为阳性， 检出率为20.0%， 分析该情况发生的原因可能是因其他血清标志物浓度太低， 采用免疫法不能准确的检出。第6组中HBsAg阳性4例， 其中仅有1例HBV-DNA显示为阳性， 检出率为25.0%， 分析可能是因HBV处于活跃早期， 血清中尚未出现其他标志物， 因此也存在感染发生的可能性。在第7～8组中， 均无HBV-DNA被检出， 分析可能是因注射乙肝医疗或既往感染而导致， HBV复制受到严重的抑制， 无明显的传染性。在第9～13组中， 也未检出HBV-DNA， 分析可能是因样本检测方法、检测仪器或试剂差异或样本数量太少等原因影响检出结果。
综上所述， 临床通过定量测定HBV-DNA， 可明确机体病毒复制状况下最特异、最敏感指标， 而通过测定HBV-M则可反映病毒感染发生后机体免疫应答情况以及转归过程。临床在诊断乙型肝炎疾病时， 应综合检测血清学指标以及HBV-DNA， 结合采用实时荧光定量聚合酶链反应法， 可显著提高临床诊断准确性， 为之后的临床治疗提供可参考的依据。
参考文献
[1] 赵克开.乙型肝炎病毒DNA定量检测临床应用的若干问题与思考.中华传染病杂志， 2014， 32（6）：321.
[2] 郭晓红.恩替卡韦对乙型肝炎病毒DNA阳性肺结核患者肝功能干预的作用.中国医院药学杂志， 2014， 34（3）：226.
[3] 许达峰.乙型肝炎病毒DNA与肝癌转移复发的关系及外科干预策略.中华外科杂志， 2013， 51（10）：928.
[4] 康文.原发性肝癌患者围手术期乙型肝炎病毒DNA的变化及其影响因素.中华肝胆外科杂志， 2013， 19（9）：681.
[收稿日期：2014-10-30]
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